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Ghrelin在糖尿病小鼠摄食调节与能量平衡中的作用

董静  
【摘要】:Ghrelin由胃底部粘膜泌酸腺X/A细胞合成并分泌,其参与机体的能量代谢平衡,是启动进食并促进食欲的重要调节因子。有研究发现糖尿病大鼠血浆Ghrelin水平明显升高,但对于Ghrelin在摄食调控中的作用机制和在糖尿病多食、消瘦中的病理生理作用尚未完全明了。离体实验结果表明,在没有受体激动剂存在的情况下,Ghrelin受体仍保持其50%的基本活性(constitutive activity)。Ghrelin受体既可被受体激动剂,也可被至今尚未阐明的内源性受体反激动剂所调节。[D-Arg~1,D-phe~5,D-Trp~(7.9),Leu~(11)]-P-物质(Substance P,PS)是Ghrelin受体的高效、重要的反激动剂。体外实验证明,PS可降低Ghrelin受体基本活性,抑制Ghrelin细胞信号转导,产生较弱的拮抗剂效应。 目的:1.探讨内源性Ghrelin对糖尿病大鼠摄食和能量平衡的调节及其机制。2.研究Ghrelin和GHRP-6对糖尿病小鼠胃肠动力学改变的影响及机制。3.探讨Ghrelin对下丘脑参与摄食及能量代谢调节的中枢机制。 方法: 1.采用腹腔注射链脲霉素(STZ)诱导产生STZ-糖尿病小鼠模型。经腹腔注射生理盐水或Ghrelin受体拮抗剂(D-Lys~3-GHRP-6),连续观察正常小鼠(NMRI小鼠)和STZ-糖尿病小鼠5天的摄食、体重和血糖的变化。 2.采用腹腔注射STZ方法,诱导Ghrelin基因敲除小鼠(Ghrelin~(-/-))形成Ghrelin~(-/-)STZ-糖尿病小鼠模型,比较Ghrelin~(+/+)STZ-糖尿病小鼠和Ghrelin~(-/-)STZ-糖尿病小鼠在摄食和能量代谢方面的改变。 3.采用放射免疫分析法(RIA),观察Ghrelin受体阻断剂D-Lys~3-GHRP-6对正常和STZ-糖尿病小鼠血浆Ghrelin及胰高血糖素水平的影响。 4.采用免疫荧光组化染色方法,观察D-Lys~3-GHRP-6对STZ-糖尿病小鼠下丘脑NPY和α-MSH表达的影响。 5.采用~(14)C辛酸呼吸实验法,观察STZ-糖尿病小鼠胃肠动力学的改变及受体活性机制。 6.采用免疫组化染色方法,观察GHRP-6对下丘脑c-Fos表达的影响及机制。


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