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壳聚糖膜预防膝关节术后粘连的实验研究

赵振拴  
【摘要】: 目的:膝关节术后粘连是临床经常遇到的并发症,可使膝关节术后的运动范围(ROM,Range of motion)明显小于正常,而在术中放置生物膜可起到保护手术创面免于粘连形成的作用。壳聚糖膜是一种能够降解的、生物相容性良好的生物膜,还有止血等作用,故设想将壳聚糖膜用于膝关节术中来预防术后粘连。本实验目的是在兔膝关节的滑膜切除手术中置入壳聚糖膜来观测其预防术后粘连的效果。 方法:选择健康成熟雄性新西兰白兔32只,随机分为二组,一为壳聚糖膜组即实验组,一为对照组。所有动物在无菌条件下行右膝关节大部分滑膜切除术,术中实验组需在切除区域,重点是髌上囊区放置一块壳聚糖膜,大小合适后与周围软组织缝合固定,而对照组不放膜,其余与实验组手术方法相同。术毕所有兔右膝呈完全屈曲位石膏管型固定,长度为从腹股沟到足,右踝呈完全背伸位。4周后,作下列观察及测定。每组用6只兔子处死后作大体观察,切开右膝关节后,评估髌上囊区的粘连情况,并作0—4分的半定量计分。0分:无粘连;1分:薄膜似的弱粘连;2分:轻度粘连;3分:中等度的粘连;4分:严重的纤维性粘连。随后立即将右膝带软组织切下,10%福尔马林液中固定一周,盐酸甲酸脱钙液中脱钙2天,取材后再脱1天,经髌上囊处作与股骨长轴垂直的横断面切片, 中文摘要 采用VG氏胶原特染的方法作染色,光学显微镜下观察。 做完上述二项评估后,每组剩余动物作生物力学分析。深 麻醉下将兔右大腿固定于小卓上,在膝下 10cm处用带圈 细钢丝套住右小腿,另一端系550克砧码经过外围栏杆上 的滑轮滑动作水平牵引,这作为一恒定外力来伸膝,然后 用测角仪测量膝关节屈曲角度。完全伸直时为0”,分别 作记录。随后处死做完角度测量的兔子,打开膝关节,在 骸上囊处小心取粘连组织40mg,冻干,上0℃贮存作主物 化学分析。以Woessner方法为基础通过测定羟脯氨酸的含 量来确定总胶原含量,再按照 Chan和 C de的方法测定胶 原类型的比率,用*型胶原与1型和*型胶原总和的百分 比(Ill型/[I型十Ill 型])来表示。所有的数据经过 SPSS(8刀) 统计软件包处理,计分结果用均数士标准差(x士SD)表 示,其余结果用均数士标准误(x士SE)表示,检验方法 是成组设计的两样本均数比较的t检验,所有结果均以 P叱刀5表示其差异性有统计意义。 结果:l只兔于(实验组)不明原因死亡,2只兔子因 管型造成压迫性溃疡(实验组、对照组各1只人除去这3 只后,余下的29只动物作为研究对象。每组6只兔子作肉 眼的大体检查发现对照组粘连呈较厚的纤维性组织,膝关 节被动活动度较小,而实验组的粘连薄而弱,关节被动活 动度较大,盲法的半定量记分结果:前者是3刀士0.6分, 后者是1.8士0.4分,统计检验结果P划.05,认为对照组的 粘连程度有统计意义地高于实验组。光镜下的组织学观察 对照组有浓厚致密的纤维性组织形成,区域较大,在实验 组相应部位有薄而松散的纤维组织,壳聚糖膜周围有中等 2 中文摘要 量浆细胞和淋巴细胞浸润,夹杂着嗜中性细胞和巨噬细胞, 为慢性非特异性炎症反应。对照组剩余的9只兔子和实验 组余下的8只兔子作生物力学分析,测量膝屈曲角度分别 是:对照组为73石士4.5”,实验组是8*士2.6”。统计学 分析表明实验组膝关节挛缩的角度明显小于对照组 0叼*人随后用上述兔于作生物化学分析,总胶原含量 是通过测定羟脯氨酸的含量而获得,在胶原中含有12.5% 的羟脯氨酸,这样 ling干燥的粘连组织中总的胶原含量 是:对照组是 169.2士 12.9 u g,实验组是引 *士 8.3 u g。统 计学分析表明实验组干燥的粘连组织中总胶原含量明显低 于对照组T功刀1人而胶原类型比率以*型胶原与1型和 Ill型胶原总和的百分比来代表,测得结果是:对照组为32.5 士 1.8%,实验组为 41.7士 0石%。统计学分析表明实验组* 型胶原所占的比率有统计意义地高于对照组①刃刀5人 结论:通过在兔膝关节滑膜切除术中置入壳聚糖膜后 大体观察、组织学观测、生物力学的角度测量、生物化学 的总胶原含量和Ill型胶原比率的测定结果可以看出,壳聚 糖膜组粘连的程度、强度和厚度等均明显低于对照组,表 明膝关节术中置入壳聚糖膜可以有效预防术后粘连,从而 有利于膝功能的康复,这不失为一种较好的预防膝关节术 后粘连的方法。


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