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《南昌大学》 2007年
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三种中草药抑制甲3型流感病毒诱导细胞凋亡的研究

刘晓静  
【摘要】: 目的:采用双黄连的组成药:金银花、黄芩和连翘的提取液为实验药物,并以利巴韦林为阳性对照药物,进行体外抗病毒实验。测试上述药物对甲3型(H3N2亚型)流感病毒诱导狗肾传代细胞(Madin-Darby canine kidney,MDCK)凋亡的影响。 方法:各种中草药采用传统的水煮浸法分别提取使其浓缩成0.5g/ml药液为原液。测定药物对MDCK细胞的毒性作用,并确定药物的毒性限量。以其下一倍比稀释度为试验浓度进行抗病毒试验。以细胞病变(cytopathic effect,CPE)、姬姆萨染色在光镜下观察细胞形态学变化、Annexin V和PI双染用流式细胞仪测定(flow cytometry,FCM)细胞凋亡率,评价药物对甲3型流感病毒诱导MDCK细胞凋亡的影响。 结果:1、各药物对MDCK细胞的无毒界限分别为:金银花3.90mg/ml、黄芩15.62mg/ml、连翘15.62mg/ml。 2.在光镜下观察了甲3型流感病毒对照组的MDCK细胞,可见被感染的MDCK细胞出现了细胞凋亡特有的形态学变化。 3.Annexin V和PI双染经流式细胞仪测定显示三种药物试验组的细胞凋亡率(金银花28.13%±3.30%、黄芩13.47%±3.04%、连翘19.17%±6.55%)均显著低于病毒对照组54.10%±4.58%(P0.001)。 4.黄芩试验组及连翘试验组细胞凋亡率与药物对照组及细胞对照组无差异(P0.05)。金银花试验组细胞凋亡率与药物对照组及细胞对照组有差异。(P0.05)。 5.黄芩对甲3型流感病毒诱导细胞凋亡的抑制率:(inhibtion ratio,IR)为79.87%,连翘IR为68.67%,利巴韦林IR为77.94%。黄芩试验组、连翘试验组与利巴韦林对照组比较IR无差异(P0.05)。 结论:1.黄芩和连翘能抑制甲3型流感病毒诱导MDCK细胞凋亡. 2.黄芩、连翘对甲3型流感病毒诱导MDCK细胞凋亡的抑制作用与利巴韦比较无显著性差异。 3.本研究尚不能说明金银花能有效抑制甲3型流感病毒诱导MDCK细胞凋亡。
【学位授予单位】:南昌大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R285.5

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