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尿毒症血液透析患者外周血单个核细胞白介素-8 mRNA的表达

张蓓  
【摘要】: 目的 采用分子生物技术,从分子水平上探讨尿毒症血液透析患者外周血单个核细胞是否被激活,而诱导白介素-8的mRNA表达。为临床诊断和治疗尿毒症及其血液透析的并发症提供理论依据。 方法 随机引物法制备白介素-8 cDNA探针,用地高辛标记,并检测其敏感度待用。选择15名尿毒症血液透析患者和15名正常人分为血液透析前组、血液透析后组、正常对照组三组。采外周血查尿素、氮、肌苷,同时用Ficoll密度梯度离心获外周血单个核细胞;制备细胞涂片;利用原位杂交的方法测定细胞内白介素-8的mRNA,显微镜下计数各组单核细胞白介素-8 mRNA表达的百分比,图像分析测定各组单个核细胞的光密度值,以上数据均做统计学分析;Trizol法提取单核细胞RNA,作膜上斑点杂交,图像分析测平均光密度值之后作统计学处理。分别定性和定量测定外周血单核细胞中白介素-8 mRNA表达。 结果 显微镜下观察正常对照组外周血单个核细胞白介素-8mRNA无表达,尿毒症血液透析患者透析前后外周血单个核细胞均有显著的白介素-8 mRNA表达,阳性表达率分别为91.4%、90.2%,此两组间差异无统计学意义(P>0.05)。图象分析结果表明;与正常对照组比较,尿毒症血液透析患者透析前后外周血单个核细胞的光密度值显著提高(P<0.01),但此两组间差异无统计学意义(P>0.05)。膜上杂交后图像分析及统计学处理显示:尿毒症血液 中文摘要 透析患者与正常对照组相比,外周血单个核细胞 IL8 mRNA的表 达量有明显差异(P<0.01),但透析前后差别无显著性意义 u川.05)。尿毒症血液透析患者血尿素氮、肌昔较正常对照组明 显增高,血液透析前较血液透析后明显增高。 结论 正常对照者外周血单核细胞白介素-8基因表达测不出,而 尿毒症血液透析患者外周血单个核细胞有显著的白介素-8的基因表 达,透析前后无明显差异。提示尿毒症血液透析患者外周血单个核 细胞被激活,诱导白介素-8 的mRNA表达增高,但与透析时相无 关,与毒素清除无关。


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