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《青岛大学》 2002年
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洛伐他汀对巨噬细胞基质金属蛋白酶-2mRNA及蛋白表达的影响

弭守玲  
【摘要】: 目的 探讨洛伐他汀对巨噬细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA及蛋白表达的影响及其除调脂外的抗动脉粥样硬化作用。 方法 ①在体外用含10%胎牛血清的RPMI1640培养液培养小鼠腹腔巨噬细胞,与不同浓度的洛伐他汀在37℃孵育。24h后用MTT法检测洛伐他汀对巨噬细胞的抑制作用。②应用原位杂交技术检测巨噬细胞内MMP-2mRNA的表达,图像分析系统检测MMP-2mRNA的积分光密度,通过积分光密度值判断不同浓度洛伐他汀对巨噬细胞MMP-2mRNA表达的影响。③应用免疫细胞化学技术检测巨噬细胞内MMP-2蛋白的表达,图像分析系统检测MMP-2蛋白的积分光密度,通过积分光密度值判断不同浓度洛伐他汀对巨噬细胞MMP-2蛋白表达的影响。④经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳后,Western Blot方法鉴定MMPs类型。⑤资料统计应用随机区组设计的方差分析、多均数间两两比较的q检验及直线相关分析。P<0.05,说明统计学上有差异;P<0.01,说明统计学上有显著差异。 结果 ①在细胞抑制实验中,当洛伐他汀浓度为0.01、0.1、1μmol/L时,细胞存活率平均>90%,对细胞几乎没有抑制作用;浓度为10μmol/L时,细胞存活率<90%,对细胞有明显的抑制作用。②原位杂交实验表明随着洛伐他汀浓度的升高,MMP-2 mRNA的表达逐渐降低。各组之间均有显著的统计学差异(P<0.01)。洛伐他汀浓度与MMP-2mRNA的积分光密度呈负相关(r=-0.774,P<0.01)。说明洛伐他汀可呈剂量依赖性抑制MMP-2 mR-NA的表达。③免疫细胞化学实验证实随着洛伐他汀浓度的升高,MMP-2蛋白的表达逐渐降低。各组之间均有显著的统计学差异(P<0.01)。洛伐他汀浓度与MMP-2蛋白的积分光密度呈负相关(r=-0.734,P<0.01)。说明洛伐他汀可呈剂量依赖性抑制MMP-2蛋白的表达。④Western Blot示对照组 中文摘要 在72KDa和62KDa处出现黑色蛋白质条带,分别是MMP一2的酶原型和活性 型;而洛伐他汀组只在72KDa处出现黑色蛋白质条带。 结论洛伐他汀可对巨噬细胞产生直接抑制作用,使其数量明显减少;同 时抑制巨噬细胞MMP一2 mRNA及蛋白的表达;还可能具有抑制酶原激活的 作用。以上均有利于动脉粥样硬化斑块的稳定。
【学位授予单位】:青岛大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R543.5

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