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《天津医科大学》 2008年
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创伤性脑损伤后炎性因子TNF-α和IL-6表达的实验研究

于亮  
【摘要】: 目的探讨肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素-6(IL-6)在大鼠急性创伤性脑损伤后的表达及其变化规律,以及抑制其表达是否达到减轻继发性脑损伤,力图为临床治疗颅脑损伤技术的提高提供新的理论依据。 材料与方法:Sprague-Dawley大鼠56只,体质量275g-342g。按随机原则分为A、B、C、D、E、F、G7组,每组8只。用10%水合氯醛腹腔注射(3ml/kg体重),麻醉生效后,将大鼠顶枕部鼠毛剪去。常规消毒后顶枕部中线切开头皮,长4cm,钝性剥开软组织、骨膜,暴露颅骨。在人字缝前3mm,颅骨中线旁3mm,钻直径5mm的圆形骨窗,保持硬膜完好无损。采用自由落体打击装置,以30g重锤从35cm高处打击,造成重型脑损伤,记录打击时间,缝合头皮饲养。G组动物只行开颅手术,不做脑挫伤作为对照。对A、B、C、D、E、F组实验动物分别于手术后24h、72h、120h、1w、2w、3w时间点取标本。深麻醉致死后,立即开胸自左心尖插管自升主动脉,以含4%多聚甲醛的0.1MPB(PH7.4)灌注后快速剥取脑组织,留取临近挫伤灶后方(临界区)及对侧相应部位(未损区)大脑为实验标本。对照组在相应部位进行取材作为正常对照。4%多聚甲醛固定24小时以上,制蜡块,石蜡切片厚约5微米。应用免疫组织化学染色SP法检测TNF-α,IL-6蛋白质在全部标本中的表达。通过测定阳性反应物的灰度,对免疫组织化学染色阳性反应物进行定量检测。应用SPSS11.5统计软件包,对免疫组织化学结果以(?)±s表示,用完全随机设计的单因数方差分析,SNK-q检验对结果进行分析。检验标准采用p<0.05统计学意义。 结果:免疫组织化学染色结果:TNF-α着色于胞浆中,各实验组标本中都有表达,对照组标本中偶见表达,有统计学差别(P<0.01)。B、C组表达最明显,且二者表达无统计学差别(P>0.05)。C组,损伤侧(临界区)与对侧相应部位(未损区)表达广泛,无统计学差别(P>0.05)。A、D、E、F组,临界区比未损区表达明显,有统计学差别(P<0.05)。 IL-6着色于胞浆中,各实验组标本中损伤侧(临界区)都有表达,G组标本中未见表达,有统计学差别(P<0.01)。D组表达最明显。对侧相应部位(未损区)D、E、F有较明显表达。A、B、C组对侧相应部位(未损区)有少量表达,无统计学差别(P>0.05)。 结论:1.TNF-α在创伤早期就有表达,第3,5天最高,且无统计学差别(P>0.05),第2,3周仍明显高于正常。故重型颅脑损伤后存在炎性因子TNF-α的过度表达。第3周高于第2周(P<0.05),考虑在重型颅脑损伤后的恢复期,TNF-α参与了脑损伤的修复过程。2.IL-6在创伤1周后表达最高,第2,3周也表达明显,表达高峰晚于TNF-α表达高峰时间,TNF-α可能诱导了IL-6的表达。在创伤一周内,脑组织双侧表达差异显著,IL-6不存在广泛过度表达,有可能主要参与了脑损伤后的修复。3.TNF-α表达高峰在3-5天,与临床上脑水肿高峰期相符合,与脑脊液检测结果相近,故脑脊液检测TNF-α水平可作为间接反映颅内炎症指标,为临床提供参考。4.由于三周时二种因子继续高表达,故有可能共同参与了脑损伤后的修复。
【学位授予单位】:天津医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R651.15

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【引证文献】
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