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《天津医科大学》 2003年
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撤除细胞因子对脐血细胞凋亡的影响及人参皂甙Rg1、Rb1的干预作用

万晓华  
【摘要】: 目的:探讨撤除细胞因子对脐血造血细胞凋亡的影响及人参皂甙Rg1、Rb1的干预作用。方法:无菌条件纯化获得脐血CD34~+细胞,采用StemSpan~(TM)SFEM无血清液体培养基,TPO 50μg/L,SCF 50μg/L细胞因子组合扩增CD34~+细胞7天。撤除细胞因子1天和3天,实验组加入不同浓度Rg1(2.5mg/L、5mg/L、10mg/L)、Rb1(5mg/L、10mg/L)预处理,收集适量细胞。用流式细胞仪单色荧光标记检测新鲜分离的CD34~+细胞纯度,FITC-Annexin-Ⅴ双色荧光标记检测细胞凋亡率,比色法检测Caspase-3蛋白相对表达。结果:免疫磁珠MACS分离系统可有效而高质量的分离脐血CD34~+细胞,纯度高达(98.28±2.62)%;用TPO和SCF可使脐血CD34~+细胞明显扩增;收集扩增7天的细胞,撤除细胞因子1天后细胞凋亡率(24.79±2.80)%较对照组(2.69±0.43)%明显增高;各Rgl、Rbl预处理组,可明显降低细胞凋亡率;撤除细胞因子1天和3天,Caspase-3蛋白相对表达均升高近1倍,一定浓度Rg1、Rb1预处理后,可降低Caspase-3蛋白相对表达。结论:撤除细胞因子可诱导脐血造血细胞凋亡,一定浓度Rg1、Rb1有抑制此凋亡的作用,并且Caspase-3参与了凋亡事件并发挥着重要作用。
【学位授予单位】:天津医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R329.2

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