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高压电烧伤大鼠血清CD44、CD58变化及乌司他丁的干预作用

马万军  
【摘要】:目的:高压电烧伤除即刻性电热损伤外,还存在着原因未明的渐进性损伤。研究表明,微循环障碍在电烧伤后的渐进性损伤发生和发展过程中起关键作用,并发现电伤后的微循环障碍主要由微血管损伤及微血流障碍所致。在影响微循环血流动力学和流变学的指标中,白细胞黏附、血小板聚集及血栓形成起重要作用。红细胞是血液的主要组成成分,是影响微循环血流动力学及流变学的关键因素。高压电烧伤通过引起红细胞聚集性升高及黏附性增加而加重微循环血流障碍,但红细胞聚集和黏附的分子机制目前尚不清楚。本研究通过检测高压电烧伤大鼠血清CD44、CD58两种免疫黏附分子的变化,并通过乌司他丁(Ulinastatin,UTI)干预,旨在进一步探索高压电致红细胞黏附及其免疫损伤的相关机制和干预办法。 方法: 1.实验动物分组:健康成年雄性SD大鼠(河北医科大学动物实验中心提供,合格证编号832457)180只,按随机数字表法分成三组,即假高压电烧伤组(简称对照组)、高压电烧伤组(简称电伤组)、高压电烧伤乌斯他丁(UTI)治疗组(简称治疗组),每组各60只。每组又按观察时间分为伤前15min、伤后5min、伤后1h、2h、4h、8h六个时相组,每组10只。 2.实验前准备:将大鼠编号、称重、左上肢、右上肢及前胸脱毛。按所需浓度配制实验药品。 3.高压电烧伤模型制作:连接实验变压器和调压器电线。用1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉大鼠(40mg/kg),麻醉成功后,将大鼠仰卧于专用电击实验台上,固定四肢,将两个1cm×1cm电极片分别固定于大鼠的左上肢(电流入口)、右下肢(电流出口)脱毛区。接通电源,调整调压器使升压器输出电压至2千伏,连接升压器输出电源,使高压电流通过大鼠,电击时间为3s,对照组给予只连电线而不通电制作假电伤模型。电伤5min内,治疗组腹腔注射1%UTI(按2×104u/kg即2mL/kg给药),对照组及电伤组腹腔内注射2mL/kg生理盐水。 4.标本采集与保存:将模型复制成功的大鼠开胸暴露心脏,直视下心脏抽血4mL,置于无菌塑料试管中,静置30min,待血清析出后上离心机,以3000转/min离心10min,取上清液置于Eppendorf管中在-70℃条件下保存。 5、指标检测:采用酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbentassay,ELISA)双抗体夹心法,分别检测每组大鼠六个时相组血清CD44、CD58含量。 6实验数据处理:采用SPSS13.0统计软件,行两因素析因设计的方差分析,多重比较采用最小显著差异t检验(LSD-t)。以p<0.05为显著性检验水准。 结果: 1.大鼠血清CD44含量变化 电伤组CD44含量总体高于对照组(主效应F=882.901,P<0.01);电伤组CD44含量受伤后时间变量影响(主效应F=81.459,P<0.01),伤后5min~8h各时相均高于本组伤前值(P<0.001),且呈逐渐增高趋势。 治疗组CD44含量总体低于电伤组(主效应F=219.597,P<0.01);治疗组CD44含量受伤后时间变量影响(主效应F=155.774,P<0.01),治疗组伤后5min~8h各时相均高于本组伤前值(P<0.001)。 2.大鼠血清CD58含量变化 电伤组CD58含量总体高于对照组(主效应F=121.598,P<0.01);电伤组CD58含量受伤后时间变量影响(主效应F=14.560,P<0.01),伤后1~8h各时相均高于本组伤前值(P<0.001),且呈逐渐增高趋势。 治疗组CD58含量总体低于电伤组(主效应F=189.815,P<0.01);治疗组CD58含量受伤后时间变化影响(主效应F=11.854,P<0.01),治疗组伤后1~8h各时相均高于本组伤前值(P<0.001)。 结论: 1.高压电烧伤可引起大鼠血清CD44含量升高,且在伤后8h内呈逐渐升高趋势。 2.高压电烧伤可引起大鼠血清CD58含量升高,且在伤后8h内呈逐渐升高趋势。 3.高压电通过刺激机体产生CD44、CD58增加红细胞的免疫黏附功能,促进炎症反应,同时影响微循环内的血液流动。 4.UTI可抑制大鼠高压电烧伤后血液CD44、CD58的生成,从而减轻大鼠电伤后炎症反应及微循环血流障碍。


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