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《天津医科大学》 2006年
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五肽化合物CMS010.26对移植排斥和类风湿关节炎的治疗作用及机理研究

王松  
【摘要】:目的: 研究五肽化合物CMS010.26对同种移植排斥和类风湿关节炎的治疗作用,并初步探讨其通过p56~(lck)和P13K信号转导途径,抑制T淋巴细胞活化的作用机制。 方法: 1.MTT法观察CMS010.26体外对单向MLR的影响;建立小鼠同种尾一背皮肤移植和耳后心肌移植模型,计算移植物平均生存时间,HE染色观察CMS010.26对移植物的移植排斥病理损害的影响;免疫组化方法观察CMS010.26对移植物的T淋巴细胞浸润的影响。 2.建立大鼠AA模型,测量各组大鼠的踝关节周长,观察CMS010.26对AA大鼠踝关节肿胀的治疗作用,HE染色观察CMS010.26对AA大鼠踝关节病理改变的抑制作用;MTT法观察CMS010.26对AA大鼠T淋巴细胞增殖的抑制作用;免疫组化方法观察CMS010.26对AA大鼠关节T淋巴细胞浸润的影响。 3.MTT法观察CMS010.26体外对Jurkat T细胞增殖的影响;应用免疫沉淀技术和ELISA试剂盒,检测CMS010.26对Jurkat T细胞信号转导蛋白p56~(lck)蛋白活性的影响;应用Western Blot方法,观察CMS010.26对Jurkat T细胞p56~(lck)蛋白表达的影响;应用免疫沉淀技术和ELISA方法,检测CMS010.26对Jurkat T细胞PI3K蛋白活性的影响;应用荧光实时定量PCR和Western Blot方法,观察CMS010.26对Jurkat T细胞PI3K的调节亚基P85α和催化亚基P110α mRNA水平、P85和P85α蛋白表达的影响。 4.应用免疫沉淀技术和ELISA试剂盒,检测CMS010.26对AA大鼠脾细胞p56~(lck)蛋白活性的影响;应用Western Blot方法,观察CMS010.26对AA大鼠脾细胞p56~(lck)蛋白表达的影响;应用免疫沉淀技术和ELISA方法,检测CMS010.26对AA大鼠脾细胞PI3K蛋白活性的影响;应用荧光实时定量PCR和Western Blot方法,观察CMS010.26对AA大鼠脾细胞PI3K的P85α和P110α mRNA
【学位授予单位】:天津医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R392.5

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