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应用PPO基因诊断骨转移性腺癌的初步临床研究

华长城  
【摘要】:目的:通过对多种细胞遗传学异常现象的研究显示,l号染色体和/或l号染色体末端lp36区存在着杂合性缺失和染色体获得的现象,这些结果表明在此区可能存在重要的抑癌基因或癌基因。我们在完成人类1p35-1p36的基因图谱描绘之后,再利用克隆筛选技术,在1p36区克隆产生了一个新的癌基因,编号为KIA0090,我们把该基因命名为PPO(Phosphorylation and Proliferation Oncogene)。我们研究发现,该基因在人类多种癌组织中都有相应的过表达,经过基因重组后,在细胞水平和活体水平证实了与细胞的增殖和磷酸化有关。通过对大量肿瘤组织的免疫组化筛选研究,发现PPO基因在间叶组织来源的肿瘤中不表达,在上皮组织来源的肿瘤中有过表达,关系密切。我们证实了PPO基因与腺癌有密切相关性,并制作了PPO基因的单克隆抗体,又进一步证实了PPO抗体是一种特异性抗体,现在我们提取出腺癌骨转移患者的淋巴细胞,用PPO抗体通过Western blotting法验证出与腺癌相关的PPO基因产物,证实了腺癌骨转移患者的血液中存在PPO基因产物,利用某种方法从血液中检测到这种产物及存在的量,就能在临床上早期的诊断腺癌及其转移,从而为腺癌的临床诊断提供有力支持,以进一步指导临床治疗。 方法:标本均取自河北医科大学第三医院经病理证实为腺癌骨转移的患者。标本收集后提取淋巴细胞,然后用Western blotting等方法制检测。标本包含甲状腺癌骨转移、肺腺癌骨转移、乳腺癌骨转移、肝癌骨转移、前列腺癌骨转移等多种肿瘤标本。每个研究对象都进行淋巴细胞的提取、Western blotting分析。 结果:通过以往的研究我们知道PPO基因在腺癌中都有明显过表达;PPO基因的产物与腺癌的密切相关性。我们用Western blotting证实了这种结果,即腺癌骨转移患者的血液中可检测到PPO基因的产物,PPO基因的产物在腺癌中起着至关重要的作用。 结论:我们提取出肺腺癌骨转移和肝癌骨转移患者的淋巴细胞,用PPO抗体通过Western blotting法检测出了PPO基因的蛋白产物,证实了肺腺癌和肝癌骨转移患者的血液中存在PPO基因的蛋白产物,为下一步制作PPO基因的血液诊断试剂盒,为临床早期诊断腺癌打下了坚实的基础。


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