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《河北医科大学》 2011年
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KLF5在肾细胞癌中的表达及意义

石崇军  
【摘要】:目的:肾癌是泌尿外科常见的恶性肿瘤,约占全身恶性肿瘤的3% ,在我国泌尿系肿瘤中发病率仅次于膀胱癌,位居第二,且发病率呈逐年上升趋势,肾癌的转移和进展是患者死亡主要原因,因此明确肾癌转移和进展相关机制对于提高治疗效果,提高患者生存率十分重要。虽然对肾癌进行了各方面广泛研究,但其发生、发展的生物学机制目前尚不十分明确。Krüppel样因子-5(krüppel-like factor,IKLF/KLF5)是一类含有锌指结构的转录因子家族中的一员,主要参与调节细胞增殖和分化过程,其在肾癌组织中的表达,尤其是与肾癌的发生、发展关系尚未见报道。本研究拟探讨KLF5在肾癌组织中的表达及其临床意义。 方法: 组织标本来源:收集2010年3月~2010年10月河北医科大学第二医院泌尿外科住院患者手术切除的51例肾癌组织及20例癌旁组织(距瘤体边缘5cm以外)。其中男31例,女20例,年龄23--81岁,平均年龄57.3岁。全部病例术前均未经任何放、化疗。标本均经10%甲醛溶液固定,石蜡包埋,4μm厚连续切片。病理组织学分型:透明细胞癌41例,乳头状细胞癌6例,嫌色细胞癌2例,其他2例。 1应用免疫组织化学SP法(两步法)从蛋白水平检测51例肾细胞癌和20例正常肾组织KLF5基因的表达。统计染色阳性率数值及比例,制成表格,填充数据,采用SPSS13.1统计软件,KLF5在肾癌组织和癌旁正常组织的阳性表达率与临床病理参数之间的比较采用X2检验统计实验结果。 2 Western blotting分析:将正常及肾癌组织于冰浴下匀浆,离心分离上清,取上清液进行蛋白定量,后取蛋白提取液40μg,按比例与5×SDS上样缓冲液混匀,煮沸,上样,进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。半干转膜法转移至PVDF膜上。将印迹膜置于封闭液中封闭,随后与相应的一抗及二抗反应,最后用化学发光法检测抗原抗体结合区带。用数码成像分析系统软件对结果进行定量分析。 结果: 1免疫组织化学染色结果显示: KLF5在肾癌组织和癌旁正常组织中均有表达。在癌组织中KLF5的表达大多呈弥漫性、失去极性,染色程度增高,且多数位于胞膜、胞浆中表达,而癌旁正常组织均仅在远曲小管及集合管细胞之胞膜、胞浆表达,染色强度中等,且呈顶极分布。KLF5在肾癌及癌旁正常肾组织中的阳性表达率有显著性差异(P=0000),在肾癌中的表达高于正常组织。KLF5的表达与组织学类型无相关关系(P0.05),与肾癌分级之间无相关关系(P0.05),与临床分期成正相关(P0.05),在转移组织中的表达高于未转移组织,具有统计学意义(P0.05)。 2 Western blotting分析表明 在20例配对的肾癌及癌旁组织中,Western blotting区带定量分析表明,所检测的肾癌标本中,KLF5的蛋白表达水平明显高于癌旁正常组织。具体表达结果:7例癌旁组织和全部癌组织可见明显的KLF5表达,13例癌旁组织未见表达,癌组织中KLF5的表达比配对的癌旁组织明显强,说明KLF5在肾癌的发生、发展过程中有被激活的可能。KLF5在肿瘤组织中蛋白水平的表达明显高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P0.05)。 结论: 1 KLF5在肾癌组织中的表达高于癌旁正常组织。 2 KLF5在肾癌组织中的表达与组织学类型无相关性。 3 KLF5在肾癌组织中的表达与Fuhrman分级无相关性。 4 KLF5在肾癌组织中的表达与Robson法临床分期及转移呈正相关。 5 KLF5蛋白高表达可能是肾癌发生、进展和转移的重要生物学标志,检测KLF5的表达对于评估肾癌的转移、预后有重要意义。
【学位授予单位】:河北医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R737.11

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