收藏本站
《河北医科大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

青蒿琥酯对K562细胞系增殖、凋亡的影响及其机制研究

杨营营  
【摘要】:目的:慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)是一组起源于造血干/祖细胞的恶性克隆增殖性疾病,在我国的发病率约为0.36/10万,占各种类别白血病的20%左右。目前治疗方法以干扰素、骨髓移植、酪氨酸激酶抑制剂为主,仍存在疗效不理想、骨髓来源受限、治疗费用昂贵、耐药性等问题。从祖国医学宝库中寻找出既可以抑制白血病细胞恶性增殖、诱导其凋亡,副作用又相对小、价格便宜的天然药物已成为白血病治疗的新希望和重要途径。 近几年来,我国学者积极的探索中药治疗肿瘤的方法,现已发现数十种具有抗肿瘤作用的中药成分。青蒿素就是由我国科学工作者从菊科植物黄花蒿中所提取出来的,也是由我国学者自行研发的新型抗疟药物。在此基础上,我国学者又研发出了多种青篙素类衍生物,包括蒿甲醚、双氢青蒿素、青蒿琥酯等,由于其抗疟活性高,而且毒性小,迅速在疟疾的治疗领域得到了广泛的应用。并且随着研究的不断深入,研究者发现青篙素及其衍生物具有显著的抗肿瘤活性。 青蒿素及其衍生物不仅对耐药的疟原虫有效,对耐药的肿瘤细胞也有效,而且具有毒副作用小、患者易耐受等优点,其另一显著的特点就是与传统的化疗药物不存在交叉耐药,这就为研究开发经济、有效的抗肿瘤药物提供了新的线索。本研究以K562细胞系为研究对象,观察不同浓度的青蒿素衍生物青蒿琥酯对K562细胞的增殖抑制及促凋亡作用,并对其在调节Bcl-2蛋白家族方面的作用机制进行初步探讨。 方法: 1细胞培养:K562细胞常规用RPMI 1640培养液培养。培养液内含10%胎牛血清(FBS)、100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素。置于37℃、5%CO2饱和环境下培养、传代,细胞呈70%~80%融合状态后换液。待细胞进入对数生长期后进行相关实验。 2细胞增殖抑制实验:收集终浓度为0μg/ml、4μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml的青蒿琥酯干预48h后的K562细胞,MTT实验检验增殖抑制。并根据下述公式计算增殖抑制率:抑制率(%)=(对照组A值-实验组A值)/对照组A值×100%。 3 AnnexinV/PI双染检测细胞凋亡率:收集终浓度为0μg/ml、4μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml的青蒿琥酯干预48h后的K562细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率。 4流式细胞术检测细胞周期分布:取对数生长期K562细胞,加入终浓度为0μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml的青蒿琥酯处理K562细胞,48h后收集细胞,流式细胞仪测定细胞周期分布,计算细胞周期变化。 5 Western blotting检测Bcl-2、Bax、Bcl-rambo、Caspase-3、Survivin蛋白表达水平:收集终浓度为0μg/ml、4μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml的青蒿琥酯干预48h后的K562细胞,Western blotting检测上述蛋白的表达水平。 结果: 1青蒿琥酯对K562细胞产生增殖抑制作用,并呈现剂量依赖性,不同浓度的青蒿琥酯处理组间的A值相比较,P0.05。随着浓度的增加,青蒿琥脂对K562细胞的增殖抑制率由54.29%增加到77.98%。 2青蒿琥酯对K562细胞凋亡的影响:AnnexinV/PI双染检测法检测细胞凋亡率结果显示,终浓度分别为0μg/ml、4μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml的青蒿琥酯作用于K562细胞48h后,细胞凋亡率增加,并呈剂量依赖性增加。青蒿琥酯诱导K562细胞凋亡的作用在终浓度为40μg/ml时最明显,凋亡率可达49.47±5.08%,明显高于对照组(P0.05)。 3青蒿琥酯对K562细胞周期分布的影响:终浓度分别为0μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml的青蒿琥酯作用于K562细胞48小时后,流式细胞仪检测细胞周期变化的结果显示,随着青蒿琥酯浓度的增加,K562细胞G2/M期比例逐渐增加(P0.05),G0/G1+S期比例逐渐减少(P0.05)。 4 Western blotting显示,随着ART作用剂量的增大,Bcl-2蛋白的表达水平呈上升趋势(P0.05);Bax蛋白的表达水平呈上升趋势(P0.05);Bcl-rambo蛋白的表达水平呈上升趋势(P0.05);Caspase-3蛋白的表达水平呈上升趋势(P0.05),提示细胞凋亡增加;Survivin蛋白的表达水平呈下降趋势(P0.05)。 结论:青蒿琥酯对K562细胞有显著的抑制增殖和诱导凋亡作用,其作用机制可能与启动Bcl-2蛋白家族的促凋亡活性和激活Caspase途径有关。体外研究显示,青蒿琥酯是一种潜在的抗白血病药物。
【学位授予单位】:河北医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R285.5

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 王静;刘亮;李金梅;刘江惠;郭建文;左连富;;青蒿琥酯抗人食管癌作用与调控CDC25A表达的关系[J];第三军医大学学报;2007年05期
2 邵义如;朱尤庆;刘敏;;二氢青蒿素对结肠癌细胞系SW480增殖凋亡的影响[J];武汉大学学报(医学版);2008年03期
3 宝福凯;bcl-2基因家族对细胞凋亡的调节[J];生理科学进展;1996年01期
4 谢红;姚丽;靳秋月;陈立军;;Artesunate对K562细胞增殖作用及细胞周期的影响[J];天津医药;2009年05期
5 李增军;邱录贵;李新;麦玉洁;王国蓉;于珍;王亚非;李长虹;李茜;;β-catenin在慢性粒细胞白血病中的表达及与bcr/abl的关系[J];中国实验血液学杂志;2007年05期
6 李傲;周慧君;;二氢青蒿素诱导HL-60细胞凋亡[J];中国药理学与毒理学杂志;2007年03期
7 乔建华;武文元;;青蒿素及其衍生物抗肿瘤作用实验研究进展[J];医学综述;2009年21期
8 姚丽;谢红;靳秋月;呼文亮;陈立军;;利用基因芯片分析二氢青蒿素的抗肿瘤作用机制[J];中国中药杂志;2008年13期
9 王卫东;陈正堂;;Bcl-2/Bax比率与细胞“命运”[J];中国肿瘤生物治疗杂志;2007年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 熊梦祯;张娟;孙蓉丽;尹立红;浦跃朴;;1,4-苯醌致人胚肺成纤维细胞的凋亡效应与调控机制[J];癌变·畸变·突变;2012年01期
2 邓亮;吴娣;洪一江;毛慧玲;;BCL-2家族的研究新进展[J];安徽农业科学;2012年04期
3 杨旭东;张杰;林峰;;黑木耳多糖对体外高糖培养乳鼠心肌细胞的保护作用[J];现代农业科技;2011年15期
4 赵伯菁;一种生理性的细胞死亡方式——细胞凋亡[J];白城师范高等专科学校学报;1999年01期
5 刘伟;侯丽;;青蒿及其有效成分抗肿瘤机制研究进展[J];北京中医药;2012年07期
6 李相军;杨莉;任立群;石艳;孙波;苗春生;;Bcl-2及Bax在异丙肾上腺素致心肌坏死模型大鼠心肌中的表达及意义[J];吉林大学学报(医学版);2009年06期
7 王瑞敏,李俊;细胞凋亡与bcl-2基因[J];滨州医学院学报;2001年03期
8 杨旭东;张杰;刘洪凤;;白毛藤诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡作用及其机制研究[J];长春中医药大学学报;2010年04期
9 杨旭东;张杰;吴英俊;;白毛藤多糖抑制人卵巢癌细胞增殖作用及其机制研究[J];长春中医药大学学报;2011年04期
10 徐吉山;细胞坏死及细胞程序性死亡和细胞凋亡[J];大理师专学报(综合版);1998年02期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 邹凯杰;高海珣;杨秀芬;;活血化瘀类中药及其有效成分对缺血性脑损伤的作用及机制研究进展[A];2013年中国药学大会暨第十三届中国药师周论文集[C];2013年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 钟兴;hNIS转染鼻咽癌介导放射性核素显像和治疗的实验研究[D];暨南大学;2010年
2 林胜璋;大黄素抗胰腺癌作用及机制研究[D];浙江大学;2011年
3 王洪艳;骨髓间充质干细胞对胸腺辐射凋亡的作用及其成瘤过程中机制的探讨[D];吉林大学;2011年
4 闫旭;大气压低温等离子体抑制HepG2细胞增殖的机制研究[D];华中科技大学;2011年
5 郑君;瓜石汤对初老雌性大鼠卵巢储备功能影响的实验研究[D];成都中医药大学;2011年
6 赵雪静;促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRHant)预防化疗损伤性卵巢功能早衰的实验研究[D];第四军医大学;2011年
7 张翀;Bcl-2抑制剂ABT-737与化疗药物联合用药的药效学及机制研究[D];浙江大学;2011年
8 刘福水;针刀干预对颈椎病兔颈后伸肌细胞凋亡的影响[D];北京中医药大学;2012年
9 任文英;补肾清热毒方治疗狼疮性肾炎的疗效与机理的实验研究[D];北京中医药大学;2003年
10 郑晓群;薯蓣皂甙预处理对大鼠缺血再灌注心肌及心肌细胞凋亡与相关基因蛋白表达影响的研究[D];大连医科大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张海鸽;多西他赛对食管癌细胞系EC-9706放射增敏机制的研究[D];郑州大学;2010年
2 梅琛;Wnt拮抗基因在骨髓增生异常综合征患者中甲基化水平分析[D];浙江大学;2011年
3 吴圣曦;白芥子挥发油抗肿瘤作用初步研究[D];福建师范大学;2010年
4 白鹭;褪黑素与西拉普利干预高血压大鼠基底前脑和海马细胞凋亡及学习记忆的比较研究[D];广西医科大学;2011年
5 谷芳;双氢青蒿素对人卵巢癌细胞株SKOV-3增殖和凋亡的影响[D];山西医科大学;2011年
6 陈明明;营养性肥胖对青春期雄性大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响[D];山西医科大学;2011年
7 王海丽;马钱子碱对人白血病细胞株K562细胞的诱导凋亡作用的实验研究[D];山西医科大学;2011年
8 万成亮;蒿甲醚与顺铂联用对Lewis肺癌小鼠协同抑制作用实验研究[D];昆明医学院;2011年
9 钟世丰;双氢青蒿素联合柔红霉素对HL60细胞作用的探讨[D];广州中医药大学;2011年
10 刘佳;加味青蒿鳖甲汤对急性髓系白血病缓解期骨髓细胞CD抗原表达的影响[D];广州中医药大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张居馨,王士贤,张富庚,张玉华;青蒿琥酯对人宫颈癌HeLa细胞的乏氧杀伤和辐射增敏作用初探[J];癌症;2001年12期
2 陈卫强,戚好文,吴昌归,崔燕,刘斌,李焰,吴军正;双氢青蒿素抗人肺腺癌A549细胞生长的实验研究[J];中国肺癌杂志;2005年02期
3 邵义如;朱尤庆;刘敏;;二氢青蒿素对结肠癌细胞系SW480增殖凋亡的影响[J];武汉大学学报(医学版);2008年03期
4 肖柳英,林培英,张丹,陈绮文,李浩亮,冯昭明,张宏;青蒿琥酯对小鼠肝癌及S_(180)实体瘤的抑制作用[J];实用癌症杂志;2001年03期
5 蒋永新;王前;金从国;陈晓群;邓晶;李佳;;双氢青蒿素对Lewis肺癌小鼠的抑瘤作用及其机制探讨[J];实用肿瘤杂志;2008年05期
6 樊嵘;谢红;杨磊;陈立军;;青蒿素及其衍生物抑制K562细胞生长作用比较[J];武警医学院学报;2006年03期
7 张祖贻;余世庆;苗立云;黄晓英;张晓萍;朱玉萍;夏小红;李丹奇;;青蒿琥酯联合NP方案治疗中晚期非小细胞肺癌的随机对照研究[J];中西医结合学报;2008年02期
8 张永辉;张源才;任今今;;超声介入在青蒿琥酯治疗原发性肝癌中的应用价值[J];现代诊断与治疗;2007年02期
9 吕翠岩;陈信义;唐炳华;;青蒿素及其衍生物逆转肿瘤耐药作用初探[J];中国中医药信息杂志;2006年04期
10 周慧君,吴慧玲,王玮琴,吴国东,陈欢欢,娄小娥,李茵,吴秀华,陈耀,王明强;青蒿琥酯和体内主要代谢物二氢青蒿素的抗新生血管生成作用研究进展[J];云南大学学报(自然科学版);2004年S2期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王勤,吴理茂,李爱媛,赵一,王乃平;青蒿琥酯抗肝癌作用的实验研究[J];中国中药杂志;2001年10期
2 陈华,高玉祥;青蒿琥酯免疫作用机制探讨(摘要)[J];蚌埠医学院学报;1988年03期
3 吴玲娟,徐潘生,范济堂,杨明瑾,李思温;青蒿琥酯防止急性血吸虫病的实验研究[J];中国血吸虫病防治杂志;1997年05期
4 高白荷,杨恒林,黄开国;云南省恶性疟原虫抗青蒿琥酯株的体外培养选育[J];中国寄生虫病防治杂志;2000年03期
5 符林春,郭兴伯,王新华,简华香,陈沛泉,李国桥;青蒿琥酯肌注与静注治疗无并发症恶性疟的随机比较[J];热带医学杂志;2003年04期
6 周慧君,娄小娥,王明强,陈耀;青蒿琥酯抑制蜕膜-胎盘组织新生血管生成[J];生殖与避孕;2005年06期
7 周倩!233004安徽,高玉祥!233004安徽,金慧玲!233004安徽;青蒿琥酯对实验性免疫性肌炎动物模型的影响[J];中华皮肤科杂志;1998年04期
8 王勤,吴理茂,赵一,张锡流,王乃平;青蒿琥酯抗肿瘤作用的机制研究[J];药学学报;2002年06期
9 ;青蒿琥酯预防日本血吸虫病优化方案及推广应用的研究[J];中华医学信息导报;2002年10期
10 陈绍芳,徐亦益,刘祥麟,马洁羽,于晓宏,贾旭玲,朱家光;青蒿琥酯对小鼠Heps肝癌的抑瘤作用[J];中国肿瘤;2004年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈毅平;古练权;;“一锅法”合成青蒿琥酯的工艺研究[A];2011年全国药物化学学术会议——药物的源头创新论文摘要集[C];2011年
2 杜幼芹;肖长义;;青蒿琥酯抗宫颈癌作用及机理的实验研究[A];2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集[C];2009年
3 李思温;吴玲娟;张绍基;徐明生;林丹丹;戴裕海;刘志德;易志辉;刘旭;;青蒿琥酯预防日本血吸虫病优化方案和推广应用的研究[A];新世纪预防医学面临的挑战——中华预防医学会首届学术年会论文摘要集[C];2002年
4 李斌;周红;;青蒿琥酯联合不同抗生素对四种细菌的抗菌增敏作用及机制研究[A];药学发展前沿论坛及药理学博士论坛论文集[C];2008年
5 梁爱华;薛宝云;王金华;李春英;;青蒿琥酯对内毒素诱导的炎症反应的抑制作用[A];中国药理学会第八次全国代表大会暨全国药理学术会议论文摘要汇编[C];2002年
6 李振彬;杜志峰;;青蒿琥酯对佐剂性关节炎大鼠血清TNF-α、IL-1β含量的影响[A];全国第七届中西医结合风湿病学术会议论文汇编[C];2008年
7 叶宝东;虞荣喜;沈一平;周郁鸿;俞庆宏;武利强;;青蒿琥酯诱导人白血病细胞K562凋亡的实验研究[A];2005年华东六省一市血液病学学术会议暨浙江省血液病学学术年会论文汇编[C];2005年
8 金鸥阳;周康兴;王杰;赵盛楠;孙凌云;;青蒿琥酯对MRL/lpr鼠狼疮肾炎的作用及机制研究[A];第十二届全国风湿病学学术会议论文集[C];2007年
9 王翠娥;徐在海;曹军田;李豫川;甘永华;;青蒿琥酯对弓形虫滋养体超微结构的影响[A];第十二届全国电子显微学会议论文集[C];2002年
10 蒋为薇;李斌;周红;;青蒿琥酯增强β-内酰胺类药物保护MRSA脓毒症模型小鼠的作用及机制研究[A];第十届全国化疗药理暨抗感染药理高峰论坛资料汇编[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 姚琳 实习生 许可;青蒿琥酯破茧成蝶[N];广西日报;2006年
2 通讯员 程宁;自治区主席陆兵视察桂林南药[N];桂林日报;2006年
3 陈江;中国成品药冲击国际“零突破”[N];解放日报;2005年
4 记者 邓德仁 通讯员 程宁;桂林南药青蒿琥酯成为WHO预供应商[N];中国医药报;2005年
5 华;青蒿琥酯治疗危重疟疾[N];健康报;2007年
6 记者 孙月;FDA批准青蒿琥酯用于治疗危重疟疾[N];医药导报;2007年
7 记者  陈江;中国成品药国际化“零的突破”[N];解放日报;2006年
8 金通证券 钱向劲;G复星:药业分销龙头[N];证券时报;2006年
9 胡玲 高璐璐 张海龙;青蒿琥酯可预防日本血吸虫病[N];健康报;2003年
10 周依亭;以核心技术进入国际高端市场——桂林制药 任重道远[N];中国医药报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王颖;青蒿琥酯抗骨髓增生异常综合征作用和机制的体外实验研究[D];河北医科大学;2012年
2 蒋为薇;青蒿琥酯增强β-内酰胺类抗生素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)脓毒症模型小鼠的保护作用及机制研究[D];第三军医大学;2011年
3 陈浩;Ang-1在多发性骨髓瘤中的表达和青蒿琥酯、β-榄香烯抗骨髓瘤效应[D];河北医科大学;2010年
4 马虎;青蒿琥酯对NSCLC抗瘤及增强厄洛替尼体内外抗瘤活性的实验研究[D];第三军医大学;2012年
5 黄利华;青蒿琥酯对人急性白血病原代细胞增殖抑制作用及其机制的研究[D];广州中医药大学;2011年
6 姚琦;青蒿琥酯增加大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素敏感性及相关机制探讨[D];第三军医大学;2011年
7 刘金元;青蒿琥酯抗实验性肝纤维化机理的探索性研究[D];广州中医药大学;2008年
8 林雪梅;青蒿琥酯对K562细胞系CD34~+细胞的作用及分子机制[D];重庆医科大学;2007年
9 盛庆寿;青蒿琥酯对H_(22)肝癌小鼠的抑瘤作用及对肿瘤组织VEGF、FasL的影响[D];广州中医药大学;2008年
10 刘欣燕;青蒿琥酯、氧化苦参碱对L929肿瘤细胞免疫抑制作用影响及相关分子机制研究[D];河北医科大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李均亮;青蒿琥酯纳米乳的制备及评价[D];中国农业科学院;2013年
2 李亚光;青蒿琥酯联合常用化疗药物体外抗肿瘤作用的实验研究[D];广西医科大学;2010年
3 张孝飞;青蒿琥酯对人胚肺成纤维细胞增殖、凋亡及胶原合成的影响[D];桂林医学院;2010年
4 余梦辰;青蒿琥酯增强小鼠腹腔巨噬细胞内化清除内毒素、大肠埃希菌的作用及其机制研究[D];第三军医大学;2012年
5 王文波;枞酸钠抗日本血吸虫的初步研究及免疫抑制剂对青蒿琥酯抗日本血吸虫作用的影响[D];苏州大学;2011年
6 孙艳辉;青蒿琥酯对百草枯致大鼠肺损伤机制的干预性研究[D];大连医科大学;2011年
7 肖娜;青蒿醛脱氢酶基因克隆及青蒿琥酯抗菌增敏作用研究[D];广州中医药大学;2012年
8 朱卫星;青蒿琥酯对狼疮样小鼠白细胞介素-6和转化生长因子-β血清水平和肾脏表达的影响[D];第二军医大学;2002年
9 蒋晖;青蒿琥酯对人骨肉瘤细胞株HOS增殖抑制作用及其机制研究[D];浙江大学;2011年
10 杨营营;青蒿琥酯对K562细胞系增殖、凋亡的影响及其机制研究[D];河北医科大学;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026