收藏本站
《青岛大学》 2005年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

EBV即刻早期基因BZLF1腺病毒载体的构建和表达

孙坚萍  
【摘要】:目的 构建EBV即刻早期基因BZLF1的非复制型重组腺病毒载体,293细胞包装腺病毒,并检测BZLF1在293细胞中的表达,为进一步研究腺病毒介导BZLF1进行EBV相关肿瘤的基因治疗奠定基础。 方法 RT-PCR扩增EBV BZLF1基因片段,经双酶切后亚克隆到腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV上,用TSS两步法与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转染大肠杆菌BJ5183,经细菌内同源重组产生携带BZLF1基因的重组腺病毒载体pAd-BZ,脂质体法转染人胚肾293细胞,包装产生重组腺病毒vAd-BZ。采用RT-PCR和Western blotting检测BZLF1基因在293细胞中的表达。 结果 通过PCR、序列测定、双酶切等技术鉴定BZLF1基因已正确插入穿梭质粒中,并与病毒骨架质粒pAdEasy-1重组,成功构建了表达BZLF1基因的重组腺病毒。荧光显微镜观察到绿色荧光,证实在293细胞中包装出vAd-BZ,PCR和Western结果表明转染pAd-BZ的293细胞中有BZLF1基因的表达。 结论 成功构建了表达EBV BZLF1重组腺病毒vAd-BZ,为进一步探讨BZLF1基因表达诱导EBV阳性肿瘤细胞中潜伏感染状态病毒进入裂解期,进而杀伤EBV阳性肿瘤细胞奠定了实验基础。
【学位授予单位】:青岛大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R346

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 王海,曹亚;EBV BZLF1表达产物Z蛋白的研究进展[J];癌症;2003年10期
2 谢芳艺,姚堃,王胜军,彭光勇,季晓辉;人外周血单核细胞体外诱导树突状细胞及鉴定[J];南京医科大学学报;2001年02期
3 姚堃,谢芳艺,许继军,彭光勇;Epstein-Barr病毒潜伏膜蛋白2A重组痘苗病毒转染DC及特异性CTL的体外诱导[J];细胞与分子免疫学杂志;2001年05期
4 施明;王福生;高兰兴;;腺病毒载体的研究进展[J];世界华人消化杂志;2000年11期
5 曾毅;鼻咽癌病因研究[J];中国肿瘤;1996年05期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 敬尚林;朱远明;曾寿开;江静;房荣妹;尹志英;;粤北瑶族地区鼻咽癌危险因素病例对照研究[J];当代医学;2010年36期
2 曹云新,曲萍,杨安钢;人脾脏树突状细胞的培养及鉴定[J];第四军医大学学报;2005年10期
3 潘巍巍;成海恩;赖国旗;易发平;马永平;宋方洲;;人乳头瘤病毒E6E7基因重组腺病毒的构建及鉴定[J];第四军医大学学报;2006年24期
4 齐桓;;以AdMax载体系统构建和制备肾癌相关抗原G250基因重组腺病毒表达载体[J];南方医科大学学报;2008年09期
5 魏世鸿;罗宏涛;王小虎;刘楠;;血清EBV抗体检测联合~(99m)TC-MIBI显像和MRI在诊断鼻咽癌放射治疗后复发中的价值[J];甘肃医药;2012年05期
6 邝国乾,谢成熹,黄光武,毛荣清,刘名光,余奇松;新城疫病毒疫苗对自然人群EB病毒VCA-IgA抗体转阴作用初步报告[J];广西医科大学学报;1998年04期
7 邝国乾,刘名光;鼻咽癌一级预防的研究进展[J];广西医科大学学报;1999年02期
8 黄志碧,姜岳明,方益敏;广西鼻咽癌危险因素的流行病学研究[J];工业卫生与职业病;2002年04期
9 邓洪,刘航;人群鼻咽癌血清学筛查[J];广西医学;1998年06期
10 任南琪;张晓丹;周广红;陈少军;;硫丹致生精细胞凋亡及其机制研究[J];环境科学;2008年02期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐爱晶;IGF-1和IL-10基因转导对NOD鼠1型糖尿病的防治作用及机制探讨[D];青岛大学;2011年
2 万文辉;心肌肌钙蛋白基因突变与肥厚型心肌病发病研究[D];南京医科大学;2003年
3 信栓力;几丁糖介导eNOS基因转移预防兔颈动脉球囊损伤后再狭窄的初步研究[D];第二军医大学;2003年
4 宁守斌;内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因转移治疗实验性贲门失弛缓症[D];第二军医大学;2003年
5 陆巍;病毒肿瘤靶向治疗应用性研究[D];浙江大学;2004年
6 姚瑜;大骨瓣减压术、VEGF基因治疗及联合治疗恶性大脑中动脉梗死[D];浙江大学;2005年
7 王飞;人乳头瘤病毒11型早期蛋白E7重组腺病毒载体的构建及转染树突状细胞的研究[D];南京医科大学;2005年
8 于林君;磷酸酶与张力蛋白同源物PTEN过度表达负性调控血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大及其机制[D];第三军医大学;2005年
9 崔云峰;胆固醇代谢关键基因在胆固醇结石形成中的作用机制研究[D];天津医科大学;2006年
10 徐洁洁;EB病毒潜伏膜蛋白2A转染树突状细胞诱导特异性CTL杀伤鼻咽癌的体外、体内研究[D];南京医科大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 徐从伦;腺病毒介导的shRNA沉默大鼠IL-1β基因的实验研究[D];电子科技大学;2011年
2 刘鑫;腺病毒载体介导的RNAi抑制肺间质纤维化大鼠FasL基因表达的研究[D];郑州大学;2011年
3 周建民;人SCL基因重组腺病毒表达载体的构建[D];石河子大学;2011年
4 乔卫军;pAdtrack-cmv-rHSG重组穿梭质粒载体的构建、序列分析及rHSG生物信息分析[D];宁夏医科大学;2010年
5 冼伟均;~(18)F-FDGPET-CT早期评估鼻咽癌放疗疗效及与Ki67表达相关性分析的动物和临床研究[D];广州医学院;2010年
6 刘栋;腺病毒介导白细胞介素10基因对小鼠1型糖尿病早期的治疗作用[D];青岛大学;2011年
7 段梦;去泛素化酶UCH-L1在血管平滑肌细胞迁移中的作用及其分子机制的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年
8 张明;荧光定量PCR检测人鼻咽部脱落细胞EBV-DNA的研究[D];南京医科大学;2002年
9 里晓红;EB病毒与鼻咽癌之间关系的研究[D];安徽医科大学;2002年
10 李志全;人NT3、BDNF基因真核表达载体和四环素可诱导重组腺病毒载体的构建及鉴定[D];第四军医大学;2004年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 王月丹,谢玮,邱玉华,顾宗江,张学光;细胞因子诱导不同来源的贴壁细胞分化为树突状细胞的研究[J];上海免疫学杂志;2000年03期
2 陈洁平,林晨,徐采朴,张雪艳,付明,邓友平,隗月,吴旻;腺病毒介导RA538及反义c-myc在不同细胞系中作用及其机制[J];世界华人消化杂志;2000年03期
3 陈洁平,林晨,徐采朴,张雪艳,付明,邓友平,隗月;重组反义c-myc腺病毒对人胃癌细胞的体内及体外分子治疗[J];世界华人消化杂志;1999年06期
4 朱学军,曹雪涛,于益芝,雷虹,万涛,陈国友,马施华;人外周血树突状细胞的体外扩增及鉴定[J];中国肿瘤生物治疗杂志;1997年03期
5 朱学军,曹雪涛,于益芝,陈国友,万涛,马施华,唐华,章卫平;人外周血树突状细胞的体外扩增及鉴定[J];中国肿瘤生物治疗杂志;1997年04期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王耿,何国祥,冉擘力,张萍,景涛,陈渝;腺病毒介导gax基因转染对血管平滑肌细胞迁移的影响[J];第三军医大学学报;2005年14期
2 孙运祥,任丽君,郭玉嵩,田长富;人IL-2复制缺陷型重组腺病毒的构建和鉴定[J];实用肿瘤学杂志;2005年04期
3 陈静韵,丁焕文,王捷,杨汝德;用于骨移植的hCbfa1重组腺病毒载体的构建[J];华南理工大学学报(自然科学版);2005年08期
4 廖洪映;熊利华;陈波;张惠忠;华平;殷香保;祝曙光;傅玉如;;重组bcl-xL腺病毒对心肌细胞凋亡的影响[J];中山大学学报(医学科学版);2005年04期
5 吴红兵;田聆;文艳君;刘玉梅;阚兵;杜小波;徐健蓉;魏于全;;表达人CD40配体的重组腺病毒载体的构建[J];华西口腔医学杂志;2005年06期
6 吴燕峰;王鹏;唐勇;黄霖;杨睿;史玉朋;贺晓玉;沈慧勇;;复制缺陷型重组腺病毒Adeno-X-脑源性神经营养因子的构建与鉴定[J];中华实验外科杂志;2006年05期
7 张毅;杨占宇;朱瑾;杨世忠;李晓武;董家鸿;;连环蛋白P120基因重组腺病毒载体的构建及表达[J];第三军医大学学报;2006年17期
8 吕金星;严春寅;侯建全;浦金贤;平季根;温端改;;人血红素氧合酶-1重组腺病毒的构建与鉴定[J];江苏医药;2006年11期
9 邵紫韫;刘志锋;彭毅;徐佳;邓鹏;姜勇;;IP-10重组腺病毒载体的构建及其病毒制备[J];南方医科大学学报;2006年11期
10 杨静悦;曹大勇;刘文超;贾军;斯小明;腾增辉;杨文涛;;腺病毒介导的HBsAg基因修饰树突状细胞瘤苗的制备[J];现代肿瘤医学;2006年12期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王晋慧;姚明忠;顾锦法;孙兰英;郎明非;刘菁;刘新垣;;肿瘤靶向性腺病毒载体的构建[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
2 刘旭;田长富;;癌基因治疗中的腺病毒载体的开发和应用(综述Ⅱ)[A];庆祝黑龙江省免疫学会成立十周年(1993—2003)论文集[C];2003年
3 凌昌全;李绍祥;张晨;张亚妮;;携蜂毒素基因腺病毒载体的构建及体外抑瘤实验研究[A];第九届全国中西医结合肿瘤学术研讨会论文集[C];2002年
4 马立新;马琪;徐松;;新型、简捷、有效的方法构建基于腺病毒载体系统的cDNA表达文库[A];中国蛋白质组学首届学术大会论文摘要集[C];2003年
5 王桂兰;鲁继荣;成焕吉;马青山;张云峰;;高滴度含有目的基因IL-4RA的逆转录病毒的包装和浓缩[A];中华医学会第十四次全国儿科学术会议论文汇编[C];2006年
6 吴运谱;张晓华;乔传玲;;腺病毒载体流感疫苗研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
7 刘金娟;马翔;;小鼠HSP27基因腺病毒表达载体的构建与鉴定[A];第四届长三角妇产科学术论坛暨浙江省2009年妇产科学术年会论文汇编[C];2009年
8 刘潇聪;陈耀凯;;腺病毒体外介导CTLA4-Ig在L02细胞中的表达及其生物学活性[A];全国第3届中西医结合传染病学术会议暨中国中西医结合学会传染病专业委员会第2届委员会议论文汇编[C];2010年
9 张春燕;李方和;龚劲松;陈妍;;抗腺病毒载体单克隆抗体的制备及其初步鉴定[A];中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要[C];2006年
10 张子阳;袁春玉;杨亦彬;;人促血管生成素1腺病毒载体的构建[A];贵州省医学会肾脏病学分会2008年学术年会论文汇编[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 李天舒 通讯员 朱丹萍;一研究证实腺病毒载体依然是安全的[N];健康报;2011年
2 本报记者 刘松柏;基因治疗的探路者[N];经济日报;2010年
3 火言;疫苗研发全球赛跑[N];中国质量报;2003年
4 万同己;P53基因与肿瘤基因治疗[N];中国医药报;2004年
5 加闻;加拿大非典疫苗研究获新进展[N];医药经济报;2003年
6 翁维良:中国中医研究院首席研究员,中国中西医结合学会活血化瘀学会副主任委员,内科主任医师,博士生导师;心血管病基因疗法[N];中国中医药报;2000年
7 麦迪信;糖尿病基因疗法初见成效[N];医药经济报;2003年
8 王俊鸣;接种疫苗的猴子产生免疫反应[N];科技日报;2003年
9 记者 王雪飞;支架+转基因可减少心脏介入术后血管再狭窄[N];健康报;2000年
10 记者 毛磊;肌营养不良基因法可疗[N];新华每日电讯;2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 扈江伟;腺病毒介导hTRX修饰的间充质干细胞在小鼠急性放射损伤中的修复作用研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2012年
2 张燕玲;脑源性神经生长因子前体ProBDNF在大鼠后足切割痛的作用及可能机制研究[D];中南大学;2012年
3 吴成君;Ad35腺病毒载体构建及病毒蛋白免疫原性研究[D];北京协和医学院;2009年
4 于彬;六邻体嵌合型重组5型腺病毒载体逃避预存免疫的研究[D];吉林大学;2012年
5 席启林;维生素D受体调控尿钙重吸收的分子机制研究[D];华中科技大学;2010年
6 徐尤年;血管生成素1腺病毒载体的构建及其对内毒素性肺损伤炎症消退的影响[D];华中科技大学;2010年
7 张继业;对BMP-9诱导成骨、成脂肪作用的调节研究[D];重庆医科大学;2013年
8 陈剑;BMP2和BMP7基因共转染兔骨髓间充质干细胞构建组织工程骨的实验研究[D];第二军医大学;2011年
9 王鹏;表达His-tag-ICP47融合基因腺病毒载体的构建及其免疫活性的研究[D];郑州大学;2011年
10 刁彦鹏;腺病毒载体介导转染CD基因抑制大鼠移植静脉内膜增生及其机制的实验研究[D];中国医科大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈媛媛;hIL-12腺病毒载体的构建及在人hBMSCs中的表达[D];山西医科大学;2010年
2 宋默;携带p53基因和Flt3L配体基因的腺病毒载体的构建及鉴定[D];大连医科大学;2010年
3 宋付凯;高表达hRAMP1基因腺病毒载体的构建及其在兔MSCs中表达的实验研究[D];遵义医学院;2010年
4 刘海斌;腺病毒介导的mda-7/IL-24基因对人喉癌细胞Hep-2的凋亡作用[D];第二军医大学;2010年
5 魏菁;腺病毒介导ChM-I基因抑制BMSCs体内构建的软骨血管化的实验研究[D];西北大学;2010年
6 刘海平;非增殖性腺病毒携带全长抗体Cetuximab的肿瘤基因治疗的研究[D];浙江理工大学;2010年
7 苏秀云;应用AdEasy腺病毒载体系统构建携带人骨形成蛋白2基因的重组腺病毒[D];第一军医大学;2005年
8 毛亮;选择增殖型腺病毒ZD55携带自杀基因Dm-dNK(果蝇脱氧核糖核苷酸激酶)治疗大肠癌的研究[D];中国医科大学;2010年
9 王晓刚;人白细胞介素23基因克隆和携带EGFP腺病毒载体的构建与鉴定[D];大连医科大学;2007年
10 陈童;构建降钙素基因相关肽的穿梭载体[D];浙江大学;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026