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《青岛大学》 2001年
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天然活性物SPA抗肺癌作用的实验研究与机理探讨

翟振国  
【摘要】:中文摘要 目的 天然活性物海藻硫酸多糖(SPA)是从海藻中提取的天然植物多糖类活性物质,据国外研究报道具有显著的抗肿瘤、免疫增强、抗自由基损伤和心血管活性等多种生物学功效。本实验研究采用体外与体内试验相结合的方法,通过观察体内SPA对Lewis肺癌增殖的抑制作用和动物免疫功能的影响,同时观察SPA及其含药血清对肺癌细胞增殖、凋亡与细胞周期的影响,并对SPA对肺癌的作用与机理进行了探讨。 方法 ①体外试验应用细胞培养模型,采用MTT法利用酶标仪检测SPA体外对肺癌细胞增殖的影响。②动物试验利用Lewis肺癌小鼠模型,观察天然活性物SPA体内对Lewis肺癌增殖的抑制作用,同时观察SPA对动物免疫功能的影响,随机分组,分别口服灌胃生理盐水、SPA 20mg/Kg、40mg/Kg、80mg/Kg及FT-207 150mg/kg,每组10只。从接种肿瘤次日开始灌胃给药,连续10d。末次药后24h处死小鼠,剥取瘤块,称重,计算抑瘤率。同时测定小鼠非特异性免疫功能、血清溶血素、小鼠迟发型超敏反应、小鼠胸腺器官重量及IL-2、IL-1及NK细胞活性。③应用体外细胞培养模型与血清药理学方法,取雄性新西兰兔6只,随机分组,分别口服灌胃SPA 500mg/Kg、环磷酰胺(CTX)100mg/Kg及生理盐水,连续10d,最后1次灌药后2h(灌药前禁食、不禁水12h),采集含药血清,通过流式细胞仪观察SPA及其含药血清对A549肺癌细胞增殖、凋亡与细胞周期的影响,同时检测含药兔血清体外对A549细胞培养上清液中TNF-α活性的影响。 结果 ①SPA 20mg/Kg、40mg/Kg、80mg/Kg连续灌胃给药10d,WP=6对小鼠Lewis肺癌的生长具有明显抑制作用,抑制率分别为35.27%、48.29%和65.41%。②SPA在25~100μg/ml范围内,体外对A549肺癌细胞生长无显著抑制作用。③SPA体内给药可明显升高小鼠血清溶血素水平,增强小鼠迟发性超敏反应(DTH),促进单核-巨噬细胞的碳粒廓清率,刺激脾细胞诱生IL-1、IL-2的水平,增强NK细胞活力,对小鼠免疫功能具有明显增强作用。④含SPA兔血清体外可显著抑制肺癌细胞的增殖,诱导细胞凋亡,出现明显的细胞周期阻滞,明显增强A549细胞培养上清液中TNFα活性。 结论 SPA体内对Lewis肺癌增殖具有明显抑制作用,SPA在25~100μg/ml范围内,体外对A549肺癌细胞生长无显著抑制作用;含SPA兔血清体外可显著抑制肺癌细胞的增殖,并可明显诱导细胞凋亡,明显增强A549细胞培养上清液中TNFα活性。SPA体外实验无直接的细胞毒作用,而含药血清免疫指标活性增强,并出现一定程度的抑瘤效应,提示SPA抗肺癌作用机理可能是通过体内代谢产物或通过诱生具有生物活性的细胞因子,调节宿主免疫功能并介导肺癌细胞凋亡。
【学位授予单位】:青岛大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:R73-36

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