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《河北医科大学》 2011年
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潜阳通络方对肝阳上亢证自发性高血压大鼠左室肥厚的作用及机制

王洪博  
【摘要】:目的:高血压病左室肥厚是由于长期压力负荷增高,儿茶酚胺、血管紧张素Ⅱ等生长因子刺激心肌细胞肥大和间质纤维化而发病的。它是高血压病的并发症之一,是猝死、冠心病和充血性心力衰竭独立的、主要的危险因素。目前尚无有效的治疗方法阻止左室肥厚的发生。因此,发挥中医药优势,寻找新的治疗途径有效地减缓及拮抗心肌间质纤维化,逆转左室肥厚,对改善高血压病的预后、提高生存率具有重要意义。本研究基于辨证论治思想,采用病证合一的动物模型,以自发性高血压大鼠加灌附子汤法复制高血压病左室肥厚肝阳上亢证大鼠模型,再用潜阳通络方通过动物实验,观察该方对血液和心脏组织中的儿茶酚胺含量、血管紧张素Ⅱ受体分子表达、内皮素受体蛋白表达等指标的影响,探讨其治病的作用机制,从而进一步揭示肝阳上亢证高血压病左室肥厚的证候本质,为该病的治疗提供实验依据。 方法:32只14周龄自发性高血压大鼠(SHR),雄性,体重280~320g,血压160~190mmHg,随即分为模型组(model group,M)、潜阳通络方低剂量组(low-dose Qianangtongluofang,D)、潜阳通络方高剂量组(high-dose Qianyangtongluofang,G)、和卡托普利对照组(captopril control group,C)。另购8只14周龄雄性wistar大鼠8只,体重280~320g为空白对照组(normal control group,N)。以上各组均适应性饲养一周,开始进入实验观察。大鼠模型参照相关文献[1],选用自发性高血压大鼠加灌附子汤的方法造模,灌胃剂量为10ml·kg~(-1)·d~(-1),相当生药剂量2g·kg~(-1)·d~(-1),共四周,同时观察大鼠基本情况变化:毛色、易激惹程度、饮水量、旋转时间等。当提示造模成功后,停止灌服附子汤,空白组和模型组改灌等量蒸馏水,卡托普利组灌服卡托普利混悬液,生药剂量8mg·kg~(-1)·d~(-1),潜阳通络方低剂量组灌服中药浓缩液,生药剂量24.6g·kg~(-1)·d~(-1),潜阳通络方高剂量组生药剂量49.2g·kg~(-1)·d~(-1),以上各组均由凉白开水和普通饲料饲养,共6周。血压测量在造模前、造模后以及实验结束时测量三次,每次测量在周六周日两天进行,每只大鼠测量三次取平均值,作为其在该实验点血压值。实验结束后,大鼠断头取血,测量所需指标,左室重量用分析天平称量,心肌细胞形态观察采用HE染色法、儿茶酚胺采用酶原免疫法测量,AngⅡ受体分子表达采用RT-PCR检测,ET受体蛋白表达采用免疫组化加HE染色观测,ET、NO及AngⅡ则采用放免法检测。 结果: 1一般行为观察 造模期间,空白组大鼠毛色顺滑有光泽,精神状态良好,行动敏捷,性情温顺;高血压大鼠毛发干枯无光泽,形体日益消瘦,饮水量逐渐增多,且性情暴躁,同笼大鼠打斗频繁,捉拿时抵抗剧烈并伴有尖叫、咬人等行为。经过治疗后,低剂量组、高级量组、卡托普利组精神状态明显好转,饮水量逐渐下降,情绪趋于缓和,且毛发逐渐有光泽。 2潜阳通络方对自发型高血压大鼠血压的影响 2.1造模后治疗前血压值 与N组大鼠血压值(108.00±1.18)相比、M组(202.25±1.51)、C组(203.75±1.40)、L组(211.38±1.61)、H组(213.13±2.07)大鼠血压均明显升高(P0.01)。 2.2治疗后对血压的影响 M组大鼠血压(208.75±0.56)较N组血压(109.13±0.79)明显升高(P0.01)。各治疗组与M组相比,均明显下降(P0.01)。其中C组(112.25±0.92)与L组(153.63±1.03)、H组(147.75±1.06)两两相比均有显著差异(P0.01)。 3潜阳通络方对高血压大鼠左室重量指数(LVMI)的影响 M组大鼠LVMI(2.63±0.04)明显高于N组(1.19±0.07)(P0.01)。经过六周治疗后,与M组比较,L组(2.48±0.04)与H组(2.42±0.04)LVMI均明显下降(P0.05),C组与M组无差别(P0.05)。 4潜阳通络方对高血压大鼠心肌组织形态的影响 N组大鼠心肌细胞大小正常,排列整齐、致密,肌纤维呈束状分布,核裂不明显。M组大鼠心肌细胞肥大、间质增生,心肌纤维增多并排列紊乱。经治疗后,C组心肌细胞排列较整齐,心肌纤维较M组略有减少,可见断裂。L组心肌细胞排列较整齐,细胞呈束状分布,心肌纤维增粗不明显,有少量断裂。H组细胞接近N组细胞正常形态。 5潜阳通络方对高血压大鼠血浆儿茶酚胺(肾上腺素、去甲肾上腺素)的影响 5.1对血浆肾上腺素的影响 M组大鼠肾上腺素含量(15.26±0.87)较N组(4.55±0.46)相比显著升高(P0.01)。治疗后,与M组比较,C组(9.28±0.58)、L组(8.82±0.53)、H组(9.57±0.63)均明显降低(P0.01),但三组间无明显差别(P0.05)。 5.2对血浆去甲肾上腺素的影响 M组大鼠去甲肾上腺素含量(25.12±1.55)较N组(9.60±0.58)相比显著升高(P0.01)。治疗后,与M组比较,C组(20.94±1.59)、L组(15.27±1.59)、H组(15.41±1.26)均明显降低(P0.01),L组、H组效果优于C组(P0.05),L组与H组无差异(P0.05)。 6潜阳通络方对高血压大鼠ET受体(ETR)蛋白表达的影响 图像显示黄色区域较多则表达较明显,N组大鼠ET受体表达正常,黄色区域不明显。M组大鼠ETRa、ETRb受体表达明显增强,黄色区域分布广、密度高。经治疗后L组、H组表达均不同程度下降,黄色区域分布密度较稀疏,C组变化不明显。平均光密度统计结果表明,M组大鼠ETRa表达较N组明显升高(P0.05)。治疗后,与M组比较,C组、L组、H组明显降低(P0.05),且L、H两组效果优于C组(P0.05)。M组大鼠ETRb表达较N组明显升高(P0.05)。治疗后,与M组比较,C组、L组、H组明显降低(P0.05),且H组效果优于C、L两组(P0.05)。 7潜阳通络方对高血压大鼠AngⅡ受体(ATR1、ATR2)分子表达的影响 M组大鼠ATR1表达(0.478±0.001)较N组(0.133±0.002)明显升高(P0.05)。治疗后,与M组比较,C组(0.261±0.009)、L组(0.357±0.002)、H组(0.265±0.003)明显降低(P0.05),且H组、C组低于L组(P0.05),H组、C组间无差别(P0.05)。 M组大鼠ATR2表达(0.428±0.004)较N组(0.101±0.001)明显升高(P0.05)。治疗后,与M组比较,C组(0.248±0.005)、L组(0.342±0.012)、H组(0.257±0.007)明显降低(P0.05),且H组、C组低于L组(P0.05),H组、C组间无差别(P0.05)。 8潜阳通络方对高血压大鼠血浆ET和NO的影响 M组大鼠ET含量(269.51±4.83)较N组(236.40±4.56)明显升高(P0.05)。治疗后,与M组比较,C组(255.30±3.99)、L组(245.99±4.80)、H组(244.42±5.25)ET含量明显降低(P0.05),三组间两两比较无明显差异(P0.05)。 M组大鼠NO含量(27.15±8.35)较N组(39.38±10.26)明显降低(P0.05)。治疗后,与M组比较,C组(36.74±9.77)、L组(37.30±7.72)、H组(37.41±9.61)明显升高(P0.05)。三组间两两比较无显著差异(P0.05)。 9潜阳通络方对高血压大鼠血浆AngⅡ的影响 M组大鼠血浆AngⅡ(221.51±2.12)较N组(142.44±2.12)明显升高(P0.05)。治疗后,与M组比较,C组(147.25±1.96)、L组(161.25±2.18)、H组(144.06±1.87)含量明显降低(P0.05),且C组、H组效果优于L组(P0.05)。 结论: 1潜阳通络方针对肝阳上亢型高血压病左室肥厚具有良好的降低血压作用,且存在一定的量效关系。 2潜阳通络方具有降低LVMI,逆转左室肥厚,防止心肌结构重塑,减缓及拮抗心肌纤维化的作用。 3潜阳通络方良好的降低血压及逆转左室肥厚作用机制可能是通过降低高血压大鼠儿茶酚胺、血管紧张素受体、内皮素受体、ET和AngⅡ水平,增加NO含量等途径实现的。
【学位授予单位】:河北医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R285

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5 黄丽红;TLR4在高血压左室肥厚患者单核细胞中的表达[D];大连医科大学;2005年
6 刘强;龙藤降压片治疗高血压改善左室肥厚的临床研究[D];山东中医药大学;2004年
7 黄澄;应用微阵列研究重度主动脉瓣狭窄左室肥厚心肌的基因表达谱[D];中南大学;2007年
8 张文秀;血管紧张素转换酶和醛固酮合成酶基因多态性与高血压病及左室肥厚相关性研究[D];第一军医大学;2001年
9 殷丽琼;胰岛素抵抗与高血压病左室肥厚、心力衰竭的关系探讨[D];安徽医科大学;2003年
10 任远;脑钠素在高血压所致左室肥厚性舒张功能不全中的研究[D];重庆医科大学;2005年
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