胰岛素干预对体外高糖环境大鼠肝细胞白蛋白mRNA表达影响的研究

【摘要】： 目的：观察在高浓度葡萄糖(11.1mmol/L)环境下,不同的胰岛素剂量对大鼠肝实质细胞与Kupffer细胞联合培养体系对大鼠肝细胞白蛋白基因表达的影响,并对相关机制进行探讨。方法：利用原位二步Ⅳ型胶原灌注法,Percoll液密度梯度离心法分离Wistar大鼠肝实质细胞与Kupffer细胞；体外将肝实质细胞与Kupffer细胞按6：1比例共同培养,用11.1mmol/L葡萄糖处理该联合培养体系,然后再用不同剂量的胰岛素[胰岛素(IU)：葡萄糖(g)=2：1,G1组；1：1,G2组；1：2,G3组；1：4,G4组]处理细胞联合培养体系,分别于处理后的4h、24h留取细胞培养上清液,检测白蛋白浓度及IL-1、IL-6、TNF-α含量,提取肝细胞RNA，使用逆转录聚合酶链法(RT-PCR)检测白蛋白mRNA表达。结果：高浓度葡萄糖(11.1mmol/L)环境下,采用不同剂量胰岛素进行处理后的4h,24h细胞联合培养体系的细胞培养上清液IL-1、IL-6、TNF-α水平随胰岛素剂量降低而升高,白蛋白浓度及白蛋白mRNA表达随胰岛素剂量降低而降低。结论：大鼠Kupffer细胞和肝实质细胞在适宜的培养条件下可进行共同培养,Kupffer细胞和肝细胞可以保持良好的分泌功能,并且在高糖浓度下(11.1mmol/L),胰岛素可能通过抑制Kupffer细胞释放细胞因子IL-1、IL-6、TNF-α,发挥抗炎作用,并且促进大鼠肝细胞白蛋白mRNA的表达和白蛋白的合成。