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《青岛大学》 2003年
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猕猴桃浓缩物抗氧化能力及免疫调节作用的实验研究

张燕  
【摘要】: 目的,猕猴桃浓缩物(以下简称浓缩物)是由猕猴桃果实加工而成的含有多种活性物质的浓缩物。本实验研究对猕猴桃浓缩物抗脂质过氧化损伤及免疫调节的作用与机理进行了探讨。 方法:1、抗氧化能力分析:将70只Wistar大鼠按性别、体重随机分成5组,对照组给予普通饲料,四个干预组分别给予5%、10%、15%和30%不同剂量的猕猴桃浓缩物添加饲料。实验时间为30天。实验结束后将大鼠安乐处死,收集血样和组织样本进行分析。①应用过氧化氢(H_2O_2)诱导DNA氧化损伤,采用单细胞凝胶电泳方法测定DNA氧化损伤的程度,观察浓缩物对DNA氧化损伤的影响。同时测定大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性和丙二醛(MDA)、脂褐质(LPO)的含量。②应用Fenton体系产生羟自由基,制备大鼠红细胞膜氧化损伤模型,采用荧光偏振法测定荧光偏振度、微粘度等膜脂流动性指标和生化方法测定红细胞膜丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)的活性,观察浓缩物对生物膜氧化损伤的影响及抗自由基的活性功能。 2、免疫调节作用研究:将70只Kunming小鼠按性别、体重随机分成5组,对照组给予普通饲料,四个干预组分别给予5%、10%、15%和30%不同剂量的猕猴桃浓缩物添加饲料。实验时间为30天。实验结束后将小鼠安乐处死,收集血样和组织样本进行分析。应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法培养小鼠脾淋巴细胞测定其脾淋巴细胞转化率,采用小鼠碳廓清试验方法测定吞噬细胞的吞噬活性和生化方法测定小鼠血清免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)的含量,观察浓缩物的免疫调节活性。 结果:1、抗氧化功能研究结果显示:相对于未摄入浓缩物的对照组,摄入浓缩物的剂量组大鼠血清中SOD活性增高,各组SOD值分别为对照组266.34NU/mL、5%剂量组287.53NU/mL、10%剂量组315.58NU/mL、15%剂量组324.38NU/mL、30%剂量组342.64NU/mL,其中以30%剂量组最为显著,可以将SOD活力提高28%。各剂量组的GSH-PX活性均有增高,其中15%剂量组(236.76酶活力单位)和30%剂量组(257.83酶活力单位)与对照组(225.26酶活力单位)相比具有显著性(P<0.05)。与对照组相比,各剂量组(5%、10%、15%、30%)血清MDA含量分 中文摘要 别降低了25.2%、32.1%、35.4%、38名%,血清LPO含t分别降低了4.8%、7.8%、 20%、49.6%,以15%和30%剂t组差别最具显著性(P0 .01)。 淋巴细胞DNA氧化损伤情况:与对照组相比,30%剂t组的自发性损伤及在 过氧化氢浓度为10腼。比、25腼。比时DNA损伤降低较明显(P0 .05),其余各 组则无差别(P0 .05)。过氧化氢浓度为5钩肚o比时10%、15%、30%剂t组DNA 损伤程度明显降低(P0 .01),其中30%剂t组损伤最轻(AU== 197.00),其余各组 分别为5%AU=269.08,1理场AU== 220.15、15%AU== 210.62,对照组最重AU== 282.15。 与阴性对照组比较,未摄入浓缩物的阳性对照组经Fenton体系作用后红细胞膜 MDA含量升高近3倍,SOD活性下降了41%,膜流动性下降45%,表明其受到氧 化损伤。而摄入浓缩物的剂量组经Fenton体系作用后红细胞膜MDA明显比损伤组 减少,各组MDA含量如下:对照组4.24lun。腼即mt、Fenton,s诱导的损伤组12.12 nmollmgProt、5%剂量组8.36~阮gProt、1。%剂量组8.13~肠gprot、15%剂童 组7.27 IUnol/m即rot、30%剂量组6.“nm。腼gProt,差别具有统计学意义.s0D 活性大大增高,其中30%剂量组s0D活性为270.69NUI mgprot,与损伤组 (158.49NUlmgprot)相比差异显著(P0.05),而与对照组(269.98NUlmgprot) 相比并无统计学差异。膜流动性也显著提高,而且15%和30%剂量组的膜流动性(P 值分别为0.219和0.228)基本恢复到阴性对照组水平(P值为0.221)。 2、免疫调节作用研究结果显示:各组淋巴细胞转化率分别为对照组0.016、5% 剂量组0.019、10%剂量组0.037、15%剂量组0.040、30%剂量组0.058,差异有统 计学意义。和对照组相比,各剂量组吞噬细胞吞噬活性增强,校正吞噬指数分别为 对照组3.48、5%剂量组4.35、10%剂量组4.49、15%剂量组5.30、30%剂量组5.56, 吞噬活性分别增加了20Ok、29%、52%、60%。血清中免疫球蛋白IgA、IgG、IgM 的含量也有明显的提高,以30%剂量组最为明显,可分别将IgA、IgG、IgM的含 量提高20%、34%、21%,差别具有显著统计学意义(P0 .01)。 结论:1、浓缩物可以降低细胞膜和血清等组织成分的M[DA、LPO等脂质过氧 化产物的生成,增强SOD、GSH一PX等抗氧化酶的活性,减少由过氧化氢引起的 DNA氧化损伤的程度。表明浓缩物对经自由基引发的生物膜脂质过氧化以及对过 氧化氢诱导的DNA氧化损伤均有良好的防护作用。 2、浓缩物可以增强淋巴细胞的转化率,增强吞噬细胞的吞噬活性,提高血清 中免疫球蛋白的含量,表明浓缩物对机体的细胞免疫和体液免疫均有良好的调节作 用,从而提高整个机体的免疫能力。
【学位授予单位】:青岛大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R151

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【引证文献】
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