收藏本站
《天津医科大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

吲哚胺2,3双加氧酶在胃癌免疫中作用的初步研究

张汝鹏  
【摘要】:目的: 研究胃癌组织中吲哚胺2,3-双加氧酶(Indoleamine 2,3-dioxygenase, IDO)的表达情况和CDllc+树突状细胞(CD11c+DC)的分布情况,探讨胃癌组织中IDO的表达、CD11c+DC的分布与患者临床病理特征的关系及其对预后的指导意义。构建IDO真核表达载体pIRES2-EGFP-IDO,转染树突状细胞(IDO-DC),考察体外IDO-DC对异体反应性T细胞增殖的影响。 方法: 1选取2001年1月至2007年6月天津医科大学附属肿瘤医院65例手术治疗胃癌患者的组织蜡块,免疫组织化学法检测IDO的表达情况、CD11c+DC的分布情况,观察IDO的表达、CD11c+DC的分布与临床病理特征的关系及其对预后的指导意义。 2钓取IDO基因编码序列(CDS)区域,克隆至pMD 19-T simple载体中,测序验证后连入真核表达载体pIRES-EGFP,构建pIRES-EGFP-IDO重组质粒。将IDO真核表达载体pIRES-EGFP-IDO电转染至胃癌患者外周血单核细胞来源DC,构建表达IDO的DC,RT-PCR检测IDO基因的mRNA的表达,Western blot检测IDO基因的表达,氨基酸分析仪测定IDO蛋白的酶活性。 3分选并纯化异体胃癌患者外周血CD3+T细胞,将其与IDO-DC共孵育,以转染空质粒组和未进行转染的DC为对照。检测体外IDO对异体反应性T细胞增殖的影响。 结果: 1免疫组化结果显示:胃癌组织和正常胃黏膜组织中IDO阳性表达率分别为47.7%(31/65)和22.7%(5/22),统计学分析显示,胃癌组织中IDO阳性表达率显著高于正常胃黏膜组织(X2=4.223,P=0.040)。胃癌组织中IDO的表达与胃癌患者的TNM分期、肿瘤直径、病理类型及淋巴结转移具有显著正相关。 2免疫组化结果显示:胃癌组织中CD11c+DC浸润的数量为23.28±10.34,正常胃黏膜组织中CD11c+DC浸润的数量为28.75±5.78,统计学分析显示,胃癌组织中CD11c+DC的数量显著低于正常胃黏膜组织(t=2.568,P=0.043)。胃癌组织中CD11c+DC的数量与胃癌患者的TNM分期、病理类型及淋巴结转移具有显著负相关。 3预后分析显示,淋巴结转移、TNM分期、肿瘤直径、T分期、CD11c+DC数量和IDO的表达情况是胃癌患者预后的影响因素。进一步多因素分析显示,TNM分期和IDO的表达情况是胃癌患者预后的独立影响因素。 4检测未转染DC、转染空质粒组和IDO-DC组的IDO mRNA的表达,IDO/β-actin灰度值之比分别为(0.1183+0.0602)、(0.1190±0.0547)和(0.5627±0.1414), IDO-DC组灰度值明显高于另外两组(F=29.638, P0.001). Western blot检测IDO-DC中IDO蛋白的表达情况,可检测到相对分子量约为42KD的蛋白质,提示外源性IDO基因在IDO-DC成功表达。在IDO-DC组和未转染DC组的细胞培养上清液中色氨酸(Trp)浓度分别为(3.23±0.53)mg/L和(6.03+0.51)mg/L,差异有统计学意义(t=13.32,P0.001);犬尿氨酸(Kyn)浓度分别为(4.84±0.11)mg/L和(1.83±0.10)mg/L,差异有统计学意义(t=42.916,P0.001),提示IDO-DC表达的IDO具有完整的酶活性。 5未转染组、转染空质粒组及IDO-DC组对异体反应性T细胞增殖影响的差异具统计学意义(F=4.595,P=0.042)。与转染空质粒、DC组比铰IDO-DC对异体反应性T细胞具有明显抑制活性(P0.05) 结论: 1胃癌组织中IDO的表达显著高于正常胃黏膜组织.胃癌组织中CD11c+DC的数量显著低于正常胃黏膜组织。胃癌组织中IDO的表达水平与TNM分期、病理类型、肿瘤直径、淋巴结转移具有相关性;CD11c+DC的分布与TNM分期、病理类型、淋巴结转移具有相关性,提示胃癌组织中IDO、CD11c+DC可能参与胃癌的进展、转移过程。 2胃癌微环境中的IDO的表达水平是独立预后影响因素,可作为判断患者预后的指标。 3成功构建了IDO重组真核表达载体pIRES-EGFP-IDO,并成功转染了DC。IDO的活性表达可导致微环境中色氨酸耗竭,并产生其分解代谢产物,如犬尿氨酸等衍生物。 4体外实验证实DC上IDO可以抑制异体反应性T淋巴细胞的增殖过程,这提示IDO可能通过抑制抗原特异性T淋巴细胞的增殖,从而影响了机体局部免疫反应。
【学位授予单位】:天津医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R735.2

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前6条
1 温文胜;张哲;谢莹;徐志文;黄光武;;鼻咽癌患者外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞的检测[J];广西医科大学学报;2007年03期
2 张文颖;;IDO、树突状细胞与免疫耐受[J];国际免疫学杂志;2006年06期
3 刘悦梅;张玲;张维东;魏丽;贾青;;胃癌组织吲哚胺2,3-双加氧酶表达及其诱导肿瘤免疫逃逸的研究[J];中华肿瘤防治杂志;2008年15期
4 张育超;王惠英;罗招凡;;胃癌患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的变化[J];实用医学杂志;2007年17期
5 戴向晨;刘彤;瞿紫微;朱理玮;王鹏志;;诱导小鼠树突细胞表达吲哚胺2,3双加氧酶的研究[J];中华实验外科杂志;2006年12期
6 魏丽娟;于津浦;丛义滋;任秀宝;刘俊田;;吲哚胺2,3-双加氧酶参与乳腺癌患者免疫耐受的研究[J];中国免疫学杂志;2009年11期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王慧;潘科;夏建川;;IDO和CD4~+ CD25~+调节性T细胞在肿瘤免疫逃逸中相互作用的研究进展[J];癌症;2009年02期
2 许浪;朱剑;刘丹;周乾毅;李玉红;程桂荣;;CD4~+CD25~+调节性T细胞在肺癌患者外周血中的表达[J];湘南学院学报(医学版);2008年03期
3 王若峥;谭遥;黄丽;王多明;吾甫尔;;ELISPOT法检测鼻咽癌放疗前后细胞免疫反应的变化[J];广西医科大学学报;2009年03期
4 何云;;吲哚胺2,3二加氧酶与自身免疫性疾病[J];国际免疫学杂志;2007年06期
5 于荣;侯建青;;紫杉醇联合铂类化疗对晚期卵巢上皮细胞癌患者CD4~+CD25~+FOXP3~+细胞的影响及意义[J];滨州医学院学报;2012年04期
6 郭芝刚;曾军;张锦宏;何玉文;;丁酸钠通过下调细胞干扰素调节因子-1抑制鼻咽癌细胞CNE2吲哚胺-吡咯2,3-双加氧酶的表达[J];重庆医学;2013年08期
7 王谨;林国和;王俊;徐立;元云飞;李升平;;吲哚胺2,3-双加氧酶在肝癌引流区域淋巴结中的表达及临床意义[J];解放军医学杂志;2009年07期
8 何金龙;巫翠萍;周小柳;万江花;覃西;李群;;鼻咽癌患者外周血CD4~+CD25~(high)Treg细胞在肿瘤进展中的变化[J];临床检验杂志;2011年02期
9 欧建锋;任晖;李莎;;胃癌组织中Fas/FasL表达及T淋巴细胞亚群分析[J];临床误诊误治;2011年12期
10 葛文华;何金洋;;SIV感染CEM×174细胞后CTLA-4、FOXP3、IDO mRNA的变化[J];中国热带医学;2009年03期
中国博士学位论文全文数据库 前6条
1 刘小倩;吲哚胺2,3-双加氧酶在非霍奇金淋巴瘤免疫耐受中的作用及机制探讨[D];山东大学;2010年
2 林聪达;猴AIDS模型外周血免疫病毒学指标动态变化及艾可清治疗猴AIDS模型的研究[D];广州中医药大学;2011年
3 刘俊田;乳腺癌保乳手术切缘中IDO、Tregs及CD105的检测与临床预后分析[D];天津医科大学;2011年
4 单骄宇;细粒棘球蚴致树突状细胞免疫耐受的机制研究[D];新疆医科大学;2011年
5 孙婷;1-烷基色氨酸和1-[~(18)F]FETrp的合成及生物性能评价[D];中国协和医科大学;2010年
6 许书倩;调节性树突状细胞在ITP发病中的意义及机制研究[D];山东大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 冯惠枝;吲哚胺2,3-双加氧酶对效应CD8~+T细胞溶胞作用的免疫抑制作用[D];山西医科大学;2011年
2 张路英;吲哚胺2,3-双加氧酶对HepG2细胞生物学行为影响的研究[D];山西医科大学;2011年
3 崔宏伟;吲哚胺2,3双加氧酶对小鼠脾内移植肝细胞功能的影响[D];福建医科大学;2011年
4 郭雪;乳腺癌髓系来源抑制细胞与调节性T细胞相关性及其临床意义的研究[D];天津医科大学;2011年
5 王刚;吲哚胺2,3-双加氧酶等在胃癌中的表达及意义[D];天津医科大学;2011年
6 廖月香;SIV感染CEM×174细胞后免疫调控分子mRNA动态变化及中药干预作用[D];广州中医药大学;2008年
7 白燕南;携带白蛋白启动子和IDO基因的重组腺病毒载体的构建[D];福建医科大学;2009年
8 丛义滋;吲哚胺2,3-双加氧酶在乳腺癌中的表达及意义[D];天津医科大学;2009年
9 丁梅;色氨酰tRNA合成酶表达对BALB/c小鼠淋巴瘤动物模型细胞增殖的影响[D];山东大学;2010年
10 麦平;吲哚胺2,3一双加氧酶IDO及CD25在食管癌组织中的表达及临床意义[D];兰州大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 赵鸿,古涛,王翔,丁强,张元芳;白细胞介素-10诱导的大鼠树突状细胞体外免疫功能的研究[J];中华实验外科杂志;2003年05期
2 周景师,窦科峰,付蓉,孙凯,李海民;GM-CSF调节树突状细胞对移植免疫应答的影响[J];中华实验外科杂志;2004年02期
3 李晓,陈怀增,谢幸,叶大风,吕卫国,丁志明;卵巢癌患者CD4~+CD25~+调节性T细胞比例增高的可能机制[J];中华微生物学和免疫学杂志;2004年07期
4 刘俊田,岳杰,任秀宝,李慧;乳腺癌患者外周血CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞的检测及意义[J];中华肿瘤杂志;2005年07期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 袁庆文,刘学政,刘学农,江平发;胃癌Hsp70-肽复合物致敏树突状细胞抗肿瘤作用的研究[J];江西医学院学报;2005年03期
2 杨春;吴雨岗;;胃癌患者外周血树突状细胞的体外扩增、鉴定及内吞能力测定[J];江苏医药;2007年09期
3 许炳华;吕国强;沈晓明;陆树洪;;自体胃癌细胞致敏的DC疫苗对胃癌术后免疫功能的影响[J];江苏医药;2008年12期
4 江凤翔;吴云林;吴涤梵;吴巍;黄玮;刘今;张尚权;乔敏敏;章永平;;树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞对胃癌细胞杀伤作用[J];胃肠病学和肝病学杂志;2007年06期
5 郑海燕;王兴芬;辛琪;张娜;杜华欣;;胃癌组织中树突状细胞和VEGF的表达变化及意义[J];山东医药;2009年26期
6 谢绍建;闫庆辉;单保恩;付泽娴;孟繁杰;李保东;蔡建辉;;转染自体胃癌细胞总RNA的树突状细胞诱导个体化免疫治疗的体外实验[J];细胞与分子免疫学杂志;2006年01期
7 杨晶;;DC+CIK在胃癌患者中的治疗效果及护理研究[J];西南军医;2011年01期
8 雷晓;余佩武;饶芸;石彦;吴淼;周立新;;胃癌患者外周血MoDCs功能活性检查及意义[J];第三军医大学学报;2006年05期
9 刘文忠,萧树东,江绍基,胡运彪,朱盘石,李竹平,张文栓;胃癌和萎缩性胃炎患者锌、铜、铁含量分析[J];上海第二医科大学学报;1986年02期
10 ;35 脾脏对胃癌患者免疫状态的影响[J];华中科技大学学报(医学版);1992年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 何敏英;窦瑛;周静;蔡丽南;谢妮;;老年胃癌患者术后肺部感染的预防及护理[A];中华护理学会全国第12届老年护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2009年
2 梁光宇;吴绪祥;;赵冠英教授治疗胃癌经验简介[A];第二十次全国中西医结合消化系统疾病学术会议暨消化疾病诊治进展学习班论文汇编[C];2008年
3 许沈华;朱欣;郑智国;徐琦;朱赤红;谢锦波;余传定;;3144 m/z蛋白峰在胃癌的表达和影响生存因素分析[A];“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集[C];2011年
4 王超琴;姜笑晨;;术前CTA观察胃癌患者脾动脉解剖对手术的指导意义[A];2010中华医学会影像技术分会第十八次全国学术大会论文集[C];2010年
5 许海霞;杨亚平;;胃癌舌象相关性的研究进展[A];第四次全国中西医结合诊断学术研讨会论文集[C];2010年
6 黄静芳;;胃癌患者的心理护理体会[A];全国肿瘤护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2007年
7 于航娜;;老年胃癌患者术后经鼻—空肠营养的护理体会[A];全国肿瘤护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2008年
8 刘连;王丽珍;李春鸣;;激光捕获显微切割技术研究胃癌hMSH2基因突变与HP感染的关系[A];中国解剖学会2011年年会论文文摘汇编[C];2011年
9 朱玮;蔡阳;封光华;杨祺俊;冷建杭;;胃癌手术前后活化CD_(69)、HLA-DR的变化与临床意义[A];2004年浙江省外科学学术年会论文汇编[C];2004年
10 马万山;;胃癌患者免疫相关基因的表达谱研究[A];第三届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 李天舒 通讯员 胡颜;胃癌患者呈年轻化趋势[N];健康报;2009年
2 记者 顾泳;我国年增胃癌患者40万[N];解放日报;2010年
3 记者 陈青;胃癌患者从“存活”迈向“乐活”[N];文汇报;2010年
4 本报记者 朱国旺;胃癌治疗向规范化和个体化发展[N];中国医药报;2010年
5 外科 博士 文宇;胃癌患者术后应定期复查[N];家庭医生报;2003年
6 健康时报记者 白轶南;胃癌早治生存率达90%[N];健康时报;2010年
7 早报记者 臧鸣;59岁胃癌患者成沪上首位永久携带胶囊者[N];东方早报;2010年
8 本报记者 慕欣;解读卫生部2011版胃癌诊疗规范[N];医药经济报;2011年
9 程守勤 徐机玲;“人造胃”让胃癌患者吃饱吃好[N];中国医药报;2000年
10 全国健康教育首席专家、中国抗癌协会理事长 教授 徐光炜 北京大学临床肿瘤学院 步召德;胃癌患者的预防保健[N];家庭医生报;2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张汝鹏;吲哚胺2,3双加氧酶在胃癌免疫中作用的初步研究[D];天津医科大学;2011年
2 李锐;CD40信号调控胃癌免疫编辑的作用及机制[D];苏州大学;2011年
3 王敦正;胃癌辨证治疗的方证相应研究[D];南京中医药大学;2011年
4 邓晶;神经侵犯与胃癌预后关系的临床研究和Meta分析[D];浙江大学;2011年
5 周儒;老年胃癌患者手术治疗风险与疗效评价及巨噬细胞相关集落刺激因子作为新型肿瘤标志物的探索[D];复旦大学;2012年
6 邓锒梅;Sorcin相互作用蛋白的筛选及其与胃癌多药耐药的相关研究[D];中南大学;2010年
7 李世超;胃癌中GNLY和Foxp3的表达水平分析及临床相关性研究[D];复旦大学;2012年
8 张晓伟;Bmi-1启动子介导Bmi-1干扰靶向性治疗胃癌研究[D];复旦大学;2012年
9 刘科;核基质结合蛋白SATB1对胃癌生物学行为的影响及其机制研究[D];华中科技大学;2010年
10 袁伟杰;EphA2基因沉默对胃癌SGC-7901细胞侵袭力的影响及相关机制研究[D];中南大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王颐;胃癌患者术后外周血CK20mRNA检测及自体DC、CIK细胞免疫治疗的影响[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
2 盛贤能;胃癌腹腔冲洗液细胞角蛋白19 mRNA的检测[D];兰州大学;2010年
3 韩超;胃癌联合脾切除术和胃癌单纯胃切除的术后长期生存率的回顾性分析[D];中国医科大学;2010年
4 孙栋;胃癌患者MMP-3血清水平及癌组织中VEGF-C、MMP-3的表达[D];山东大学;2010年
5 汤美;sCD40L联合LY294002对胃癌AGS细胞生长及侵袭转移影响的实验研究[D];苏州大学;2010年
6 庞君豪;胃癌术中区域动脉灌注化疗对癌组织中Survivin及MMP-2表达的影响[D];川北医学院;2010年
7 牛茜;前胃泌素在胃癌干细胞中表达的初步研究[D];兰州大学;2011年
8 周辉;胃癌患者外周血中微小RNA的分析及其临床意义[D];宁波大学;2011年
9 孟欣;胃癌患者生存质量影响因素分析的统计方法研究[D];福建医科大学;2002年
10 袁建明;胃癌患者的外科治疗及预后分析[D];新疆医科大学;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026