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《青岛大学》 2008年
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硒对体外培养人甲状腺细胞氧化损伤、凋亡及超微结构的影响

张方华  
【摘要】: 目的研究硒对H_2O_2诱导的体外培养人甲状腺细胞氧化损伤、凋亡及细胞超微结构的影响。 方法取良性甲状腺腺瘤手术中的腺瘤旁正常甲状腺组织进行细胞培养。加硒(10~(-7)mol/L)或不加硒后加入不同浓度H_2O_2(0-800μmol/L)刺激单层培养的甲状腺细胞,MTT法检测细胞存活率;流式细胞术(FCM)检测各组甲状腺细胞凋亡率;收集不同浓度组细胞,测定细胞膜GSH-Px活性和MDA含量变化;透射电子显微镜下观察各组甲状腺细胞超微结构的改变。 结果经过H_2O_2作用24小时的甲状腺细胞,其存活率下降、细胞凋亡率升高,细胞GSH-Px活力下降、MDA含量升高,在100—800μmol/L浓度范围间表现为浓度-效应关系。电镜下单纯加硒组细胞超微结构与正常对照组相似。100-200μmol/LH_2O_2处理组甲状腺细胞呈损伤型改变。至400-800μmol/L H_2O_2处理组细胞出现凋亡甚至死亡。预先加入10~(-7)mol/L硒干预后可增加细胞存活率,降低细胞凋亡率,各组细胞较相应单纯H_2O_2处理组细胞的GSH-Px活力升高、MDA含量下降。硒预干预后各组细胞均可见亚细胞结构损伤明显减轻。 结论H_2O_2可抑制甲状腺细胞生长,引起甲状腺细胞氧化损伤甚至细胞凋亡,硒对H_2O_2引起的甲状腺细胞氧化损伤和凋亡可能有拮抗作用。硒的这种作用可能是通过增加细胞GSH-Px活力和降低MDA含量来拮抗氧化应激途径实现的。
【关键词】: 甲状腺 氧化损伤 凋亡 超微结构
【学位授予单位】:青岛大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R581
【目录】:
  • 摘要2-3
  • Abstract3-5
  • 引言5-6
  • 第一章 材料与方法6-11
  • 1.1 研究对象6
  • 1.2 实验试剂6-7
  • 1.3 实验仪器7-8
  • 1.4 实验方法8-11
  • 第二章 结果11-19
  • 2.1 普通光镜下甲状腺细胞形态11-12
  • 2.2 细胞鉴定12
  • 2.3 硒与H_2O_2对甲状腺细胞存活率的影响12-13
  • 2.4 硒与H_2O_2对甲状腺细胞凋亡率的影响13-14
  • 2.5 硒与H_2O_2对甲状腺细胞GSH-P_X的影响14-15
  • 2.6 硒与H_2O_2对甲状腺细胞MDA的影响15-16
  • 2.7 硒与H_2O_2对甲状腺细胞超微结构的影响16-19
  • 第三章 讨论19-23
  • 结论23-24
  • 参考文献24-26
  • 综述26-40
  • 攻读学位期间的研究成果40-41
  • 致谢41-42

【参考文献】
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