收藏本站
《天津医科大学》 2005年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

靶向毒素DT_(389)-hbFGF的克隆表达及对人晶状体上皮细胞毒性研究

尹连荣  
【摘要】:后囊混浊(PCO)是白内障囊外摘除术后引起视力下降的最常见的并发症,目前没有一种方法可常规应用于临床来阻止其发生,Nd:YAG激光后囊切开不仅可增加病人的经济负担,而且其所致的视网膜脱离、黄斑损伤等严重并发症可成为患者再度视力下降的根源。因此阻止PCO的发生比治疗显得更加重要。 研究证实:术中残留的晶状体上皮细胞(LECs)增殖、迁徙并合成细胞外基质是PCO发生的主要机制,因此清除LECs是阻止PCO发生的根本。LECs不仅可分泌bFGF还可高表达具有高度亲和力的FGF受体;bFGF可终生在晶状体赤道部诱导上皮细胞分化为晶状体纤维,促进LECs的增殖;LECs受损后释放的bFGF与其表面受体结合可刺激其自身的增殖是PCO形成的重要因素。白喉杆菌外毒素(DT)不仅具有很强的细胞毒性而且其酶活性区、跨膜转运区、细胞膜受体结合区三者在结构上彼此独立,适于基因重组免疫毒素的构建及保持毒性功能。因此,本实验利用基因工程技术保留白喉毒素N端389个氨基酸的基因序列,即白喉毒素的毒性区和跨膜区,而用人18KD bFGF基因序列替代白喉毒素的细胞结合区序列构建成pGEX-DT_(389)-hbFGF嵌合毒素质粒并原核表达、纯化;10%SDS-PAGE电泳后考马斯亮蓝染色及Western blot鉴定表达蛋白并通过Brandford染色法测定融合蛋白的浓度;MTT比色法测定免疫毒素不同剂量、不同作用时间对体外培养的人晶状体上皮细胞(HLECs)成活率的影响及DT多抗对免疫毒素毒性作用的抑制;流氏细胞术检测不同剂量免疫毒素所致细胞死亡方式。结果如下:
【学位授予单位】:天津医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R776

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 李秋明;添加晶体皮质提高晶体上皮细胞原代培养成功率[J];眼科研究;1997年01期
2 宁宏,赵平,张劲松,宋敏,李海燕,石树敏;细胞周期素依赖激酶抑制剂P27~(Kip1)在兔晶状体上皮细胞增殖过程中的作用[J];中华眼科杂志;2002年06期
3 孔珺,张劲松,刁饶;受体蛋白质酪氨酸激酶抑制剂影响兔晶状体上皮细胞增生的研究[J];中华眼科杂志;2002年07期
4 刘玉福,袁佳琴,王德文,施玉英,高亚兵,李筱荣,孙慧敏,白微红;碱性成纤维细胞生长因子在人晶体上皮细胞的蛋白检测研究[J];中国实用眼科杂志;1999年07期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王艳青,李秋明;无血清的眼组织对晶状体上皮细胞的培养[J];临床医学;2005年01期
2 胡建石,翁景宁,郑志竑,林炜;成年牛晶状体上皮细胞培养及超微结构的观察[J];福建医科大学学报;2001年02期
3 陈迎月,翁景宁;药物防治后发性白内障研究进展[J];福建医科大学学报;2005年S1期
4 包睿,柳林;细胞因子与晶状体上皮细胞增殖[J];国际眼科杂志;2004年01期
5 张瑞君,张劲松,张娇,宁宏,曲静涛;兔晶状体皮质吸出后FGF-R1mRNA在细胞增殖中的作用[J];国际眼科杂志;2004年06期
6 毛俊峰,刘双珍,魏欣;bFGF对鸡形觉剥夺性近视眼的抑制作用[J];国际眼科杂志;2005年04期
7 朱晓弘;唐桂兰;;染料木黄酮对兔结膜成纤维细胞增殖的抑制作用[J];国际眼科杂志;2006年01期
8 刘芳;孔珺;张劲松;;金雀异黄素对永生化人晶状体上皮细胞系HLEC-B3细胞增殖和周期的影响[J];国际眼科杂志;2007年05期
9 刘玉福;刘宏伟;;碱性成纤维细胞生长因子基因在人晶状体上皮细胞内的表达[J];国际眼科杂志;2008年07期
10 王梦华,李秋明;晶状体上皮细胞体外培养的研究进展[J];国外医学(眼科学分册);2004年05期
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 孙靖;抗人晶状体上皮细胞膜单克隆抗体的制备及其作用的实验研究[D];天津医科大学;2003年
2 张瑞君;PKB及其调节因子FGF、PTEN在晶状体上皮细胞增殖中的作用[D];中国医科大学;2005年
3 游江;金雀异黄素抑制增生性玻璃体视网膜病变的研究[D];中南大学;2006年
4 刘芳;抗Ⅳ型胶原抗体偶联金雀异黄素抑制后发障的研究[D];中国医科大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 段娜;冷凝术后玻璃体腔碱性成纤维细胞生长因子含量的测定[D];广西医科大学;2011年
2 程亚辉;纤溶酶对后发性白内障抑制作用的实验研究[D];河北医科大学;2011年
3 杨丽萍;超顺磁氧化铁纳米粒介导bFGF转染猫角膜内皮细胞[D];苏州大学;2011年
4 黄芳;阿斯匹林对平阳霉素诱导培养兔晶体白内障形成抑制作用的实验研究[D];江西医学院;2001年
5 张娇;PTEN在兔晶状体上皮细胞增殖中的表达及意义[D];中国医科大学;2003年
6 孟繁剑;晶状体前囊的悬浮培养及后发性白内障防治药物的体外筛选[D];郑州大学;2003年
7 刘清云;人工晶体袢的角度与后发性白内障相关性的研究[D];大连医科大学;2003年
8 王梦华;体外模拟后发障的组织培养及药物防治研究[D];郑州大学;2004年
9 朱晓弘;染料木黄酮对体外培养的兔眼结膜成纤维细胞生长的影响[D];山西医科大学;2004年
10 王艳青;纯眼组织对牛晶状体囊袋的体外培养及三氧化二砷对牛晶状体上皮细胞增生的抑制作用[D];郑州大学;2005年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 ;农药六六六的毒性研究(阶段报告)[J];卫生研究;1978年03期
2 汪宗越,魏凌珍,余皖生,孙美芳;萘的毒性研究[J];卫生毒理学杂志;1990年04期
3 刘积善,李玉凡,肖云,孙莉,刘树范,赵肃,王凤芝,王任群;五环牌餐具洗涤剂的毒性研究[J];卫生毒理学杂志;1992年02期
4 雷激;细菌ADP核糖基化外毒素、亚单位和无关佐剂的经皮免疫接种[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;2001年04期
5 李玉萍;冯翰;李秋红;李廷利;;马钱子散的配伍减毒增效实验研究[J];辽宁中医杂志;2008年10期
6 鄭興禮;;破傷風的預防和治療(附病案報告七例)[J];中国医刊;1953年05期
7 雷春文;稀土元素的毒性研究[J];工业卫生与职业病;1983年03期
8 邵晓君,阮水富;硫酸铝的毒性研究[J];卫生毒理学杂志;1989年01期
9 郝旭红,王淑华,郑陶;三种染发香波的一般毒性研究[J];卫生毒理学杂志;1992年02期
10 陆丽敏;从环氧乙烷的毒性研究看其卫生标准修订的进展[J];中华劳动卫生职业病杂志;1995年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 孙祖越;吴建辉;朱焰;;甾体5α-还原酶抑制剂生殖毒性研究——依立雄胺对大鼠、犬和人精子活力的影响[A];加入WTO和中国科技与可持续发展——挑战与机遇、责任和对策(下册)[C];2002年
2 雷晴;万屏;;昆明山海棠毒性研究进展[A];2006中国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2006年
3 陈建国;王茵;来伟旗;梅松;龚幼菊;;竹叶黄酮的毒性研究[A];中国营养学会第五次营养资源与保健食品学术会议论文摘要汇编[C];1999年
4 王宏;沈英娃;卢玲;朱红梅;陈宏;修瑞琴;许永香;高世荣;;典型有害化学品对水生生物的毒性研究[A];中国毒理学会第三届全国学术会议论文(摘要)集[C];2001年
5 邬惠琼;罗运达;柴莲花;;人工蛇胆的毒性研究[A];中国毒理学会第三届全国学术会议论文(摘要)集[C];2001年
6 宋乃宁;李蕾;李海山;艾文超;谢文平;陈会明;;全氟辛酸(PFOA)28天重复剂量经口毒性研究[A];中国毒理学会第三届中青年学者科技论坛暨2011年全国前列腺药理毒理学研讨会论文集[C];2011年
7 王建华;李勤凡;谭远友;洪子鹂;郭庆宏;高巨星;张志恒;;西藏冰川棘豆的毒性研究[A];中国毒理学会第三届全国学术会议论文(摘要)集[C];2001年
8 代丽;单安山;孙进华;尹佳佳;李远见;;重组鸡细胞因子的克隆表达及表达产物抗热应激活性[A];第六次全国饲料营养学术研讨会论文集[C];2010年
9 ;复旦学报(自然科学版)第46卷第6期2007年12月目次[A];2008年上海市动物学会学术会议论文集(二)[C];2008年
10 翁庙成;刘方;王利珍;;建筑火灾烟气毒性分析[A];2005西南地区暖通空调热能动力年会论文集[C];2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;颈椎病可导致视力下降[N];医药经济报;2003年
2 王玉泽;视力骤降及时治[N];卫生与生活报;2007年
3 纪菁;心理因素可导致视力下降[N];中国医药报;2007年
4 钱培康;视力下降与某些营养摄入少有关[N];中国医药报;2000年
5 本报记者 孟民;少年儿童近视眼为啥多了?[N];宝鸡日报;2007年
6 颜宇东聂荣伟;车速过快 视力下降视野变窄[N];中国交通报;2007年
7 健康时报记者 常宾;视力下降祸起糖尿病[N];健康时报;2007年
8 复旦大学附属儿科医院教授 时毓民;保护小儿视力用食疗[N];上海中医药报;2008年
9 湖南省肿瘤医院副主任医师 何正文;视力下降,也许是颅内肿瘤惹祸[N];大众卫生报;2002年
10 唐文;视力下降与心理因素有关[N];大众卫生报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 尹连荣;靶向毒素DT_(389)-hbFGF的克隆表达及对人晶状体上皮细胞毒性研究[D];天津医科大学;2005年
2 刘淑英;绵羊肺腺瘤病毒NM株基因组全序列的研究[D];内蒙古农业大学;2004年
3 陈柯;吡虫啉对小鼠神经细胞的毒性研究[D];中国地质大学;2012年
4 王晓杰;重组人角质细胞生长因子-2克隆表达及其对角膜损伤修复机制研究[D];吉林大学;2010年
5 杨楠;色素上皮细胞衍生因子的实验研究[D];吉林大学;2005年
6 耿毅;斑点叉尾鮰源嗜麦芽寡养单胞菌分离、鉴定与致病机理研究[D];四川农业大学;2006年
7 李春丽;人β防御素3和植物甜蛋白des-pGlu1-Brazzein基因的重组表达研究[D];浙江大学;2005年
8 谢波;链霉菌催化芳香硝基还原及其关键酶的分离与克隆表达[D];大连理工大学;2010年
9 何竞;肝癌复合表位抗原的免疫原性研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
10 王青秀;大黄及其主要成份的毒性毒理研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 石琴;胸膜肺炎放线杆菌毒素IV基因的克隆表达及间接ApxIVA3-ELISA方法的初步建立[D];中国农业科学院;2007年
2 孙嗣梅;蓖麻毒素A链及其突变体的表达、纯化和分析[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
3 张立成;AEV结构蛋白基因的克隆、序列分析及在大肠杆菌中的表达[D];西北农林科技大学;2003年
4 李小飞;拟态弧菌外膜蛋白OmpU基因的克隆表达及其免疫保护性研究[D];安徽农业大学;2007年
5 万孝玲;弓形虫表面抗原SAG4基因的克隆、表达及鉴定[D];广西医科大学;2008年
6 马思杰;猪瘟病毒囊膜蛋白E0基因的表达及鼠抗E0多抗血清的制备[D];扬州大学;2008年
7 杜爱庆;猪胸膜肺炎放线杆菌溶血毒素的克隆表达及表达产物对小白鼠的免疫保护性研究[D];山东农业大学;2008年
8 杨宁;南极深海沉积物中微生物低温脂肪酶的筛选和基因克隆表达[D];国家海洋局第三海洋研究所;2009年
9 王慧;耐热糖苷水解酶57家族基因的克隆表达及功能鉴定[D];暨南大学;2011年
10 詹洁;绿色木霉α-1,2-甘露糖苷酶在毕赤酵母中的克隆表达与活性研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026