收藏本站
《天津医科大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

骨髓增生异常综合征恶性造血克隆的早期识别及根治研究

岳兰竹  
【摘要】: 目的 从免疫表型、分子生物学、细胞形态学、组织化学等方面寻找与骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic Syndrome, MDS)恶性克隆负荷显著相关的辅助诊断指标,并在体外及体内对不同方案治疗MDS的机制及疗效进行研究。 方法 研究对象为MDS患者73例及正常对照12名。第一部分采用流式细胞术(FCM)检测白介素-3受体α(CD123)和粒细胞集落刺激因子(Granulocyte Colony Stimulating Factor, G-CSF)受体(CD114)在MDS患者骨髓中的表达情况,从免疫表型方面寻找MDS恶性克隆的分子标志。第二部分采用半定量RT-PCR的方法检测dlk1 (delta-like 1)基因在MDS患者骨髓中的表达情况,并分析其临床意义,从分子生物学角度探寻恶性克隆的分子标志。第三部分利用t检验、χ2检验、Logistic回归分析等统计方法分析MDS患者骨髓形态学、外周血象、铁代谢等指标与典型染色体异常、恶性克隆负荷及分子遗传学进展的相关性,从细胞形态学和组织化学等方面探索MDS恶性克隆的标志。第四部分体外培养MDS患者骨髓粒-巨噬细胞集落形成单位(GM-CFU),14天后分别加入地西他滨、HA(高三尖衫酯碱+阿糖胞苷)、DA(柔红霉素+阿糖胞苷)等药物,采用FCM检测72h后细胞的凋亡率及分化抗原CD11b、HLA-DR的表达,并采用RT-PCR检测凋亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶3(caspase3)mRNA的表达,研究不同药物对MDS患者GM-CFU的作用及机制。第五部分将MDS患者根据国际预后积分系统(IPSS)评分分为中低危组和高危组,对依据不同危险度实施的分层治疗疗效进行分析。 结果 第一部分MDS患者骨髓CD34+细胞分化异常,CD34+CD38-/CD34+比例〔(14.03±5.27)%〕显著高于对照组〔(7.70±4.36)%〕(P0.01);MDS患者骨髓CD 123+CD34+CD38-/CD34+CD38-表达率为(48.39±28.15)%,显著高于对照组〔(8.75±11.71)%〕(P0.01),全血细胞减少患者的CD123表达率〔(63.15±23.84)%〕显著高于一系〔(19.30±8.65)%〕及两系〔(32.32±22.93)%〕血细胞减少者(P均0.01),染色体异常患者的CD123表达率〔(54.29±24.72)%〕显著高于染色体正常组〔(35.40±29.07)%〕(P0.05),CD 123+CD34+CD38-/CD34+CD38-表达率与骨髓原始细胞比例(r=0.457,P0.05)及恶性克隆负荷呈显著正相关(r=0.357, P0.05); CD123+CD34+CD38细胞的CD114表达率为(34.82±29.58)%,显著低于CD123-CD34+CD38-细胞中的CD114表达率((53.48±27.41)%)(P0.05),表型为CD123+CD34+CD38-的细胞可能是MDS的恶性克隆细胞。第二部分dlkl基因在MDS患者骨髓单个核细胞(BMMNC)中的表达量为0.7342±0.3652,显著高于对照组(0.4801±0.1759)(P0.05);随MDS亚型进展,dlk1基因表达量显著增高(P0.05):dlk1基因表达量与骨髓原始细胞比例呈显著正相关(r=0.467,P0.05);染色体异常组的dlkl表达量(0.9007±0.4334)显著高于染色体正常组(0.641±0.2630) (P0.05); dlk1表达量较高(≥0.8)组的平均恶性克隆负荷(0.4134±0.3999)显著高于dlk1表达量较低(0.8)组(0.1517±0.3109)(P0.05)。第三部分MDS患者常见的染色体核型异常由多至少依次为-7、+8、+21/-21、-5/5q-、-Y等。特征性病态造血与典型染色体异常的相关性包括:双核粒细胞、红细胞缗钱状与-7显著相关;双核粒细胞与-5/5q-显著相关;粒细胞分叶不良与-20/20q-显著相关(P均0.05)。MDS高恶性克隆负荷的指征包括:A组(骨髓涂片见到奇数核红细胞、外周血出现幼稚细胞)、B组(骨髓涂片见到双核粒细胞、粒细胞分叶不良、骨髓三系病态造血、PAS阳性、血清铁蛋白≥220ng/mL、不饱和铁结合力(UIBC)40umol/L)。满足A组两个条件,或满足A组其一同时满足B组两个及以上条件,或满足B组4个及以上条件者具有显著较高的恶性克隆负荷(P0.01)。MDS患者分子遗传学进展的危险因素包括:骨髓涂片可见奇数核红细胞、粒细胞巨幼样变及高髓系分化指数(Differentiation Index, DI) (P0.05)。第四部分地西他滨可诱导MDS细胞凋亡,经1.6mmol/L、3.2mmol/L、6.4mmol/L地西他滨作用后,细胞凋亡率为别为(21.969±10.187)%、(24.246±9.053)%、(26.438±10.742)%,显著高于对照组(13.965±3.503)%(P均0.05),呈浓度依赖性;地西他滨同时可促进细胞分化,经3.2mmol/L、6.4mmol/L地西他滨作用后,细胞表面分化抗原CD11b表达率分别为(43.546±11.222)%、(46.854±10.347)%,均显著高于对照组〔(31.196±12.839)%〕(P均0.05)。经HA作用后,细胞凋亡率为(32.048±9.525)%,显著高于对照组〔(13.965±3.503)%〕(P0.05),死亡率〔(31.550±9.514)%〕亦显著高于对照组〔(7.399±5.990)%〕(P0.05)。经DA作用后,细胞死亡率((55.396±16.063)%)显著高于其他各组(P0.05),凋亡率〔(4.664±4.074)%〕、CD11b表达率〔(14.422±14.921)%〕均显著低于其他各组(P均0.05)。第五部分根据不同危险度实施分层治疗是MDS治疗的主导思想;中低危组患者应用造血刺激因子(Hematopoietic Stimulating Factor, HSF)治疗的总有效率(74.4%)及总显效率(65.1%)均显著高于不用HSF组(有效率36.4%、显效率18.2%)(P均0.05),贫血患者应用促红细胞生成素(Erythropoietin, EPO)治疗的血红蛋白显效率(28.6%)显著高于不用EPO组(0%)(P0.05),粒细胞减少患者应用G-CSF治疗的中性粒细胞有效率(69.0%)显著高于不用G-CSF组(20.0%) (P0.05); IPSS高危组MDS及MDS转白患者首选IA(去甲氧柔红霉素+阿糖胞苷)方案化疗,地西他滨治疗MDS的疗效初步观察较好,仍有待于大样本量的长期观察。 结论 (1)MDS患者高恶性克隆负荷的指征包括:CD123高表达、dlk1基因高表达、骨髓涂片可见奇数核红细胞、外周血可见幼稚细胞; (2)MDS患者特征性病态造血与典型染色体异常的相关性包括:双核粒细胞和红细胞缗钱状与-7显著相关、双核粒细胞与-5/5q-显著相关、粒细胞分叶不良与-20/20q-显著相关; (3)MDS患者分子遗传学进展的危险因素包括:骨髓涂片可见奇数核红细胞、粒细胞巨幼样变及高髓系分化指数; (4)根据不同危险度实施分层治疗是MDS治疗的主导思想;IPSS中低危组MDS患者可获益于造血刺激因子的应用,IPSS高危组MDS及MDS转白者首选IA方案化疗,地西他滨在体外及体内对MDS均有较好的疗效。
【学位授予单位】:天津医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R55

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 肖艳华;易红;谭潭;梁婷;陈主初;肖志强;;5-杂氮-2′-脱氧胞苷抗白血病作用的体外研究[J];中南大学学报(医学版);2008年04期
2 王巍;;三氧化二砷对人骨髓增生异常综合征MUTZ-1细胞的作用[J];吉林医学;2005年12期
3 曹燕然;邵宗鸿;施均;王化泉;刘鸿;付蓉;赵明峰;何广胜;白洁;涂梅峰;邢莉民;崔振珠;孙娟;贾海蓉;杨天楹;;骨髓增生异常综合征多指标综合诊断的前瞻性研究[J];中国实用内科杂志;2006年15期
4 牛奕;陈书长;江滨;李德高;葛昌文;李蓉生;;红白血病——骨髓增生异常综合征的一种亚型?[J];中国实验血液学杂志;2007年02期
5 杨力;徐瑞容;宋国齐;黄红铭;刘红;姜胜华;王信峰;丁润生;;地西他滨联合曲古抑菌素A对MDS细胞株SKM-1作用的体外研究[J];中国实验血液学杂志;2008年04期
6 邵宗鸿,付蓉;免疫相关性血细胞减少症——一种新认知的疾病(上)[J];中国医刊;2005年01期
7 邵宗鸿,张泓,陈桂彬,王立,李克,张益枝,李莉,孙娟;骨髓增生异常综合征骨髓单个核细胞c-kit受体表达及功能的研究(英文)[J];Chinese Medical Journal;2001年05期
8 施均,邵宗鸿,陈桂彬,李克,刘鸿,张益枝,和虹,赵明峰,何广胜,张泓,储榆林,郝玉书;白血病前期患者临床及实验室特征的研究(英文)[J];Chinese Medical Journal;2002年01期
9 赖悦云,邱镜滢,张艳,张彦,师岩,何琦,党辉,陆道培;骨髓增生异常综合征染色体核型连续性监测的临床意义[J];中华血液学杂志;2004年11期
10 于阳;刘旭平;刘世和;于明华;张悦;肖志坚;;伴染色体结构异常的骨髓增生异常综合征[J];中华医学杂志;2007年38期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘峰,陈元玉,李冠武,温博贵;Stat1蛋白在急性髓系细胞白血病患者外周血白细胞中的激活[J];癌变.畸变.突变;2004年04期
2 李丽亚;刘自泰;;中西药联合扶正治疗小儿特发性血小板减少性紫癜疗效观察[J];中医药临床杂志;2011年10期
3 丁刚;;CAG方案治疗老年急性髓系白血病疗效观察[J];安徽卫生职业技术学院学报;2010年02期
4 鲍世平;;全反式维甲酸联合As_20_3治疗急性早幼粒细胞白血病21例分析[J];安徽卫生职业技术学院学报;2010年03期
5 丁刚;;小剂量沙利度胺联合VAD方案治疗多发性骨髓瘤的体会[J];安徽卫生职业技术学院学报;2010年06期
6 吴凡;夏瑞祥;;急性早幼粒细胞白血病49例临床疗效分析[J];安徽医学;2009年06期
7 王培莉;;沙利度胺联合VAD方案治疗20例多发性骨髓瘤疗效分析[J];安徽医学;2009年10期
8 刘朝霞;卢文;钱浩;;多发性骨髓瘤肾损害临床特征及相关因素分析[J];安徽医学;2010年03期
9 郭明英;黄帅;李瑞;;再生障碍性贫血60例临床分析[J];安徽医学;2011年02期
10 梁虹;姚福生;张林;严红;赵海军;陈荃宏;;全反式维甲酸和三氧化二砷联合诱导分化治疗急性早幼粒细胞白血病[J];安徽医学;2011年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 付强;李苗;黄柳;宋安萍;秦凯;袁响林;;贫血对胃癌术后辅助放化疗影响的临床观察[A];第七届全国癌症康复与姑息医学大会大会论文集和专题讲座[C];2011年
2 李宇涛;沈建箴;杨雪梅;;急性白血病不同化疗不良反应分级的证素病理特点研究[A];全国第十二次中医诊断学术年会论文集[C];2011年
3 李小龙;黄秀峰;徐斐;王薇薇;黄小芳;王赛芳;刘欢乐;王金果;刘晖;;网织血红蛋白含量在缺铁性贫血诊断中的临床价值[A];2011年浙江省检验医学学术年会论文汇编[C];2011年
4 余玲玲;王慧燕;余坚;郑晓群;田可港;吕建新;冯晶晶;郑美琴;;HRM技术检测β地中海贫血基因突变方法的建立及初步临床应用[A];2011年浙江省检验医学学术年会论文汇编[C];2011年
5 周郁鸿;魏克明;何绿苑;孙雪梅;邵科钉;方炳木;沈一平;叶宝东;沈建平;林圣云;陈志炉;蔡岗丽;陈健;高雁婷;汪笑秋;胡致平;武利强;俞庆宏;吴迪炯;胡通林;祝佳嘉;;益气滋阴法治疗慢性血小板减少症的临床研究[A];庆祝浙江省中西医结合学会成立三十周年论文集粹2011[C];2011年
6 贺远;;17例免疫相关性全血细胞减少症临床分析[A];贵州省2008年血液学年会论文汇编[C];2008年
7 冯永怀;陈琦;;急性淋巴细胞白血病CD40-CD40L的表达[A];贵州省2008年血液学年会论文汇编[C];2008年
8 袁钟;罗世惜;杨敏;朱曦;毛成梅;;APBSCT治疗恶性血液病临床疗效观察[A];贵州省2008年血液学年会论文汇编[C];2008年
9 张小梅;袁红;黄毅;;米托蒽醌、足叶乙甙与阿糖胞苷联合治疗复发性与难治性急性淋巴细胞白血病[A];贵州省2008年血液学年会论文汇编[C];2008年
10 胡杰英;蒋东霞;范瑞华;郭金东;魏旭东;符粤文;宋永平;;69例骨髓增生异常综合症染色体核型分析[A];中国环境诱变剂学会致癌专业委员会09年学术会议论文汇编[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张静;急性单核细胞白血病的临床研究[D];北京协和医学院;2010年
2 姜波;高白细胞急性髓系白血病临床特点及急性髓系白血病诱导化疗后幼稚细胞比例的预后意义[D];北京协和医学院;2010年
3 王雁玲;MDS患者骨髓MSCs分子遗传学分析和CsA对MDS患者骨髓MSCs增殖凋亡影响的研究[D];山西医科大学;2011年
4 王梅芳;肝癌缺失基因-1在多发性骨髓瘤中的作用及甲基化研究[D];山西医科大学;2011年
5 丁晓庆;复方浙贝颗粒降低化疗毒性反应的临床观察[D];北京中医药大学;2011年
6 曾慧敏;应用高通量测序研究儿童血液系统疾病发病机制[D];北京协和医学院;2011年
7 邓明扬;血栓性血小板减少性紫癜临床与实验室特点分析及动静脉血栓形成获得性/遗传性危险因素筛查[D];中南大学;2010年
8 李丽娟;骨髓增生异常综合征骨髓造血细胞分化异常及其相关机制的研究[D];天津医科大学;2011年
9 张晔;肝癌抑癌基因甲基化及胆汁甲基化谱的研究[D];天津医科大学;2011年
10 刘娜;补肾生血法对慢性再生障碍性贫血骨髓造血粘附FAK/PI3K通路及Rho GTP酶的影响[D];黑龙江中医药大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘琼;慢性淋巴细胞白血病细胞遗传学特征研究[D];南京医科大学;2009年
2 王莉;慢性髓系白血病细胞遗传学研究[D];南京医科大学;2009年
3 王晓炜;多发性骨髓瘤分子细胞遗传学技术及细胞遗传学异常的研究[D];南京医科大学;2009年
4 朱远东;MicroRNAs与急性白血病诊断分型及预后[D];南京医科大学;2010年
5 杨诗梅;骨髓衰竭患者骨髓间充质干细胞异常的初步研究[D];南京医科大学;2010年
6 姚琳;脱氧胞苷激酶表达与白血病患者氟达拉滨及阿糖胞苷耐药的相关性研究[D];南京医科大学;2010年
7 杨瑞芳;多发性骨髓瘤分子细胞遗传学核型分析研究[D];南京医科大学;2010年
8 张晓丽;MTA与MEA方案治疗难治或复发急性白血病的临床研究[D];郑州大学;2010年
9 杨成胜;SALL4基因及其蛋白在儿童急性白血病的表达及其相关性研究[D];郑州大学;2010年
10 成琳;粘着斑激酶在急性白血病中的表达及其临床意义[D];郑州大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 肖志坚;白血病干细胞的认识现况[J];白血病.淋巴瘤;2003年05期
2 姚尔固;WHO骨髓增生异常综合征的诊断[J];白血病.淋巴瘤;2003年06期
3 吴克复;两类白血病和两类白血病干细胞[J];白血病.淋巴瘤;2004年03期
4 丘镜滢,党辉,任汉云,王德炳,段爱君;自体血浆培养体系对改善白血病骨髓细胞染色体的研究[J];北京医科大学学报;1993年04期
5 倪建华,陈国强;砷的生物学作用及其在临床上的应用前景[J];国外医学.输血及血液学分册;1997年04期
6 VardimanJW,HarrisNL ,BrunningRD ,王荷花;髓系肿瘤世界卫生组织(WHO)分类[J];国外医学.输血及血液学分册;2003年02期
7 施均,邵宗鸿,刘鸿,陈桂彬,张益枝,白洁,何广胜,付蓉,赵明峰,曹燕然,吴玉红,井丽萍,郝玉书,杨天楹,杨崇礼;联合化疗治疗高危组骨髓增生异常综合征及其转化的急性髓系细胞白血病疗效分析[J];中国实用内科杂志;2004年09期
8 周涛,陆红,范洪涛,郭秀枝;甲基转移酶抑制剂对Raji细胞系增殖抑制的实验研究[J];武警医学;2004年10期
9 ;Expression of MRP14 gene is frequently down-regulated in Chinese human esophageal cancer[J];Cell Research;2004年01期
10 陈华,武淑兰,朱强,石永进,徐国宾,王建中;甲基转移酶抑制剂对KG1a细胞系的增殖抑制作用[J];中国实验血液学杂志;2002年04期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 南朝阳;;骨髓增生异常综合征的治疗进展[J];中国民族民间医药;2009年22期
2 张青霞;李晓;;骨髓增生异常综合征异常克隆起源的研究进展[J];诊断学理论与实践;2011年04期
3 王化泉,邵宗鸿;免疫“妥协”和骨髓增生异常综合征细胞克隆[J];中华血液学杂志;2005年01期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 ;骨髓增生异常综合征诊疗常规[A];第八届全国中西医结合血液病学术会议论文集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 岳兰竹;骨髓增生异常综合征恶性造血克隆的早期识别及根治研究[D];天津医科大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 张青霞;MDS患者骨髓异常克隆细胞起源的初步研究[D];苏州大学;2011年
中国知网广告投放
相关机构
>苏州大学
>天津医科大学
相关作者
>岳兰竹 >张青霞
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026