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《青岛大学》 2002年
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全反式维甲酸对血管平滑肌细胞增生及Cyclin D_1、P27蛋白表达的影响

韩小宁  
【摘要】: 目的 观察全反式维甲酸对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)DNA合成、细胞增生、细胞周期素D,和细胞周期素依赖激酶抑制蛋白P27蛋白表达的影响,探讨全反式维甲酸对VSMC增生的作用及其可能的机制,为预防动脉粥样硬化、冠心病和经皮冠状动脉腔内成形术、支架植入术后再狭窄提供依据。 方法 分离Wistar大鼠胸主动脉中层平滑肌,采用酶消化法培养VSMC,传代并采用第4~8代细胞进行实验,以无血清培养基培养静止使细胞同步化后,分为三组:空白对照组(n=5),为同步化的细,胞;胎牛血清组(n=5),加入含20%胎牛血清的培养基刺激24h收集细胞,作为增生对照;全反式维甲酸组(n=5),同时加入含全反式维甲酸(2.5μmol·L~(-1))和20%胎牛血清的培养基,刺激24h后收集细胞。应用氚标记胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入率测定观察血管平滑肌细胞增生及DNA合成水平,通过western-blotting印迹和计算机图像分析方法观察全反式维甲酸对细胞周期素D_1和细胞周期素依赖激酶抑制蛋白P27蛋白表达水平的影响。 结果 ①胎牛血清组与空白对照组相比,~3H-TdR掺入率显著增加(11567.09±1974.67 vs 1742.68+615.73,P<0.001),血管平滑肌细胞DNA合成增加,细胞增生;全反式维甲酸组与胎牛血清组相比,~3H-TdR掺入率显著降低(3725.48±643.77 vs 11567.09±1974.67,P<0.01),血管平滑肌细胞DNA合成减少,细胞增生受抑制。②胎牛血清组与空白对照组相比,细胞周期素D_1蛋白表达明显增加(189.51±16.59 vs 108.35±7.71,P<0.01);全反式维甲 中文摘要 酸组与胎牛血清组相比,细胞周期素D,蛋白表达水平显著下降 (112.71土6.84 vs 189.52士16.59,P0.01)。③胎牛血清组 与空白对照组相比,P27蛋白表达显著下降(105.13土11.74 vs· 133.85士7.43,P0.01);全反式维甲酸组与胎牛血清组相比,P27 蛋白表达水平显著增加(148.98士10.45 VS 105.13土11.74,P 0 .01)。 结论①全反式维甲酸能减少血管平滑肌细胞DN人合成并抑制其 增生。②全反式维甲酸能使血管平滑肌细胞周期素D,蛋白表达减少. ③全反式维甲酸能增加血管平滑肌细胞P27蛋白表达.故推测全反式 维甲酸可能通过有效抑制或阻断血管平滑肌细胞增生,起到预防动脉粥 样硬化、冠心病和经皮冠状动脉腔内成形术、支架植入术后再狭窄的作 用.
【学位授予单位】:青岛大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R543

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