收藏本站
《南昌大学》 2007年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

骨髓间充质干细胞调控神经干细胞增殖分化的机制探讨

刘诸敏  
【摘要】: 目的和意义: 脑缺血是严重威胁人们生命健康的常见多发病,干细胞移植为脑缺血的临床治疗带来了新的曙光。研究表明:脑缺血后移植的骨髓间充质干细胞(MSCs)可通过促进缺血区新生血管的生成和内源性神经干细胞(NSCs)的增殖达到改善神经功能缺损的目的,但MSCs促进内源性NSCs的增殖分化机制尚不清楚。本研究通过观察MSCs对NSCs增殖分化起重要作用的notch信号通路的影响及MSCs中内皮细胞(ECs)可能起的作用,以进一步探讨MSCs调控NSCs增殖分化的机制,为MSCs移植治疗中枢神经系统(CNS)疾病奠定理论基础。 研究内容和方法: 1.神经球悬浮法培养小鼠NSCs,免疫细胞染色法检测神经巢蛋白(nestin)的表达以鉴定NSCs。 2.贴壁筛选法分离小鼠MSCs,常规方法进行传代培养,免疫细胞染色法检测CD29、CD34进行MSCs鉴定。 3.采用transwell板将MSCs与NSCs进行共培养,同时设ECs功能阻断的MSCs与NSCs共培养组、微血管内皮细胞(HMVECs)及成纤维细胞(3T3)与NSCs共培养进行对照。 4.采用RT-PCR方法观察各培养组不同时间段notch信号通路相关基因notch1、hes1、mash1以及NSCs增殖分化相关基因:nestin基因和神经胶质酸性蛋白(GFAP)基因的表达变化。 结果: 1.成球悬浮法培养的小鼠NSCs增殖旺盛,nestin呈阳性表达。 2.MSCs增殖旺盛,细胞化学染色结果显示CD29(+),CD34(-),符合MSCs特征。 3.各共培养组notch信号通路相关基因及NSCs增殖分化相关基因的变化: (1).MSCs及HMVECs均可促进NSCs的notch1及hes1基因表达,且6h达高峰;而ECs功能阻断后的MSCs与HMVECs对NSCs的notch1及hes1基因表达影响较小,6h基因表达量显著低于MSCs组及HMVECs组,说明ECs在激活notch1及hes1基因表达过程中起了主要作用。 (2).MSCs及HMVECs对NSCs的mash1基因表达影响是24h内呈下调趋势,而ECs功能阻断剂的MSCs和HMVECs以及3T3组的变化则呈上调趋势。说明ECs能抑制与notch通路激活呈负调节关系的mash1基因表达。 (3).MSCs及HMVECs对NSCs的nestin基因及GFAP基因的表达影响较为一致,nestin基因及GFAP基因表达无明显变化;而ECs功能阻断后的MSCs和HMVECs使NSCs的nestin基因表达水平迅速下降,同时GFAP基因表达水平迅速上升。说明ECs对维持NSCs未分化增殖状态可能起到重要作用。 结论: 1.MSCs可促进NSCs保持未分化增殖状态,且其中的ECs可能起了主要作用。 2.MSCs可通过激活NSCs的notch信号通路,上调notch1、hes1基因同时下调其负调节基因mash1基因来保持NSCs未分化增殖状态,其中的ECs可能起了主要作用。
【学位授予单位】:南昌大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R741

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张永涛;金丹;;组织工程骨软骨复合体构建的研究进展[J];中国修复重建外科杂志;2011年09期
2 周谊芬;车彦军;吴圆圆;刘灿均;董玉林;张志军;倪衡建;;骨髓基质细胞脑室内移植对脑外伤后神经功能障碍的治疗作用[J];神经解剖学杂志;2011年03期
3 ;[J];;年期
4 ;[J];;年期
5 ;[J];;年期
6 ;[J];;年期
7 ;[J];;年期
8 ;[J];;年期
9 ;[J];;年期
10 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 赵风云;;大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为表皮细胞及皮损修复的实验研究[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
2 潘锋;柏树令;;骨组织工程MSCs及其种植载体的研究进展[A];中国解剖学会第八届组织学与胚胎学专业青年研讨会论文集[C];2004年
3 李冬梅;金连弘;张宇;李呼伦;刘慧雯;张宝东;;骨髓间充质干细胞定向诱导成类软骨细胞的实验研究[A];中国解剖学会第八届组织学与胚胎学专业青年研讨会论文集[C];2004年
4 丁晓飞;赵劲民;陈维平;杨志;苏伟;;大鼠骨髓间充质干细胞分离、体外培养和向软骨细胞表型定向分化的实验研究[A];2005'中国修复重建外科论坛论文汇编[C];2005年
5 杨辉;蔡光先;刘柏炎;谢勇;蔡莹;;地黄多糖对MSCs向神经细胞分化过程中脑区相关基因表达的影响[A];贵州省医学会第八届神经病学年会论文集[C];2010年
6 郭军;林国生;贾光宏;杨波;汪蕾;;干细胞因子对骨髓间充质干细胞的促增殖、分化作用[A];中华医学会心血管病分会第八次全国心血管病学术会议汇编[C];2004年
7 侯艳芳;李杨;;多服务器群集技术及在济钢信息化中的应用[A];冶金自动化信息网年会论文集[C];2004年
8 黄晖;陈安民;李锋;郭风劲;陈超;张伟凯;;SP诱导MSCs迁移在骨折愈合中的作用及其机制初探[A];中华医学会疼痛学分会第八届年会暨CASP成立二十周年论文集[C];2009年
9 林玲;郑志竑;张琦;胡建石;林建银;;神经营养素对培养的新生大鼠神经干细胞分化的影响[A];第十一届全国神经药理学术会议论文摘要集[C];2004年
10 张冬霞;许小媛;季正剑;邢华;;利用GFP转基因小鼠研究外源NSCs在受体脑内的存活与分化[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 魏妍平;MSCs研究列入豫重大攻关计划[N];中国医药报;2004年
2 于建港 邢燕霞;R4网络接口和电路域容灾技术[N];人民邮电;2005年
3 张中桥;异体MSCs移植有利于梗死心肌功能修复[N];中国医药报;2004年
4 ;领先技术和市场需求的完美结合[N];人民邮电;2004年
5 中国电信集团广州研发中心 曹磊 胡乐明;演进中的WCDMA R4与NGN[N];人民邮电;2004年
6 ;全方位提供“贴心”服务[N];中国医药报;2004年
7 吴广颖 于化龙 郑涛;R4核心网规划应处理好几个关系[N];人民邮电;2005年
8 ;带宽不够时怎样做远程实时备份?[N];计算机世界;2003年
9 ;经济高效的诺基亚核心网系统[N];人民邮电;2004年
10 ;领先技术和市场需求的完美结合[N];人民邮电;2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张铭杰;成人MSCs体外定向成骨分化及激素性股骨头坏死MSCs活性研究[D];广州中医药大学;2011年
2 吴慧颖;转染HO-1基因的骨髓间充质干细胞(MSCs)移植治疗慢性心衰的实验研究[D];吉林大学;2012年
3 代飞;基因修饰人骨髓间充质干细胞作为骨组织工程异基因种子细胞的实验研究[D];第三军医大学;2004年
4 李家一;自体骨髓间充质细胞心肌内移植治疗急性心肌梗死的实验研究[D];第四军医大学;2004年
5 刘维新;治疗心肌梗死候选细胞心肌分化潜能与候选基因逆转录病毒载体的构建与鉴定[D];武汉大学;2004年
6 许世刚;左归丸体外诱导MSCs分化及移植治疗鼠痉挛型脑瘫的研究[D];北京中医药大学;2010年
7 李海芳;β-肾上腺素受体在小鼠MSCs成骨、成脂分化中的作用[D];清华大学;2010年
8 孙敬和;心肌样微环境下黄芪甲苷联合5-氮胞苷诱导MSCs分化为心肌样细胞[D];广州中医药大学;2012年
9 姬西团;人与小鼠神经干细胞生物学特性的比较研究[D];第四军医大学;2004年
10 杨辉;地黄多糖对MSCs向神经细胞分化过程中脑区相关基因和BMP4的影响[D];湖南中医药大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘诸敏;骨髓间充质干细胞调控神经干细胞增殖分化的机制探讨[D];南昌大学;2007年
2 张东营;氯吡格雷对MSCs治疗大鼠心肌梗死影响实验研究[D];苏州大学;2012年
3 李安军;红花黄素腹腔注射联合MSCs移植对大鼠损伤脊髓修复作用研究[D];湖北中医药大学;2010年
4 卜志勇;红花黄素腹腔注射联合MSCs移植对脊髓损伤大鼠运动功能的影响及机制研究[D];湖北中医药大学;2011年
5 朱辉;可注射型去端肽胶原包埋MSCs对兔椎间盘退变的早期修复作用[D];苏州大学;2012年
6 周娜;MSCs心肌样细胞分化过程中GCN5募集促分化相关蛋白的筛选[D];重庆医科大学;2010年
7 刘志江;心肌梗死后MSCs移植对球囊损伤血管再狭窄及心脏功能的影响[D];遵义医学院;2010年
8 廖礼强;心梗大鼠循环血单个核细胞分泌TNF-α对MSCs迁移及心肌样分化的影响[D];重庆医科大学;2010年
9 姚月良;MSCs抑制辐射诱生胸腺瘤作用及其与p53甲基化的相关性分析[D];吉林大学;2012年
10 陈安平;直接心外膜下MSCs~(Ad.HGF)联合移植治疗慢性缺血性心脏病的实验研究[D];福建医科大学;2012年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026