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《河北医科大学》 2011年
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原发性乳腺癌患者循环肿瘤细胞及肿瘤干细胞的检测及临床意义

王蒙  
【摘要】:目的:本试验通过对原发性乳腺癌患者外周血中循环肿瘤细胞及肿瘤干细胞的检测,探讨循环肿瘤细胞及肿瘤干细胞与乳腺癌临床、病理特征的关系。 方法: 1采集44例初治原发性乳腺癌患者10 ml外周血,制备外周血单个核细胞悬液(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)。另取15例正常女性志愿者10 ml外周血作为对照组。 2外周血单个核细胞(PBMC)标记细胞角蛋白(cytokeratin, CK)19单克隆抗体,以CK19作为外周血循环肿瘤细胞的标记物。 3免疫磁性激活细胞分选(Magnetic-activated cell sorting,MACS)阳性分选(positive selection strategy)获得CK19阳性循环肿瘤细胞(CTC)。 4将提取的阳性细胞进行免疫荧光抗体双染色,标记鼠抗人单克隆抗体CD44、鼠抗人单克隆抗体CD24,以CD44+/CD24-/low作为肿瘤干细胞的标志。 5免疫荧光显微镜检测表达CD44+/CD24-/low的循环肿瘤细胞(CTC)含量。 6所得结果用SPSS 13.0软件进行统计分析。 结果: 1 15例正常女性志愿者PBMC中未检测到CK19阳性细胞。44例原发性乳腺癌患者PBMC检测结果:33例(75.00%)患者PBMC中检测到CK19阳性细胞。两组通过统计检验具有统计学意义( P 0.05 )。 2 44例原发性乳腺癌患者按临床分期分为3组:Ⅰ期患者12例,5例外周血中检测到CK19阳性细胞(41.67%);Ⅱ期患者18例,15例外周血中检测到CK19阳性细胞(83.33%);Ⅲ期患者14例,13例外周血中检测到CK19阳性细胞(92.86%)。Х~2检验具有统计学意义(P 0.05)。 3按淋巴结转移情况分为两组:N0 24例,15例检测到CK19阳性细胞(62.50%);N1-3 20例,18例检测到CK19阳性细胞(90.00%)。Х~2检验具有统计学意义(P 0.05)。 4 33例CK19阳性样本中21例(63.63%)检测到CD44~+/CD24~(-/low)细胞。按临床分期分为3组:Ⅰ期患者2例检测到CD44~+/CD24~(-/low)细胞( 2/5,40.00% );Ⅱ期患者10例检测到CD44~+/CD24~(-/low)细胞( 10/15,66.67% );Ⅲ期患者9例检测到CD44~+/CD24~(-/low)细胞(9/13,69.23%)。 5 ER阳性样本33例,24例检测到CK19阳性细胞(72.73%),15例检测到CD44~+/CD24~(-/low)细胞(15/24,62.50%);ER阴性样本11例,9例检测到CK19阳性细胞(81.82%),6例检测到CD44~+/CD24~(-/low)细胞(6/9,66.67%)。 6 C-erbB2阳性样本6例,4例检测到CK19阳性细胞(66.67%),2例检测到CD44~+/CD24~(-/low)细胞(2/4,50.00%);C-erbB2阴性样本24例,16例检测到CK19阳性细胞(66.67%),11例检测到CD44~+/CD24~(-/low)细胞(11/16,68.75%)。 7可见脉管瘤栓样本13例,9例检测到CK19阳性细胞(69.23%),8例检测到CD44~+/CD24~(-/low)细胞(8/9,88.89%);未见脉管瘤栓样本31例,24例检测到CK19阳性细胞(77.42%),13例检测到CD44~+/CD24~(-/low)细胞(13/24,54.17%)。 8根据分子亚型,将样本分为三型:三阴乳腺癌(ER、PR阴性,C-erbB2经FISH法检测阴性)、ER阳性(ER和/或PR阳性)、C-erbB2阳性(ER、PR阴性,C-erbB2经FISH法检测阳性)。三阴样本5例,5例检测到CK19阳性细胞(100.00%),4例检测到CD44~+/CD24~(-/low)细胞(4/5,80.00%);ER阳性样本19例,11例检测到CK19阳性细胞(57.89%),7例检测到CD44~+/CD24~(-/low)细胞(7/11,63.64%);C-erbB2阳性样本4例,3例检测到CK19阳性细胞(75.00%),2例检测到CD44~+/CD24~(-/low)细胞(2/3,66.67 %)。 结论: 1原发性乳腺癌患者外周血中可检测到循环肿瘤细胞(CTC)及肿瘤干细胞(TSC)。 2循环肿瘤细胞的阳性率与临床分期、淋巴结转移密切相关,具有统计学差异。 3肿瘤干细胞与临床分期关系密切,临床分期越晚,肿瘤干细胞阳性率越高。 4循环肿瘤细胞与肿瘤干细胞的阳性率与ER、PR、C-erbB2、脉管瘤栓、分子分型等关系密切。
【学位授予单位】:河北医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R737.9

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