收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

动态高压微射流技术对聚半乳糖醛酸酶活性与构象的影响

黄波  
【摘要】:动态高压微射流是一种新兴技术,可以对物料进行高速剪切,气穴作用等,其工作压力最高可达200 MPa。聚半乳糖醛酸酶(PG)属于果胶酶家族的一员,果胶是植物细胞壁中的一种结构性多糖,而PG主要是水解组成果胶酸的D-半乳糖醛酸α-1,4-糖苷键,从而降解植物组织。其组织软化功能在食品工业中的果汁提取和澄清中得到广泛使用。本课题通过酶活测定、圆二色谱、紫外吸收光谱和游离巯基与巯基总量的测定来研究动态高压微射流对PG酶活性和构象的影响,同时研究了热、金属离子和乙醇对PG酶的影响,揭示了PG酶活性与构象间存在着的一定的关联性。 通过动态高压微射流对PG酶进行处理,研究了PG酶活性与构象之间的关系。PG酶的最适宜反应温度为50℃。DHPM处理降低了PG酶的活性,降低后的酶活性在76.5%-94.5%。经过DHPM处理后的PG酶的构象分析显示PG酶的二级结构的β-折叠含量降低了,同时PG酶分子结构更为“松散”。其活性变化与β-折叠含量的变化呈一定程度的正相关,但不是简单的线性相关。原来包埋在分子内部的Trp和Tyr残基部分暴露出来,分子表面的二硫键被打断形成巯基,但从分子整体来看,新的二硫键形成的量要多于被打断的量。 通过热和动态高压微射流对PG酶进行处理,在50℃下保温半小时的酶活性最大,在其他温度下保温半小时的酶活性均有所降低,而在70℃下保温半小时的酶相对活性只有39.2%。在不同的温度下处理后的PG酶经过DHPM处理后的酶活性的降低程度比单独经过DHPM处理后的酶活性降低程度要大,这说明热与动态高压微射流协同处理的效果要好过单独热处理或是单独DHPM处理。PG酶的温控曲线明确表现出了PG酶的变性温度在60-65℃之间。从本实验可以看出,PG酶对温度还是敏感的,尤其是高温。 一些金属离子对PG酶起激活作用,一些起抑制作用,还有一些对酶活性没有明显影响。在本实验中,Ca2+、Ba2+、Zn2+、Mg2+对PG酶的酶活力有抑制作用,Mn2+对PG酶有激活作用。Na+对酶活力没有表现出明显的影响,不过他们的机理不尽相同。而DHPM处理对这一结果没有产生较大的影响。除了Mn2+Mn2+对经过动态高压微射流处理的PG酶没有激活作用。Ca2+、Ba2+、Na+、Zn2+ Mn2+、Mg2+均没有对PG酶的温控曲线产生较大的影响。 本实验还研究了乙醇(20%)对PG酶活性与构象的影响。PG酶在20%的乙醇溶液中活性降低了,只有未加乙醇的PG酶活性的75%。随着时间的增加,酶的活性随之降低,24 h后,酶的活性降低幅度增大,而20%的乙醇对PG酶的CD谱并未造成太大影响。因此,我们得出结论:乙醇对酶的二级结构可能未造成影响,它是通过影响酶的三级结构来影响酶的活力。乙醇对PG酶的温控曲线未造成影响,其变性温度依然处在60-65℃。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 刘洪霖,曹益林,陈念贻;铝酸钠溶液的紫外吸收峰[J];物理化学学报;1992年04期
2 王桂萍,王恩波,张云峰,林静雯;中心离子对Keggin型杂多化合物紫外光谱影响的研究[J];沈阳工业学院学报;1995年01期
3 严晓华,颜朝国,孙晶,韩莹;1,5-二芳基-2,4-戊二烯-1-酮的催化合成和紫外光谱的取代基效应[J];南京广播电视大学学报;1999年04期
4 韦玉娜,李丹妮,练鸿振;合成熊果苷的色谱指纹图谱分析[J];化工时刊;2005年07期
5 王彦卿;张红梅;张根成;;硅钨杂多酸与牛血红蛋白相互作用的研究[J];无机化学学报;2006年05期
6 李桂芝;刘永明;周晓云;王景阳;;铕、铽依诺沙星配合物的合成和光谱特性[J];稀土;2006年04期
7 康健;王敏;杜连祥;;发酵液中纳他霉素的提取及鉴定[J];药物生物技术;2006年04期
8 刘琼;张逸伟;陈海权;;一步法合成紫外线吸收剂N,N’-二芳基甲脒[J];广东化工;2007年01期
9 梁彦秋;邓斌;刘婷婷;孙鹏;臧树良;;杂多酸盐K_7[PTi_2W_(10)O_(40)]·6H_2O与牛血清白蛋白相互作用的研究[J];无机化学学报;2007年04期
10 徐磊;王长海;;光谱法研究甲醇和盐酸对短梗霉黑色素的分离效果[J];氨基酸和生物资源;2007年02期
11 黄汉昌;姜招峰;朱宏吉;;紫外圆二色光谱预测蛋白质结构的研究方法[J];化学通报;2007年07期
12 高谦明;杨孝辉;郭君;;不同条件下苏木素与水解胶原蛋白作用研究[J];西部皮革;2007年08期
13 高谦明;杨孝辉;郭君;;不同条件下苏木素与水解胶原蛋白作用研究[J];上海化工;2007年10期
14 聂湘平;王翔;陈菊芳;鹿金雁;李潇;杨永涛;;三氯异氰尿酸与盐酸环丙沙星对蛋白核小球藻的毒性效应[J];环境科学学报;2007年10期
15 李小飞;谢丽琼;田聪;李冠;;喜碱鸢尾根醇提取物抗氧化活性的研究[J];食品工业科技;2007年11期
16 梁彦秋;臧树良;邓斌;刘婷婷;孙鹏;;杂多酸盐K_7[PTi_2W_(10)O_(40)]·6H_2O与人血清白蛋白(HSA)的作用研究[J];分析试验室;2007年12期
17 杨维春;剧川川;凡素华;孙豪岭;王科志;;奥扎格雷的晶体结构和酸碱性质[J];物理化学学报;2008年01期
18 蒋伟;唐霁楠;孙岳明;徐文连;王华林;;具有分子内电荷转移特性的新型萘酰亚胺衍生物合成及发光性能(英文)[J];Journal of Southeast University(English Edition);2008年02期
19 易德莲;严敏;秦晓蓉;官章伟;王丽丽;夏志林;伍林;;没食子酸丙酯-铁配合物结构的光谱分析[J];光谱实验室;2008年05期
20 杨盛;侯红萍;;高效降解纤维素混合菌的筛选及其产酶条件的研究[J];中国酿造;2008年21期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李彦;杨鲁勤;李维红;吴瑾光;徐端夫;;药物牙线的药物释放研究[A];第二届中国功能材料及其应用学术会议论文集[C];1995年
2 冯金垣;崔迎超;杨启洪;龚文;;氰化物紫外光谱在线检测[A];第八届全国气湿敏传感器技术学术交流会论文集[C];2004年
3 刘斌;杨斌盛;;新型铬配合物的合成及其发光性能研究[A];第八届全国发光分析暨动力学分析学术研讨会论文集[C];2005年
4 杨东爱;凌征柱;蓝祖栽;;栽培山豆根与野生山豆根药材质量比较[A];第八届全国中药和天然药物学术研讨会与第五届全国药用植物和植物药学学术研讨会论文集[C];2005年
5 杨东爱;覃文流;凌征柱;蓝祖栽;;栽培山豆根与野生山豆根药材质量比较[A];2005全国首届壮医药学术会议暨全国民族医药经验交流会论文汇编[C];2005年
6 姜琳;翟延君;曹玉平;;柘木与穿破石的紫外光谱鉴别[A];2007年中华中医药学会第八届中药鉴定学术研讨会、2007年中国中西医结合学会中药专业委员会全国中药学术研讨会论文集[C];2007年
7 郑晓艳;杜婧;李慧卿;杨斌盛;;ApoCopC与氯化血红素的超分子组装性质研究[A];第五届全国化学生物学学术会议论文摘要集[C];2007年
8 余宇燕;张繁;;诺氟沙星与牛血清蛋白偶联物制备的研究[A];中国化学会第十四届有机分析及生物分析学术研讨会会议论文摘要集[C];2007年
9 颜梅;王晓东;李燕;徐媛媛;陈欣;;含炔基有机硅聚合物的光谱表征[A];第十五届全国分子光谱学术报告会论文集[C];2008年
10 谢孟峡;徐晓芸;刘媛;秦川;;黄酮醇与人血清白蛋白相互作用的光谱表征[A];第十四届全国分子光谱学术会议论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 解华东;液质发酵食品紫外光谱特性研究及鉴真技术体系建立[D];西北农林科技大学;2010年
2 王少先;施肥对稻田湿地土壤碳氮磷库及其相关酶活变化的影响研究[D];浙江大学;2011年
3 丛方地;脂肪酶催化拆分手性中间体及手性药物的合成研究[D];吉林大学;2006年
4 刘永霞;硅对金丝小枣盐胁迫的缓解效应及其机理[D];南京林业大学;2007年
5 闫素辉;小麦胚乳淀粉合成、粒度分布特征及对花后高温的响应[D];山东农业大学;2009年
6 周巧红;复合垂直流构建湿地微生物类群多样性及其活性研究[D];中国科学院研究生院(水生生物研究所);2005年
7 李天;温光对水稻籽粒碳水化合物代谢及品质的影响[D];四川农业大学;2005年
8 郭艳萍;乙烯对MA贮藏桃果实品质及相关生理机制的影响[D];西北农林科技大学;2008年
9 种培芳;荒漠植物红砂、白刺和沙拐枣抗旱指标及抗旱性综合评价研究[D];甘肃农业大学;2010年
10 赵焱;生物固锰除锰工艺中锰氧化菌群结构功能及锰代谢机制分析[D];哈尔滨工业大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 黄波;动态高压微射流技术对聚半乳糖醛酸酶活性与构象的影响[D];南昌大学;2011年
2 王勇;端粒酶活性在肺癌患者外周血单个核细胞中的表达及临床意义[D];安徽医科大学;2004年
3 潘月敏;棉花红腐病菌生理生化及有效复配剂筛选研究[D];安徽农业大学;2005年
4 蔡琼;一二代马尾松人工林土壤微生物数量及生物活性的对比研究[D];贵州大学;2006年
5 李亮;乌兰布和沙漠东北部沙区农田和林地土壤微生物及酶活性研究[D];西北农林科技大学;2010年
6 王伟;施肥对梁山慈竹林土壤有机碳和酶活性的影响[D];四川农业大学;2012年
7 张友杰;连作烟田土壤生物特性变化[D];河南农业大学;2010年
8 靳露;光纤传感技术结合紫外光谱相似度在药物快检中的应用研究[D];新疆医科大学;2011年
9 赵朝辉;湘西南石漠化治理模式对土壤微生物量和酶活性的影响[D];中南林业科技大学;2012年
10 王坤;基于紫外光谱和还原力的复原乳检测[D];浙江大学;2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;葡萄糖氧化酶[N];中国畜牧兽医报;2008年
2 省饲料协会 李非;使用酶制剂三要点[N];河北科技报;2007年
3 白毅;人参皂苷影响P450酶活性 双氢青蒿素有抗癌作用[N];中国医药报;2008年
4 上海交通大学 艾晓杰 金凌艳;植酸酶在饲料中应用的若干问题[N];中国畜牧兽医报;2005年
5 赵洁月;这些药别和西柚汁同服[N];医药养生保健报;2006年
6 季壮壮;喝酒醉不醉,酶“说了算”[N];中国中医药报;2008年
7 上海交通大学 艾晓杰 谢爱纯 金凌艳;如何充分扬植酸酶之长避之短[N];中国畜牧兽医报;2005年
8 范宝柱;秋季牧草加工与调制技术[N];中国畜牧兽医报;2006年
9 本报记者 徐志波;钛土肥:菜农增收路上好帮手[N];河北科技报;2006年
10 李兆勇;饲用酶制剂的研究现状及展望[N];中国畜牧兽医报;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978