收藏本站
《河北医科大学》 2004年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

三羟异黄酮对人肝癌细胞增殖及凋亡作用的研究

戴胜兰  
【摘要】:原发性肝癌为我国常见的恶性肿瘤之一,其死亡率在消化系统恶性肿瘤中列第三位,仅次于胃癌和食管癌。对无法手术的晚期肝癌,寻求有效的药物进行综合治疗以改善预后,提高生活质量十分必要。目前主要的化疗药物均为细胞毒药物,毒副反应大,人体耐受性差。因此研究非细胞毒的抗癌药物已成为当前研究的热点之一。 大豆异黄酮(soybean isoflavones)是大豆中重要的非营养成分,它主要包括以糖苷结合形式存在的染料木黄酮苷(genistin)和黄豆苷(daidzin)。大豆经加工,微生物发酵或体外水解作用,染料木黄酮苷和黄豆苷的糖苷配基脱离,释放出游离形式的三羟异黄酮(4’,5,7-三羟基异黄酮,染料木黄酮,genistein)和二羟异黄酮(黄豆苷元,daidzein),这两种形式的异黄酮可被肠道有效吸收,研究发现,大豆异黄酮具有抗癌作用,对人乳腺癌细胞株,前列腺癌细胞株,胃癌细胞株,垂体瘤细胞株等具有体外抗癌作用,是一种潜在的肿瘤化学预防剂,具有广阔的开发应用前景。目前关于大豆异黄酮抗癌的实验研究主要是围绕三羟异黄酮来进行的,研究还发现,三羟异黄酮不仅存在于大豆中,还存在于各种蔬菜和水果等植物饮食中。 作为一个很有潜力的抗肿瘤物质,三羟异黄酮的作用机制主要包括:①抑制蛋白酪氨酸激酶(PTK)活性,可阻抑PTK引起的受体磷酸化和有丝分裂的信号传递,导致癌细胞 WP=4 增殖受抑;②弱雌激素作用:可通过与体内雌激素受体结合,并可增加细胞内性激素结合球蛋白的合成,增加UDP-葡糖醛酸转移酶的活性等途径抑制乳腺癌和前列腺癌细胞活性;③拓扑酶Ⅰ和Ⅱ抑制剂,抑制细胞活性;④上调细胞周期性负性调节因子P21WAF1/CIP1的表达,使之负性调节因子作用增强;⑤可阻止胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)、肝细胞生长因子(HGF)和神经生长因子(NGF)的作用而抑制肿瘤生长;⑥其他:抗氧化作用、抑制热休克蛋白、诱导细胞凋亡、抑制新生血管生成和抑制多种耐药相关蛋白(MRP)等。 迄今为止,三羟异黄酮抗癌的动物实验及体外研究资料较多,三羟异黄酮在体外能抑制多种人肿瘤细胞(如结肠癌、前列腺癌、卵巢癌、膀胱癌等)的生长,使细胞生长周期停留在G2-M期,诱导人乳腺癌细胞分化和促进凋亡,在体内实验中能抑制肿瘤细胞增殖和新生血管形成,抑制肿瘤生长和转移,能显著降低被诱导分化的人乳腺癌细胞的致瘤作用,并能延长接种人乳腺癌细胞的SCID小鼠的存活期,对肿瘤的生长和转移均显示出良好的治疗作用。 但三羟异黄酮与肝癌的作用研究甚少,经文献检索目前国内尚无此研究报道。因此,本研究旨在通过体外肝癌细胞培养,研究三羟异黄酮对肝癌细胞增殖抑制及凋亡的诱导作用。 目的:探讨三羟异黄酮对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响 方法:应用体外SMMC-7721细胞培养技术,采用MTT,集落形成实验测定SMMC-7721细胞增殖;采用流式细胞仪测定细胞周期及凋亡率;通过透射电镜和TUNEL染色法定 WP=5 性和定量地研究三羟异黄酮与肝癌细胞凋亡的关系;通过免疫细胞化学法检测凋亡相关基因bcl-2和bax的表达。 结果:⑴三羟异黄酮对SMMC-7721细胞增殖的作用:MTT法结果表明在24h时三羟异黄酮对SMMC-7721细胞的增殖的抑制不明显,低浓度时甚至有促进增殖的作用,当培养时间延长至48h时,逐渐出现抑制作用,且浓度越高,时间越长,抑制作用越强。集落形成实验结果表明2.5-10μg.ml-1 三羟异黄酮对集落形成均有抑制作用,且随剂量增加,抑制作用增加。 ⑵三羟异黄酮对SMMC-7721细胞周期的作用:流式细胞仪结果显示2.5-10μg.ml-1的genistein作用48h后,G2-M期细胞逐渐增多,呈剂量依赖性,但当genistein浓度大于10μg.ml-1 时G2-M期细胞减少,与对照组相比出现了明显的亚二倍体凋亡峰。 ⑶三羟异黄酮对SMMC-7721细胞凋亡的作用:透射电镜下可见经药物处理的肿瘤细胞出现典型的凋亡细胞形态如细胞染色质致密浓缩,或聚集于核膜呈新月形小体;TUNEL染色法检测经10、20μg.ml-1的三羟异黄酮处理48小时后,细胞凋亡数明显增加;免疫细胞化学法结果表明5-10μg.ml-1 三羟异黄酮均能下调bcl-2蛋白表达,上调bax蛋白的表达。 结论:体外细胞培养研究表明,三羟异黄酮可以抑制人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的增殖,诱导G2-M期阻滞及细胞凋亡,升高bax及降低bcl-2蛋白表达,可能为其诱发肿瘤细胞凋亡的机制之一。 WP=6
【学位授予单位】:河北医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R735.7

免费申请
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 张龙,雷霆,薛德麟;表皮生长因子及染料木黄酮对垂体瘤细胞增殖的调节[J];同济医科大学学报;2001年02期
2 刘颖,张牧,王小雪,张玉梅,崔洪斌;染料木黄酮对人胃癌细胞生长抑制作用研究[J];营养学报;2001年01期
3 周信达;肝癌诊治的若干进展及展望[J];中华消化杂志;1999年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨茂区;陈伟;冯磊;;大豆异黄酮的生理功能研究进展[J];大豆科学;2006年03期
2 秦东春;王海颖;梅园丁;张钦宪;;原发性肝细胞癌患者免疫功能的改变[J];第四军医大学学报;2007年20期
3 高鹏;方驰华;张刚庆;颜政;;survivin反义寡核苷酸对肝癌耐药细胞的作用及与化疗的关系[J];南方医科大学学报;2006年11期
4 龚道军;谢志徵;;肝细胞癌组织中MMP-9,CD_(44)V_6与nm23-H_1表达的相关性及意义[J];肝胆胰外科杂志;2006年06期
5 杨建荣;原发性肝癌外科干预治疗现状[J];广西医学;2000年04期
6 朱刚健;超声引导下肝癌的瘤内注射治疗概况[J];广西医学;2003年08期
7 王拱辰;施广霞;;肝细胞癌细胞免疫功能的相关研究[J];中国肝脏病杂志(电子版);2010年02期
8 陈乃玲,田惠英,范公忍,邬长惠,黄耀煊;肝细胞癌患者外周血AFP-mRNA的临床价值[J];北京军区医药;2000年04期
9 高立生;刘宁宁;邵雪斋;;肿瘤对机体免疫功能影响的研究进展[J];河北医学;2008年09期
10 毕永生;安献云;刘兴海;高立升;孙立新;;H22荷瘤小鼠免疫功能状态的初步研究[J];河北医学;2011年02期
中国博士学位论文全文数据库 前9条
1 李晓薇;大豆两个MYB转录因子基因的克隆及其功能分析[D];吉林大学;2011年
2 吴纯鑫;异黄酮类化合物合成新方法及3,4-二氢-2(1H)-喹啉酮衍生物合成新方法研究[D];浙江大学;2004年
3 郑晓珂;卷柏化学成分及雌激素样作用机理研究[D];北京中医药大学;2006年
4 周人杰;ATRA联合Genistein对A549人肺腺癌细胞株增殖、凋亡及VEGF表达的影响及其机理研究[D];第三军医大学;2006年
5 高鹏;survivin反义寡核苷酸在耐药肝细胞癌的治疗作用研究[D];第一军医大学;2006年
6 陈庆庆;豆粕异黄酮酶法提取及生物转化的研究[D];浙江大学;2007年
7 何跃;神经生长因子及其受体在多巴胺激动剂耐受的垂体泌乳素腺瘤中的作用[D];华中科技大学;2006年
8 李莉;新疆黑加仑生物活性有效部位的提取及其功效学研究[D];新疆医科大学;2008年
9 全毅;TACE联合肿瘤间质注射碘油化疗药物治疗肝癌的临床研究[D];南方医科大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 孔晶;艾克达康颗粒对中期原发性肝癌患者白介素-2的影响[D];黑龙江中医药大学;2010年
2 罗景龙;不同动物肠道优势需氧菌分离及其对黄豆苷原转化菌株转化能力的影响[D];河北农业大学;2011年
3 李术宝;大豆异黄酮转化菌株在ICR小鼠体内定植研究[D];河北农业大学;2012年
4 潘廖明;大豆异黄酮提取分离技术及检测方法研究[D];四川大学;2003年
5 杨锦林;Genistein对体外肝癌细胞株SMMC-7721的抑制作用及对癌基因表达的影响[D];四川大学;2003年
6 张丹凤;蒙古黄芪异黄酮合成酶基因的克隆及序列分析[D];福建农林大学;2004年
7 龚道军;MMP-9、CD_(44)V_6、nm23-H_1在肝癌中的表达及意义[D];郑州大学;2004年
8 王祖森;P53、PTEN和MMP-9基因在预测肝细胞肝癌病人预后中的价值[D];青岛大学;2005年
9 张艳;大豆异黄酮抗突变、抗肿瘤作用体外试验研究[D];天津医科大学;2005年
10 廖头根;生物活性新黄酮化合物和新肉球菌素结构片段的合成研究[D];湖南大学;2005年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 汤钊猷;肝癌复发转移的研究[J];实用肿瘤杂志;1997年01期
2 庞素华,郭宗儒;酪氨酸蛋白激酶抑制剂的研究进展[J];药学学报;1996年01期
3 彭向雷,王蕊,王悦,崔洪斌;大豆异黄酮研究进展(综述)[J];中国食品卫生杂志;1998年03期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吉恩生,李爱英,张浩;三羟异黄酮对在体大鼠股动脉血管床的影响及其机制[J];河南医学研究;2004年01期
2 杨颖慧;大豆异黄酮的应用研究进展[J];张家口医学院学报;2002年03期
3 杨镇洲,刘林,陈幸华,刘红,李忠俊,王吉刚;EphB4在三羟异黄酮抑制红系祖细胞分化中的作用研究[J];重庆医学;2003年10期
4 张国富,李忠,莫宝庆,魏炜;三羟异黄酮对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞增殖和细胞周期的影响[J];南京医科大学学报(自然科学版);2005年05期
5 梁江,肖荣,赵海峰;三羟异黄酮对环磷酰胺致神经细胞早期凋亡的干预作用研究[J];山西医药杂志;2004年10期
6 魏思忱;白文元;;三羟异黄酮诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制研究进展[J];医学研究杂志;2009年03期
7 毕道济;大豆的防癌作用[J];国外医学.卫生学分册;1995年05期
8 牛雯,李忠,陈龙;三羟异黄酮对人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S细胞周期的影响[J];南京医科大学学报(自然科学版);2003年02期
9 余小平,糜漫天,朱俊东;MAPK在三羟异黄酮抑制静脉内皮细胞中作用[J];中国公共卫生;2004年11期
10 李爱英,吉恩生,张浩;三羟异黄酮降低大鼠肠系膜血管灌注压[J];基础医学与临床;2005年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 周永;糜漫天;杨镇洲;;三羟异黄酮对小鼠放射性造血系统损伤的防护作用[A];中国营养学会第九次全国营养学术会议论文摘要汇编[C];2004年
2 王定发;马青山;张妮娅;齐德生;;三羟异黄酮和玉米赤霉烯酮联合作用对MCF-7细胞增殖的影响[A];第六次全国饲料营养学术研讨会论文集[C];2010年
3 王斌;糜漫天;彭俊华;朱俊东;;辛基酚和三羟异黄酮对乳腺癌发生及增殖影响的研究[A];首届中国西部营养与健康、亚健康学术会议论文集[C];2005年
4 周永;糜漫天;朱俊东;郎海滨;陈卡;;三羟异黄酮对小鼠辐射损伤后血清造血活性的影响[A];第二届中国西部营养学术会议专题报告及论文摘要汇编[C];2006年
5 冯子南;白文元;刘云燕;田媛;;三羟异黄酮抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖及其机制的研究[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编(下册)[C];2007年
6 周永;糜漫天;;三羟异黄酮对辐射损伤小鼠骨髓造血细胞周期的影响[A];首届中国西部营养与健康、亚健康学术会议论文集[C];2005年
7 魏思忱;白文元;田媛;冯子南;刘云燕;;三羟异黄酮诱导人肝癌细胞凋亡的分子机制与信号分子表达[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编(下册)[C];2007年
8 张华欣;张峰;彭俊华;齐心亮;邓芝云;;辛基酚和三羟异黄酮对大鼠乳腺癌ER、AIB1和PCNA表达的影响[A];第九届西北五省(区)检验医学学术会议论文汇编[C];2005年
9 冯子南;白文元;刘云燕;田媛;;三羟异黄酮抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖及其机制的研究[A];中国中西医结合第十九次全国消化病学术会议暨国家级中西医结合消化疾病新进展学习班论文汇编[C];2007年
10 田媛;白文元;冯子南;刘云燕;陈庆;;三羟异黄酮抑制人肝癌细胞SMMC-7721侵袭转移的实验研究[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编(下册)[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 刘宁春张晔;利用猪肝救人肝[N];科技日报;2002年
2 ;氟喹诺酮类药对人肝药酶活性的影响[N];中国医药报;2003年
3 高晚坪;肝病患者:勿用猪肝补人肝[N];医药养生保健报;2005年
4 保健时报特约记者 郑杨;九旬老人肝里藏了个“大足球”[N];保健时报;2006年
5 冯丽萍;有害健康的“习惯病”[N];保健时报;2003年
6 宝和;脂肪也能引起肝炎[N];科技日报;2003年
7 陈凯星 毕式明 赵东辉;你不是烦民工吗?这回他们不来了[N];新华每日电讯;2005年
8 陈国华;鱼秋串之功效与应用[N];民族医药报;2006年
9 王中华;老年用药12忌[N];中国中医药报;2005年
10 王黎生;此症患儿非罕见 特殊喂养防痴傻[N];广东科技报;2000年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨小珊;n-3多不饱和脂肪酸和三羟异黄酮孕期营养干预对Sprague-Dawley(SD)大鼠子代乳腺癌发生的影响及机制研究[D];第三军医大学;2009年
2 余小平;三羟异黄酮对HER-2/neu高表达乳腺癌血管生成的影响及其机理研究[D];第三军医大学;2003年
3 周永;三羟异黄酮对放射性造血损伤的防护作用及其机理研究[D];第三军医大学;2005年
4 吉恩生;植物性雌激素三羟异黄酮的心血管效应及其机制研究[D];河北医科大学;2004年
5 蒋凯;三羟异黄酮对光动力学疗法抗肿瘤治疗的增效作用及机制研究[D];第三军医大学;2005年
6 席子明;mDRA-6与热疗对肝癌SMMC-7721细胞协同作用的研究[D];河南大学;2010年
7 李黎;消癌解毒方对H22荷瘤小鼠和人肝癌SMMC-7721细胞的影响及机制研究[D];南京中医药大学;2013年
8 曾小莉;人参皂甙Rh_2诱导人肝癌细胞分化及机理研究[D];重庆医科大学;2002年
9 刘湘国;基因芯片对三氧化二砷诱导人肝癌细胞凋亡的研究[D];中南大学;2003年
10 崔杰峰;人肝癌细胞系转移相关分子的比较蛋白质组学研究[D];复旦大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 戴胜兰;三羟异黄酮对人肝癌细胞增殖及凋亡作用的研究[D];河北医科大学;2004年
2 冯子南;三羟异黄酮抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖及其机制的研究[D];河北医科大学;2006年
3 周礼华;三羟异黄酮对丙烯酰胺诱导大鼠小脑颗粒神经元凋亡的保护作用[D];蚌埠医学院;2011年
4 宋海云;三羟异黄酮对孕期乳腺癌(MMTV)-ErbB-2转基因小鼠P53表达变化的研究[D];河南科技大学;2010年
5 魏思忱;三羟异黄酮诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的分子机制研究[D];河北医科大学;2005年
6 刘润;三羟异黄酮诱导K562和K562/ADM细胞的凋亡作用[D];兰州大学;2006年
7 廖宇圣;三羟异黄酮对胰腺癌细胞Notch-1和Hedgehog信号通路活性影响的实验研究[D];华中科技大学;2008年
8 马彬;延髓腹外侧头端微量注射三羟异黄酮对麻醉大鼠血压、心率和肾神经放电的影响[D];河北医科大学;2006年
9 谭莉莉;三羟异黄酮对人肝癌SMMC-7721细胞PI3K/Akt信号转导通路的影响[D];河北医科大学;2007年
10 马岚;锌协同三羟异黄酮对成骨细胞MC3T3-E1增殖的影响[D];第四军医大学;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026