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甲酸盐对体外培养大鼠视网膜M(?)ller细胞生长影响的研究

张蕊石  
【摘要】:目的 探讨甲酸盐对视网膜Müller细胞的影响及其毒性作用的量效关系。方法 将10只新生大鼠视网膜神经层细胞进行原代及传代培养后,获得Müller细胞的第四代(P_4)均匀接种于一块96孔培养板,将其分成正常对照组,采用甲酸盐(5mM、10mM、20mM、30Mm、50mM、100mM和200mM)七种浓度作用组,通过MTT比色实验和乳酸脱氢酶(lactated dehydrogenase,LDH)释放量的检测及形态学观察,分析甲酸盐对大鼠视网膜Müller细胞的影响。结果 在组织学上,甲酸盐可使视网膜Müller细胞出现细胞肿胀,线粒体崩解。甲酸盐浓度分别为5mM、10mM作用24hr,OD值及LDH释放量与对照组相比差别无统计学意义(P>0.05),当甲酸盐≥20mM时,OD值及LDH释放量与对照组相比差别有统计学意义(P≤0.05),且随甲酸盐浓度的增加,OD值降低,LDH释放量增加。结论 1.甲酸盐孵育体外培养的新生大鼠视网膜Müller细胞24hr后,均在一定的浓度范围内引起视网膜Müller细胞的组织病理学改变:细胞水肿,空泡形成,线粒体肿胀、崩解。2.细胞色素氧化酶是线粒体电子传递链的最终构成部分,且是线粒体层的完整蛋白质复合体。此酶与氧生成水,到ATP合成的还原反应。甲酸盐抑制细胞色素氧化酶的活性,从而抑制细胞的能量代谢。3.甲酸盐对体外培养的视网膜Müller细胞具有毒性作用,其毒性作用呈剂量依赖性。


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