早产儿视网膜病变危险因素分析及不同给氧浓度对新生鼠视网膜血管发育的影响
【摘要】:研究目的
1、观察137例新生儿中早产儿视网膜病变(retinop athy of prematurity,ROP)的发生率,并进行与ROP发病相关的危险因素分析。
2、从组织病理学、现代分子生物学的角度,分析不同氧浓度下,视网膜血管的形态变化,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因的调节规律,阐明ROP新生血管形成的可能机制。研究方法
1、临床方面:对137例新生儿进行眼底检查,记录病史,运用logistic多因素逐步回归分析方法研究ROP的危险因素。
2、实验方面:
(1)模型制作:将60只7日龄C57BL/6J幼鼠随机分为氧诱导ROP模型组、低氧组、正常对照组。其中24只幼鼠在75%±2%浓度的高氧状态下5天,随后在正常氧环境下5天,作为氧诱导ROP模型组;12只幼鼠在8%浓度的低氧环境下24小时,作为低氧组;其余24只幼鼠作为正常对照组。
(2)形态学研究:采用荧光素血管灌注及视网膜铺片、组织切片方法观察各组视网膜血管的变化,计数突破内界膜的血管内皮细胞核来量化高氧诱导视网膜新生血管的程度。
(3)蛋白表达:采用免疫组织化学的方法,观察视网膜切片细胞胞质中VEGF蛋白表达的情况。
(4)基因表达:采用半定量逆转录—聚合酶链反应,观察