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《南昌大学》 2011年
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反式脂肪酸诱导内皮细胞损伤和凋亡作用机制的研究

邱斌  
【摘要】:反式脂肪酸(trans fatty acid, TFA)是加工油脂类或含油脂类的加工食品中常见的一种组成成分,有很多研究都报道了TFA与心血管疾病存在密切关系,但TFA对心血管的作用机制仍不清楚。内皮细胞损伤是动脉粥样硬化(AS)及其他许多心血管疾病的始动环节,内皮细胞损伤在AS的发生、发展过程中占有重要地位。另外,内皮细胞凋亡过度是内皮细胞损伤初始环节,在动脉粥样硬化的早期扮演了重要角色。 目前在国内外针对TFA对动脉粥样硬化和心血L管疾病的研究主要集中在内皮细胞损伤和内皮细胞凋亡两个方面,并且国外大部分研究主要以反式脂肪酸的混合物为主体对冠心病及动脉血管功能作用进行研究,很少分别研究不同饱和度trans-18:1, trans-18:2对心血管疾病和动脉血管功能的影响。鉴于我国居民膳食中TFA含量呈逐年增高的趋势,而我国对TFA与人体健康关系的研究甚少,本课题针对不同饱和度trans-18:1, trans-18:2研究其与动脉粥样硬化和心血管疾病的关系,通过内皮细胞损伤和凋亡两个途径来研究TFA对内皮细胞的作用机制,为研究TFA对血管壁细胞的影响及其与动脉粥样硬化的关系提供理论依据,为我国心血管疾病的预防提供科学数据,具有重要的理论和社会价值。 本实验采用MTT法检测TFA对内皮细胞存活率的影响,初步确定TFA对内皮细胞损伤;通过检测NO、NOS、MDA、SOD等相关损伤指标的变化,观察两种不同饱和度的TFA对内皮细胞造成损伤的变化;通过Western-blot和RT-PCR检测VCAM-1、ICAM-1、eNOS、iNOS等相关蛋白和mRNA表达的变化,定量检测TFA对内皮细胞的损伤作用;采用流式细胞仪检测TFA诱导内皮细胞凋亡的比例,用激光共聚焦显微镜结合荧光染色,观察TFA诱导内皮细胞凋亡的形态学变化,最后通过检测参与死亡受体通路和线粒体通路的的酶Caspase-3、-8、-9等,综合探讨TFA诱导内皮细胞凋亡的机制。具体结果如下: 1.9t C18:1和9t,12t C18:2两种不同饱和度的TFA均能抑制HUVEC的存活率,并使细胞的形态发生明显改变,呈现典型的损伤状态; 2.TFA能使细胞损伤的典型指标LDH渗出量增加,降低细胞的SOD活力,使细胞的清除自由基的能力减弱,进而使细胞的脂质代谢产物MDA的含量增加。形态和生化指标表明TFA造成内皮细胞损伤; 3. LNAME与TFA联合处理内皮细胞比对照组和TFA单独处理组细胞存活率都显著下降,而SNP与TFA联合处理内皮细胞比对照组和TFA单独处理组细胞存活率显著升高;TFA可诱导NO分泌水平、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性和mRNA表达显著下降,而对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性和mRNA表达无显著改变。表明TFA通过抑制eNOS活性减少NO的分泌,可能是TFA诱导内皮细胞损伤的作用机制之一; 4.通过RT-PCR技术,本研究发现9t C18:1和9t,12t C18:2均能显著上调黏附因子(VCAM-1、ICAM-1、E-selectin)的mRNA的表达,说明TFA能够通过黏附因子基因的表达诱导内皮细胞损伤; 5.通过流式细胞仪和激光共聚焦显微镜,我们观察到9t C18:1和9t,12tC18:2能够诱导内皮细胞凋亡。在凋亡过程中,Caspase-8、-9、-3、Bid的活性和mRNA表达都能够被激活和上调。Caspase-8抑制剂(z-IETD-fmk)和Caspase-9抑制剂(z-LEHD-fmk)都能够完全抑制Caspase-3的活性,并且Caspase-8抑制剂(z-IETD-fmk)同样能够抑制Caspase-9的活性。这说明TFA首先激活死亡受体通路的上游酶Caspase-8,然后通过Bid蛋白激活线粒体通路,激活Caspase-9并进而激活Caspase-3而诱导内皮细胞凋亡。本研究为研究9t C18:1诱导内皮细胞凋亡的机制提供了详实的科学数据,为研究TFA导致动脉粥样硬化的机理提供了一定的理论基础; 综合上述结果,表明TFA能够通过NOS-NO系统调控内皮细胞的损伤;并通过上调相关标志性的损伤黏附因子mRNA的表达,使内皮细胞损伤进一步加剧;TFA能够通过激活死亡受体通路和线粒体通路诱导内皮细胞凋亡。
【学位授予单位】:南昌大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:TS201.2;R543.5

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 时静华;潘桂兰;陈晓东;;酒精氧化应激和自由基损伤[J];包头医学院学报;2007年03期
2 李彬;王英;;高脂血症与血管内皮细胞功能实验检测指标研究进展[J];包头医学院学报;2007年06期
3 崔玉英;唐朝枢;耿彬;;束缚应激大鼠血小板及血管内膜的L-精氨酸/一氧化氮合酶/一氧化氮通路下调[J];北京大学学报(医学版);2006年03期
4 李小明,孙志贤;细胞凋亡中的关键蛋白酶—Caspase-3[J];国外医学(分子生物学分册);1999年01期
5 张健;张芹;;细胞粘附分子与心脑血管疾病研究进展[J];长江大学学报(自科版)医学卷;2008年03期
6 卢晓晔,钟雪云;Caspases与细胞凋亡(综述)[J];暨南大学学报(自然科学与医学版);2000年06期
7 吴忠均,先德凤,郭立新,殷跃辉,高大中,吕湛,高根伍;冠心病患者一氧化氮、氧化型低密度脂蛋白和细胞间粘附分子-1与冠状动脉狭窄间的关系[J];中国动脉硬化杂志;2000年04期
8 杨永宗;中国动脉粥样硬化病理生理学研究近况[J];中国动脉硬化杂志;2004年04期
9 汪波,张宝娓;动脉粥样硬化与循环中一氧化氮的关系[J];临床心血管病杂志;2001年10期
10 刘兴会;杨天和;;反式脂肪酸与心血管疾病的研究进展[J];临床心血管病杂志;2008年07期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 刘东敏;食物中反式脂肪酸异构体的分析及我国居民反式脂肪酸摄入量的调查[D];南昌大学;2008年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 温桃勇;刘小强;;紫色甘薯营养成分和药用价值研究进展[J];安徽农业科学;2009年05期
2 刘林;;食品中反式脂肪酸的形成机制和安全性研究[J];安徽农业科学;2011年16期
3 张琳;杨圣岽;吴海成;张凌;李欣欣;徐艳阳;;反式脂肪酸的危害及其检测方法的研究现状[J];安徽农业科学;2012年20期
4 董淑慧;高玉彤;潘彦珞;;瘦素与结直肠腺癌细胞凋亡的关系[J];安徽医药;2009年06期
5 钟继昌;戴敏;潘礼龙;;丹皮酚对ox-LDL诱导的大鼠血管内皮细胞黏附功能的抑制作用[J];安徽中医学院学报;2007年06期
6 李笑春;戴敏;陈鹏;;丹皮酚对高脂血清诱导的大鼠主动脉内皮细胞损伤的保护作用及其黏附功能的影响[J];安徽中医学院学报;2010年01期
7 王勇,刘兴炎,葛宝丰,殷莹,陈克明,苗国安;c-myc、PCNA、Fas在成骨性肿瘤中的表达[J];癌症;2000年03期
8 潘健,张胜权,陈兵;γ-干扰素在体外对血管内皮细胞凋亡的诱导作用[J];蚌埠医学院学报;2005年05期
9 张祥盛,张燕,吴淑华,李冰,田东;细胞凋亡水平及ER、p53、Bcl-2基因产物表达与乳腺癌生物学行为的相关性[J];滨州医学院学报;2000年05期
10 张瑞祥,赵晓明,金小平,齐洁敏,李玉红,张玉娟,胡建功;电镜下人胎盘滋养细胞的凋亡形态及其DNA缺口末端标记的对比研究[J];承德医学院学报;2000年04期
中国重要会议论文全文数据库 前4条
1 郝杰;彭芳辰;;丹红注射液抗炎作用研究进展[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
2 刘思含;;反式脂肪酸的安全性评价[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
3 温航远;杨新波;;中药治疗动脉粥样硬化研究进展[A];中国成人医药教育论坛(2009)[C];2009年
4 任香善;宋京郁;;粘附分子与动脉粥样硬化[A];第八次全国动脉硬化性疾病学术会议论文集[C];2005年
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1 张丹;Ghrelin对棕榈酸诱导的大鼠主动脉内皮细胞凋亡的影响及其机制的研究[D];中国医科大学;2010年
2 徐惠梅;心宁丸抗心肌缺血大鼠的实验研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
3 张春敏;Survivin, Caspase-3在皮肤鳞状细胞癌中的表达及雄黄的体外干预研究[D];山东中医药大学;2010年
4 巩丽;人参皂甙Rg1对绝经后妇女阿尔茨海默病细胞模型的神经保护作用及机理研究[D];山东大学;2010年
5 陈义勇;桦褐孔菌多糖纯化、结构及其抗肿瘤机制研究[D];江南大学;2010年
6 谢利红;~(60)COγ射线照射对豚鼠耳蜗损伤及乙酰半胱氨酸辐射防护的实验研究[D];广西医科大学;2011年
7 张宝石;~(18)F标记小分子肽(~(18)F-CP-18)早期评价肺癌化疗后细胞凋亡的基础研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
8 庞瑜;降脂消斑片对冠心病心绞痛痰热血瘀证的临床研究及对鹌鹑高脂血症和AS模型的实验研究[D];湖南中医药大学;2011年
9 张博;亚甲蓝光化学法对血液及血制品中淋巴细胞及病毒的灭活效果及其机理[D];华东师范大学;2011年
10 李卿;灯盏细辛血管保护作用及南方红豆杉等叶绿体基因组研究[D];北京协和医学院;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 姚长江;丝裂霉素C预防硬膜外瘢痕粘连的分子生物学机制研究[D];南京医科大学;2010年
2 杨静;内脏脂肪素对人血管内皮细胞MMP-1、TIMP-1及ICAM-1表达的影响[D];郑州大学;2010年
3 陈洋;血管回声跟踪技术评价颈总动脉血管弹性与冠状动脉病变相关性的研究[D];郑州大学;2010年
4 于黎娟;纳米金荧光探针用于生物大分子的研究与应用[D];山东师范大学;2010年
5 孟国权;精氨酸通过PPAR_γ/NF-κB途径发挥对仔猪肠道屏障功能损伤的调节作用[D];武汉工业学院;2010年
6 牛翠娇;食品中反式脂肪酸的检测及青少年人群暴露评估[D];河北农业大学;2011年
7 谷林萍;Livin和Caspase-3在上皮性卵巢癌中的表达及相关性研究[D];山西医科大学;2011年
8 王丛丛;牛磺鹅去氧胆酸对抗糖皮质激素不良反应的研究[D];山东农业大学;2011年
9 黄兰芬;新型荧光型NO光纤生物传感器的制备与性能研究[D];武汉理工大学;2011年
10 贾明月;大鼠酒精中毒后大脑皮质、海马、小脑的病理学改变,caspase-3、CaN的异常表达及离子的变化[D];吉林大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 ;高密度脂蛋白(HDL)制剂治疗兔实验性动脉粥样硬化疗效研究[J];中国输血杂志;2001年S1期
2 ;2002年前三季度我国水果市场行情分析[J];保鲜与加工;2003年01期
3 祖邨,周国鹏,姚兴海,唐朝枢;原发性高血压病人红细胞L-精氨酸/一氧化氮系统的改变[J];北京医科大学学报;2000年06期
4 丁国文;2001年我国蔬菜生产与市场分析[J];长江蔬菜;2002年04期
5 ;2002年中国稻米市场分析[J];中国稻米;2003年02期
6 王芳;我国籼米贸易及其竞争力分析[J];中国稻米;2004年06期
7 夏剑秋,翟昌;大豆及大豆制品的供给和需求趋势[J];大豆通报;1999年03期
8 王大新,吴宗贵,周斌,姜远英,殷明;壳多糖对兔主动脉平滑肌细胞和内皮细胞增殖的影响[J];第二军医大学学报;1999年12期
9 彭侃夫,孟建中,吴宗贵;苯那普利对家兔动脉粥样硬化形成和斑块破裂的作用[J];第二军医大学学报;2003年07期
10 杨鹏远,芮耀诚,焦亚斌;动脉粥样硬化大鼠实验模型的建立[J];第二军医大学学报;2003年07期
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1 王芳;我国籼米生产、消费和贸易的研究[D];中国农业科学院;2004年
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1 王向龙;;科学看待反式脂肪酸[J];消费指南;2010年12期
2 子荷;;警惕健康杀手“反式脂肪酸”[J];中国减灾;2010年23期
3 王瑞元;王兴国;金青哲;李子明;张根旺;刘大川;刘玉兰;周丽凤;;科学全面正确认识反式脂肪酸安全问题[J];食品科技;2011年01期
4 王瑞元;王兴国;金青哲;李子明;张根旺;刘大川;刘玉兰;周丽凤;;科学、全面、正确认识反式脂肪酸安全问题[J];中国粮油学报;2011年02期
5 王瑞元;王兴国;金青哲;李子明;张根旺;刘大川;刘玉兰;周丽凤;;科学、全面、正确认识反式脂肪酸安全问题[J];中国油脂;2011年01期
6 欣溪;美国营养标示将考虑反式脂肪酸的标示[J];中外食品;2000年06期
7 ;美国食品将标注反式脂肪酸含量[J];中外食品;2003年12期
8 ;“反式脂肪酸”问题引起焙烤行业极大关注——植物酥油引领健康趋势 受行业青睐度再掀高潮[J];食品科技;2006年11期
9 鲍捷;;吃对脂肪不抑郁[J];美食;2010年12期
10 ;选对中式点心 巧避反式脂肪酸[J];黑龙江粮食;2010年06期
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1 单海燕;白小涓;陈香美;;细胞外信号调节激酶1/2在血管内皮细胞凋亡中的表达变化及作用[A];第十三次全国心血管病学术会议论文集[C];2011年
2 刘静;马旗;;内吗啡肽对高脂条件下血管内皮细胞凋亡的影响极其机制的研究[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年
3 张万福;胡大海;吕根法;王耘川;朱雄翔;高峰;;胰岛素对烧伤血清诱导血管内皮细胞凋亡的影响及机制研究[A];中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年
4 陈娟;冯大明;;TL1A在高脂诱导人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年
5 戴明泓;;Caspase-13参与氧化低密度脂肪造成内皮细胞凋亡[A];第六届海峡两岸心血管科学研讨会论文摘要集[C];2007年
6 鞠爱霞;李伟;应长江;;N-乙酰半胱氨酸对糖尿病大鼠主动脉内皮细胞凋亡的影响及其机制研究[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年
7 林蓉;纪巧丽;林琴琴;王维蓉;杨丽娜;;芍药苷对缺氧损伤的血管内皮细胞凋亡的影响及其机制[A];第十届全国抗炎免疫药理学学术会议论文集[C];2010年
8 孟香红;蒋建平;陈洁;沈岳良;陈莹莹;;葛根素通过抑制calpain对抗高糖诱导的血管内皮细胞凋亡[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年
9 刘昕;孙皎;;纳米二氧化硅颗粒诱导内皮细胞凋亡的研究[A];生物材料与再生医学的现状与未来——2010年第十届上海地区医用生物材料研讨会论文摘要汇编[C];2010年
10 杨丽霞;杨栋;郭瑞威;沈珠甫;石燕昆;齐峰;王先梅;;血管紧张素Ⅱ诱导内皮细胞凋亡中神经酰胺和p53的相互关系[A];中华医学会心血管病学分会第十次全国心血管病学术会议汇编[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 孟庆普;反式脂肪酸风险评估正在进行[N];健康报;2010年
2 中国疾控中心营养与食品安全所副所长 李宁 整理 杨辉;反式脂肪酸 尽量少吃[N];健康报;2010年
3 记者 金振娅;摄入反式脂肪酸是“限”非“禁”[N];光明日报;2010年
4 本报记者 陈永杰;反式脂肪酸该不该禁?[N];北京科技报;2010年
5 实习生 王赓 本报记者 王洁;反式脂肪酸没那么可怕[N];中国妇女报;2010年
6 本报记者 姬薇 实习生 尹晓鹏;反式脂肪酸的“罪与罚”[N];工人日报;2010年
7 ;反式脂肪酸,你的角色是什么[N];杭州日报;2010年
8 健康时报记者 杜文明 驻美国特约记者 冰清;同是好丽友 不同待客道[N];健康时报;2010年
9 实习生 李崇寒;反式脂肪酸到底还能不能吃?[N];科技日报;2010年
10 本报驻京记者 王乐;远离反式脂肪酸,可能吗?[N];文汇报;2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 邱斌;反式脂肪酸诱导内皮细胞损伤和凋亡作用机制的研究[D];南昌大学;2011年
2 孟东;C肽对高糖、高胰岛素致内皮细胞凋亡的影响及作用机制的研究[D];天津医科大学;2002年
3 廖洪跃;Fas配体诱导婴幼儿血管瘤内皮细胞凋亡的实验研究[D];第二军医大学;2008年
4 邹琳;模拟失重所致人肺微血管内皮细胞凋亡的机制研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2010年
5 彭红;mtTFA基因甲基化在慢性阻塞性肺疾病肺血管内皮细胞凋亡中的作用[D];中南大学;2010年
6 宋长城;蜂毒素抗肝细胞癌血管生成的实验研究[D];第二军医大学;2007年
7 黄丹丹;神经酰胺在高浓度D-葡萄糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用[D];中南大学;2007年
8 林勇;细胞粘附、影响因素及粘附分子基因表达的调控[D];中国协和医科大学;1998年
9 林琳;TNFα、AII与mmLDL致血管内皮细胞膜钙激活钾通道异常[D];中国协和医科大学;2000年
10 刘颖琳;异丹叶大黄素等四种化合物对氧化LDL(Ox-LDL)引起血管损伤的保护作用及阻断氧化应激相关信号传导机制研究[D];中国协和医科大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 娄小倩;NF-κB信号通路对H_2O_2致内皮细胞凋亡的影响及辛伐他汀的作用[D];吉林大学;2010年
2 申华;卵泡抑素相关蛋白抑制血管内皮细胞凋亡的机制研究[D];延边大学;2010年
3 皇鑫;NF-κB在COPD肺血管内皮细胞中的表达及其在香烟提取物诱导内皮细胞凋亡中的作用[D];中南大学;2010年
4 黎璞;红景天苷对同型半胱氨酸诱导的内皮细胞凋亡的抑制作用研究[D];陕西中医学院;2011年
5 王令谆;益气化痰法治疗冠心病心绞痛气虚痰浊证的研究[D];南京中医药大学;2004年
6 沈珠甫;Ceramide介导AngⅡ诱导的血管内皮细胞凋亡研究[D];第三军医大学;2008年
7 李侃;促红细胞生成素对肿瘤坏死因子-α诱导的血管内皮细胞凋亡的影响[D];兰州大学;2012年
8 曹洪;丹参注射液预防深静脉血栓形成的实验研究[D];湖北中医学院;2008年
9 赖永全;DDAH2启动子甲基化介导同型半胱氨酸促内皮细胞凋亡的作用及EGCG对其作用的影响[D];中南大学;2010年
10 李晶;高血糖、高胰岛素对内皮细胞凋亡及Mn-SOD表达影响的研究[D];天津医科大学;2006年
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