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《天津医科大学》 2009年
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Caspase-3抑制剂对兔外伤性视神经损伤后视网膜神经节细胞凋亡影响的实验研究

申战省  
【摘要】: 目的: (1)应用FPI建立标准化兔外伤性视神经损伤动物模型,并探讨该模型的特点。(2)探讨Caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK对兔外伤性视神经损伤后视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的凋亡抑制作用及作用规律。(3)通过比较玻璃体腔和球周注射两种方式来探讨Caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK对兔外伤性视神经损伤后的视神经功能修复情况。 方法: 中国纯种大耳白兔104只,从中随机选取8只兔(16只眼)作为空白对照组(N组),其余96只(192只眼)作为实验组,实验组再分为玻璃体腔注射组和球周注射组,又根据给药后不同的观察时间将每组分为1、4、7、10、14、21天组六个亚组。每个亚组8只兔(16只眼)。玻璃体腔注射组中每只兔的右眼为caspase-3抑制剂注射组(A组),左眼为玻璃体腔DMSO液注射组(B组)。眼周注射组中每只兔的右眼为球周caspase-3抑制剂注射组(C组),左眼为球周DMSO液注射组(D组)。应用液压冲击颅脑损伤仪(FPI)建立兔视神经损伤动物模型,按照实验分组术后30分钟玻璃体腔或者眼周注射Caspase-3抑制剂2.5μl/kg,分别于术后1、4、7、10、14、21天进行闪光视觉诱发电位(F-VEP)、眼眶核磁共振(MRI)检查以及应用TUNEL法染色技术检测神经节细胞的凋亡。 结果: (1)F-VEP:与正常兔F-VEP相比,对照组(B组和D组)F-VEP在术后1、4、7天潜伏期逐渐延长,振幅逐渐缩短(P0.05),至10天趋于稳定(P0.05)。实验组(A组和C组)F-VEP在术后1天、4天潜伏期延长,但实验组4天组与对照组4天组潜伏期相比有统计学意义(P0.05),至7、10、14和21天主波潜伏期则明显缩短,振幅明显升高,与对照组相比有显著统计学差异(P0.05)。A组伤后21天潜伏期和振幅分别为65.46±6.97mv和6.75±2.75mv,和C组(72.06±6.57mv和6.02±1.98mv)比较有统计学意义(P0.05)。(2)眼眶MRI:实验组视神经MRI可见伤后7天后粗大的视神经开始消退,至14天以及21天水肿吸收完全,视神经形态结构基本上恢复正常,对照组14天以及21天仍可见视神经周围信号增高,眶内结构紊乱。(3)TUNEL染色:对照组伤后1天可见凋亡细胞,4天组明显增多,至7天达高峰。实验组伤后4~10天仅可见少量的凋亡细胞,RGCs凋亡指数从伤后4天起与对照组比较明显减少(P0.05)。此外,A组与C组相比在伤后14~21天有统计学意义(P0.05)。 结论: (1)应用FPI能成功建立兔标准化外伤性视神经损伤动物模型,该模型具有临床模拟性、稳定性、可重复性、容易操作性、可量化性等特点,为探讨视神经损伤机制及寻求有效的治疗方法的研究提供了一种理想的实验动物模型;(2)通过探讨Caspase-3抑制剂在视神经损伤后视网膜神经节细胞继发性死亡中起重要作用,能够正确理解视神经损伤后的视功能变化,对预后评估提供了重要的依据;(3)Caspase-3抑制剂能有效地抑制视神经损伤后神经节细胞的凋亡,促进伤后视神经的修复以及视功能的恢复;(4)Caspase-3抑制剂的视神经保护作用为今后外伤性视神经损伤的药物治疗选择提供了可靠依据;(5)玻璃体腔注射方式比球周注射方式治疗持续作用时间强,稳定性更好。
【学位授予单位】:天津医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R779.1

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