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《天津医科大学》 2002年
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1、核因子—κB受体激活物配基(RANKL)反义RNA影响破骨细胞样细胞生成的研究 2、小鼠RANKL活性区cDNA克隆及在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达 3、人护骨素(OPG)成熟肽基因酵母表达载体的构建

王宝利  
【摘要】: 护骨素(osteoprotegerin,OPG)及其同源配基核因子-κB受体激活物配基(receptor activator of nuclear factor κB ligand,RANKL)在破骨细胞分化和激活的调控中具有十分关键的作用。它们都由成骨细胞/骨髓基质细胞谱系表达。在允许浓度的M-CSF存在时,RANKL有力促进破骨细胞的分化、成熟和激活,并抑制细胞凋亡,是这些过程所必需的终极效应分子。OPG是RANKL的诱骗受体,通过与表达于成骨细胞/骨髓基质谱系表面的RANKL结合阻断RANKL对破骨细胞生成等的诱导作用。多数趋钙激素和细胞因子通过影响RANKL与OPG的相对表达水平来调控破骨细胞的分化和功能。 本实验通过研究RANKL和OPGmRNA在OVX小鼠骨组织中的相对表达水平,探讨RANKL和OPG在PMO发病中的意义。 我们将40只6周龄昆明小鼠随机分为5组,分别为Ⅰ组:对动物行假手术,术后1周处死;Ⅱ组:行卵巢切除手术,安慰剂治疗,术后1周处死;Ⅲ组:行卵巢切除手术,安慰剂治疗,术后5周处死;Ⅳ组:行卵巢切除手术,术后给苯甲酸雌二醇治疗,5周后处死;Ⅴ组:行假手术,术后5周处死。动物处死后,提取胫、股骨骨组织总RNA,以GAPDH作为内参照,RT-PCR扩增检测OVX小鼠RANKL和OPG mRNA表达水平,发现手术后第1、5周去卵巢小鼠骨组织RANKL mRNA表达水平都较假手术组明显增高,采用雌激素治疗可显著降低RANKL mRNA表达水平。而OPG mRNA表达水平在去卵巢后第1周时较假手术组显著降低,在第5周时却比假手术组显著升高,可能是机体的一种代偿机制。雌激素治疗组则介于去卵巢5周组和假手术组之间,但与二者均无显著性差异。以RANKL/OPG来表示RANKL和OPG mRNA的相对表达水平,我们发现,去卵巢后,RANKL/OPG显著增高,采用雌激素防 天津医科大学博士学位论文 治可使RANKL/OPG与假手术组无显著差异。 本研究结果提示PMO发病中雌激素减退所导致的骨丢失与骨组织RANKL 和OPG的mRNA相对表达水平紊乱有关。
【学位授予单位】:天津医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R58

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