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《河北医科大学》 2007年
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河北省不同地区粮食赭曲霉毒素A污染情况及OA致细胞损伤作用的研究

李增宁  
【摘要】: 赭曲霉毒素(Ochratoxins,OT)是由赭曲菌(Asperegillus alutacells)和纯绿青霉(Penicillium viridicatum)产生的有毒代谢产物,包括七种结构类似的化合物,其中以赭曲霉毒素A(Ochratoxin A, OA)为主,毒性也最大。OA的分子量为404,熔点169℃,为无色晶体,易溶于有机溶剂(三氯甲烷和甲醇)和稀碳酸氢钠溶液,微溶于水。在紫外线照射下OA呈绿色荧光,最大吸收峰为333nm。该化合物相当稳定,一般的烹调和加工方法只有部分破坏。动物实验表明,赭曲霉毒素A具有肾毒性、免疫毒性和致癌、致畸、致突变性。1993年国际癌症研究中心将赭曲霉毒素A列为可能的人类致癌物。一些国家已报道了从人全血、血清及人奶中检出赭曲霉毒素A。研究表明,粮食污染是人类赭曲霉毒素A暴露的主要途径。研究分析粮食赭曲霉毒素A污染情况对保障食品卫生和安全具有非常重要的意义。目前,国外文献中已有不少粮食赭曲霉毒素A污染情况的分析检测报道,不少国家和国际组织还根据赭曲霉毒素A的污染情况制定了人体赭曲霉毒素A摄入量的限制标准。迄今为止,国内有关粮食中赭曲霉毒素A的污染情况报道较少。目前,有关粮谷中赭曲霉毒素A的检测方法主要有薄层色谱法(TCL)、酶免疫检测法(ELISA)、高效液相色谱法(HPLC)等。我国谷物和大豆中赭曲霉毒素A的国家标准检测方法是TCL法,属于目测半定量法,最低检出量为10μg/kg,不适用于粮谷中赭曲霉毒素A的准确测定和居民赭曲霉毒素A的膳食摄入量的暴露评估研究。 为准确分析我国粮食中OA的污染情况,进一步探讨OA污染的生物学意义,本研究对OA的检测方法进行了改进,建立了灵敏度高、重现性好、准确可靠的OA高效液相色谱荧光定量检测方法。对河北省不同地理环境的三个地区粮食中赭曲霉毒素A污染情况进行了定量检测。同时,以细胞培养、FCM等方法研究了OA对人外周血单个核细胞增殖和凋亡的影响,探讨了OA对人正常肾小管上皮细胞株(HKC)和人肺泡II型上皮细胞(AT-II)细胞系A549凋亡的诱导作用。在上述工作的基础上,采用Western Blotting和免疫组化方法等方法在蛋白水平上对JNK通路在OA诱导细胞损伤中作用及OA诱导细胞损伤的机制进行了研究。 本研究共分为五部分: 第一部分:赭曲霉毒素A检测方法的建立目的:建立SPE - C_(18)柱纯化和富集—高效液相色谱法荧光检测粮谷和酒类样品中赭曲霉毒素A的系列方法。 方法:1用三氯甲烷提取玉米、小麦和大麦样品中的OA后,经C_(18)固相萃取柱净化处理,以乙腈:水:乙酸(99:99:2)作为流动相,用带有荧光检测器的反相高效液相色谱法(激发波长为333nm,发射波长为460nm)检测OA含量;2选用C_(18)固相萃取小柱(250mg/3ml),用2ml乙腈和2ml水分别活化C_(18)小柱,30ml酒样通过C_(18)固相萃取小柱,控制流速30滴/分。再用2ml乙腈溶液洗脱,最后将C_(18)小柱抽干。45℃下氮气吹干,流动相溶液稀释至0.5ml,0.45μm微孔滤膜过滤后取20μL进高效液相色谱仪进行检测。 结果:1.分别在小麦和大麦样品中加入3种不同量的OA标准物。小麦加标样品的回收率为78.60%~92.73%,变异系数为1.46%~2.98%,大麦加标样品的回收率为77.61%~93.21%,变异系数为1.74%~3.45%;为考察该方法的准确度,对北京中检维康玉米加标盲样(OA浓度范围介于5.33~9.91ng/g)进行了检测,结果为6.75ng/g,在盲样范围内,经t检验,在95%的置信水平上,测定平均值(n=3)与盲样给定值无显著性差异。2.本实验对干红葡萄酒,白葡萄酒和红葡萄酒分别进行了0.25ng/ml、0.5ng/ml、1.5ng/ml三个浓度的加标回收,对三种葡萄酒样品,每个加标水平平行3份,按上述方法提取测定,各种样品的加标回收率均在80.1~109.8%。平行三次测定加标回收率的相对标准偏差在1.5~5.2%之间。 第二部分:河北省不同地区粮食中赭曲霉毒素A污染情况研究 目的:分析河北省不同地理环境地区居民食用粮食OA污染情况,了解河北省居民OA的暴露量,揭示其对健康的可能影响,为减少OA污染及其影响奠定基础。 方法:抽样检测河北省不同地理环境的三个代表性地区粮食OA污染情况,三个地区分别为河北省南部邯郸市磁县、河北省中部石家庄市赞皇县和河北省北部塞外地区张家口市赤城县。分别入户采取中南部地区居民日常食用主粮小麦和北部地区居民日常食用主粮大麦样品。采用反相—高效液相色谱法检测OA含量:用三氯甲烷提取小麦和大麦样品中的OA后,经C18固相萃取柱净化处理,以乙腈:水:乙酸(99:99:2)作为流动相,用带有荧光检测器的高效液相色谱仪(激发波长为333nm,发射波长为460nm)检测OA含量。 结果:大麦样品OA经反相—高效液相色谱法检测结果表明,张家口市赤城县31份大麦样品中,11份样品检测到OA,污染率为35.48%,其平均含量为6.96μg/kg,最低者为0.21μg /kg,而最高可达35.36μg/kg;赞皇县居民食用小麦样品中赭曲霉毒素A的检出率为45.16%,平均含量2.41μg/kg,最高达14.25μg/kg。河北省磁县居民食用小麦中赭曲霉毒素A的检出率为33.33%,平均含量0.59μg/kg,最高为1.63μg/kg。根据居民人均食用粮食重量计算,赞皇县农村居民OA的日暴露量为1.17μg/ kg,磁县农村居民OA的日暴露量为0.31μg/kg,张家口赤城农村居民OA的日暴露量为3.38μg/kg,超过世界卫生组织/粮农组织联合专家委员会暂定的容许摄入量。可见河北省不同地理环境居民食用粮食中OA的污染均比较普遍,应当引起有关部门的重视。 第三部分赭曲霉毒素A对体外培养HPBMCs增殖与凋亡的研究 目的:探讨OA对体外培养HPBMCs增殖与凋亡的影响,揭示OA暴露对机体免疫功能的可能作用。 方法:健康献血员抗凝静脉血200mL,采用聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度离心法(ficoll-hypaque density gradient centrifug- ation)分离人外周静脉血单个核细胞,接种于含10%胎牛血清,105U/L青霉素,100mg/L链霉素的RPMI-1640培养液中,加入PHA并使其终浓度为300μg/mL,37℃、5%CO_2培养24h,更换不含PHA的新的培养液。HPBMCs随机分为4组:空白对照组、溶剂对照组、1μmol/L OA和5μmol/L OA实验组。实验组分别给予乙醇溶解的OA处理,使其终浓度分别为1μmol/L和5μmol/L,对照组和溶剂对照组分别给予等体积生理盐水和乙醇处理。细胞继续培养24h,常规收集细胞,采用流式细胞定量检测术(FCM)检测HPBMCs细胞凋亡率和增殖指数,以及细胞凋亡相关蛋白Caspase-3的表达。 结果: FCM检测结果表明, OA处理24h,1μmol/L OA和5μmol/L OA组HPBMCs细胞凋亡率分别为10.90±0.85%,16.03±0.37%,均高于对照组(8.17±1.45%,P0.05)。1μmol/L OA和5μmol/L OA组细胞增殖指数分别为35.77±4.74和36.89±7.63,与对照组比较差异无显著性(33.53±1.97,P0.05),说明OA处理24h可以促进HPBMCs凋亡,但对细胞增殖没有影响。 FCM定量分析表明,OA作用24h后,1μmol/L OA和5μmol/L OA组HPBMCs细胞Caspase-3蛋白表达FI值明显高于对照组(1.13±0.02和1.14±0.06 vs 1.00±0.04,P 0.05)。 第四部分:赭曲霉毒素A对A-549和HKC细胞损伤的研究 目的:探讨OA处理对A549和HKC细胞增殖与凋亡的影响及可能机制,并观察OA对体外分离的DNA致损伤作用。 方法:取对数生长期A549和HKC细胞,用10%DMEM调整细胞浓度为(1~2)×10~8L~(-1),接种于细胞培养板和细胞培养瓶中。细胞培养24h后,随机分为4组:空白对照组、溶剂对照组、1μmol/L OA和5μmol/L OA实验组。实验组分别给予OA 1μmol/L和5μmol/L处理,溶剂对照组和对照组分别给予DMSO(0.4mL·L~(-1))和生理盐水处理,继续细胞培养24h。采用MTT法检测A549和HKC细胞存活率。采用FCM检测A549和HKC细胞凋亡率,以及细胞凋亡相关蛋白Caspase-3的表达表达情况;采用紫外以及荧光光谱法检测了OA与小牛胸腺和鲑鱼精DNA的相互作用形成的DNA加合物。 结果:MTT检测结果表明,OA对A549和HKC细胞的生长均有一定抑制作用:1μM、5μM OA作用不同时间后,两株细胞存活率均较相应对照组降低,尤以24h更明显(P0.05)。1μM、5μM OA处理24h后,A549细胞存活率分别为80.71%和70.85%,明显低于对照组(100%,P0.05);HKC细胞存活率分别为51.09%和54.69%,也低于对照组(100%,P0.05)。提示OA对A549和HKC细胞具有明显的致损伤作用。 FCM检测细胞凋亡率检测结果表明,A549细胞经1μM、5μM OA处理24h后,OA处理细胞凋亡率明显升高,5μM OA处理组凋亡率为2.68±0.55%,明显高于对照组(1.53±0.23%,P0.05)。HKC细胞经OA处理24h后,1μM和5μM OA组细胞凋亡率分别为3.85±0.29%和4.86±0.51%,均明显高于对照组(1.23±0.05%,P0.05)。表明OA对A549和HKC细胞具有明显的促凋亡作用。 FCM检测组方图及定量分析表明,OA作用24h后,A549和HKC细胞Caspase-3蛋白表达量均明显高于对照组。 紫外光谱法分析结果显示DNA与OA没有发生相互作用;荧光光谱法分析结果显示OA没有与DNA相结合。 第五部分:JNK信号转导通路在赭曲霉毒素A诱导HKC凋亡中的作用 目的:探讨JNK信号转导通路在赭曲霉毒素A诱导HKC凋亡中的作用,以期进一步探讨OA诱导凋亡的可能机制。 方法: 5.1 OA对HKC细胞JNK激酶活性和Caspase-3蛋白表达影响的检测 实验分组与处理同论文第四部分有关OA作用HKC细胞24h的实验分组和处理。细胞处理24h后,离心收细胞用于相关指标的检测。采用免疫细胞化学方法和Western blot方法检测HKC细胞p-JNK水平,JNK和Caspase-3蛋白表达。 5.2 JNK抑制剂SP600125预处理对OA诱导HKC细胞JNK激酶活性、凋亡率、Caspase-3蛋白表达和细胞损伤影响的检测 选择对数生长期的细胞(传代24h后),随机分为空白对照组、溶剂对照组、OA处理组和JNK阻断剂组。1μM OA处理组给予终浓度为1μM OA;JNK阻断剂组预先加入0.5μM SP600125孵育30min后再加入1μM OA ;空白对照组加入生理盐水;溶剂对照组加入乙醇(1:500)+DMSO(1:30000)。细胞培养24h后消化离心收集细胞。采用Western blot方法检测HKC细胞p-JNK水平;采用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率和Caspase-3蛋白表达;采用MTT比色法检测HKC细胞的存活率。 结果 5.1OA对HKC细胞Caspase-3蛋白表达的影响 免疫细胞化学染色,光镜下观察可见Caspase-3蛋白免疫阳性反应产物为棕黄色颗粒状,定位于HKC细胞胞浆内。1μMOA、5μM OA处理组HKC细胞Caspase-3阳性表达细胞比率分别为54.03±9.21%,60.75±9.95%,明显高于对照组(14.31±4.24%,P0.05)。 Western blot检测发现,给予不同剂量OA处理后,细胞Caspase-3蛋白表达明显高于对照组,进一步证实给予OA处理可以促进体外培养HKC细胞Caspase-3蛋白的表达。 5.2OA对HKC细胞p-JNK水平的影响 免疫细胞化学染色可见p-JNK阳性染色为棕黄色颗粒,定位于HKC细胞胞浆及胞核内。1μMOA和5μMOA处理组HKC细胞阳性表达细胞比率分别为53.31±11.01%和58.53±11.11% ,明显高于对照组(10.19±6.85%,P0.05)。Western Blot检测发现,给予不同剂量OA处理后,HKC细胞p-JNK水平明显高于对照组(P0.05),实验结果表明,给予OA处理可以提高体外培养HKC细胞JNK磷酸化水平。 5.3OA对HKC细胞JNK蛋白表达的影响 免疫细胞化学方法和Western blot结果显示OA对HKC细胞JNK蛋白表达没有影响。 5.4 SP600125预处理对OA作用后HKC细胞p-JNK激酶活性的影响 免疫细胞化学染色可见,JNK阻断剂组HKC细胞p-JNK激酶阳性表达细胞比率为15.51±3.35%,明显低于1μM OA处理组(53.28±7.08%,P0.05,)。Western blot检测发现,给予SP600125预处理HKC细胞p-JNK水平明显降低。实验结果表明,给予SP600125预处理可以降低HKC细胞p-JNK的表达,进一步说明OA处理可以激活JNK信号转导通路。 5.5SP600125预处理对OA作用后HKC细胞凋亡率的影响 FCM细胞凋亡率检测结果表明, HKC细胞经SP600125预处理30min后,JNK阻断剂组+OA组细胞凋亡率为2.44±0.38%,低于单纯OA处理组(4.24±0.38%, P0.05),但高于空白对照组的细胞凋亡率1.06±0.14%(P0.05)。实验结果表明,SP600125预处理可以部分抑制体外培养人肾小管上皮细胞HKC的凋亡。 5.6 SP600125预处理对OA作用后HKC细胞凋亡相关蛋白―Caspase-3蛋白表达的影响 免疫细胞化学染色可见,JNK阻断剂组Caspase-3阳性表达细胞比率为31.42±4.67%,较1μMOA处理组明显降低(55.86±6.51%,P0.05),但高于对照组(13.97±1.59%,P0.05)。Western blot检测结果证实给予SP600125预处理可以部分降低OA引起的HKC细胞Caspase-3蛋白的表达。推测OA给予SP600125预处理可以部分降低OA引起的HKC细胞Caspase-3蛋白的表达。OA通过激活JNK信号转导通路部分介导caspase-3蛋白活化。 5.7SP600125预处理对OA作用后HKC细胞存活率的影响 MTT检测结果发现给予特异性JNK阻断剂-SP600125预处理后,JNK阻断剂+OA组HKC细胞的存活率为82.09%,明显高于单独OA处理组(66.83%,P0.05);但是低于溶剂对照组(98.58%,P0.05),说明SP600125对OA致HKC细胞损伤具有部分阻断作用,OA通过JNK信号转导通路参与介导细胞死亡。 结论: 1.建立了反相—高效液相色谱法检测粮谷和酒类样品中赭曲霉毒素A的系列方法,本方法具有准确度高、精密度好和灵敏度高等优点。可定量检测粮谷和酒类样品中赭曲霉毒素A,检测结果准确可靠,提取净化过程简单等优点,为食品中赭曲霉毒素A污染情况调查和居民对赭曲霉毒素A的暴露评估提供了有力的技术支持和保障。 2.通过对河北省不同地区居民食用主粮调查发现:河北省中南部地区居民食用小麦中OA的检出率达39.34%,北部地区居民食用的大麦中OA的检出率达到35.48%,均明显高于国内已有的研究报道。赞皇县农村居民OA的日暴露量为1.17μg/ kg,磁县农村居民OA的日暴露量为0.31μg/ kg,张家口赤城农村居民OA的日暴露量为3.38μg/ kg,超过世界卫生组织/粮农组织联合专家委员会暂定的容许摄入量。可见河北省不同地理环境居民食用粮食中OA的污染均比较普遍,应当引起重视。 3. OA可以促进体外培养HPBMCs凋亡,上调Caspase-3蛋白表达,但对HPBMCs增殖没有明显影响。 4. OA可抑制体外培养A549和HKC细胞增殖,上调Caspase-3蛋白的表达,促进体外培养A549和HKC细胞凋亡。OA可能对体外分离的DNA没有损伤作用。 5. OA可以提高体外培养HKC细胞p-JNK水平,激活JNK途径。 6. JNK抑制剂SP600125预处理降低OA诱导的细胞凋亡、Caspase-3蛋白上调及细胞损伤作用,提示JNK信号转导通路部分参与OA介导细胞损伤和凋亡过程。
【学位授予单位】:河北医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R363

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8 朱孟丽;高效液相色谱法对饲料中赭曲霉毒素的测定[J];中国饲料;2005年20期
9 陈道付;金海涛;李绍钰;;赭曲霉毒素A对肉鸡的危害[J];饲料研究;2007年11期
10 赖卫华,熊勇华,陈高明,许杨;应用胶体金试纸条快速检测赭曲霉毒素A的研究[J];食品科学;2005年05期
中国硕士学位论文全文数据库 前4条
1 谈敦芳;我国6省区粮谷类食品中赭曲霉毒素A污染水平调查与我国居民膳食暴露评估的研究[D];河北医科大学;2006年
2 周晓昕;抗赭曲霉毒素A单克隆抗体的研制及其ELISA检测方法的初步建立[D];扬州大学;2007年
3 崔晋峰;JNK信号转导通路在赭曲霉毒素A诱导体外培养人肾小管上皮细胞(HKC)凋亡中的作用[D];河北医科大学;2007年
4 原维;赭曲霉毒素A对肉雏鸡肝脏氧化损伤的研究[D];河南农业大学;2009年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 韦素梅;李炜;刘运龙;;影响赭曲霉毒素A胶体金试纸条最低检出限的因素[J];粮食与食品工业;2013年02期
2 傅勇;曹纪亮;杨小丽;刘书宇;孔维军;杨美华;;真菌毒素检测的前处理技术及其应用[J];中国卫生检验杂志;2012年06期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 赵士侠;赭曲霉毒素A诱导BHK细胞凋亡及维生素C对其毒性干预的研究[D];南京农业大学;2012年
2 班晓敏;AFB_1、OTA、DON高效液相色谱检测方法的优化和应用[D];南京农业大学;2012年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张祥宏,王凤荣,王俊灵,严霞,黄向华,谢同欣,张振东;真菌及其毒素诱发肺癌的动物实验研究[J];北京大学学报(医学版);2003年01期
2 熊轶,黄中新,覃莉;人胎肺Ⅱ型肺泡细胞中表面蛋白-B的表达及意义[J];解剖学研究;2002年04期
3 喻伦银,刘铭球,邹祖玉,江曼,张正彬;肺癌组织的P53基因突变与细胞增殖———P53与增殖细胞核抗原免疫组化研究[J];湖北医科大学学报;1996年03期
4 黄向华,张祥宏,李月红,王俊灵,严霞,杨建柱,刘艳丽,刘晋红,王凤荣;3种真菌毒素诱发NIH小鼠肺癌的实验研究[J];河北医科大学学报;2003年01期
5 孙蕙兰,牛钟相,孙蕙兰,牛钟相;赭曲霉毒素A.B的提取、分析与鉴定[J];山东农业大学学报;1989年01期
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7 高泽立,王凤荣,徐宏达,傅承光;胃癌高发区主粮真菌毒素检测[J];卫生研究;1990年03期
8 楼建龙,田禾菁,孟昭赫,郭振泉;胃癌、肝癌高发区和低发区粮食中杂色曲霉素污染量调查[J];卫生研究;1995年01期
9 张祥宏,谢同欣,张中朝,严霞,王俊灵,李淑荣,刘贵生,王凤荣;杂色曲霉素对体外培养人胚肺成纤维细胞rasp21和超微结构的影响[J];卫生研究;1997年02期
10 孙旭明,曹文军,张祥宏,谢同欣,严霞,王俊灵,左连富,王凤荣;杂色曲霉素对人胚胃粘膜细胞p53基因致突变研究[J];卫生研究;1998年04期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈大义,余蓉;HPLC法快速检测咖啡及粮食中赭曲霉毒素A[J];卫生研究;1998年S1期
2 宋圃菊;赭曲霉毒素(Ochratoxin)对实验动物的病理作用[J];北京大学学报(医学版);1979年02期
3 李增宁;康维钧;张祥宏;谈敦芳;王俊灵河北医科大学基础所实验病理室;崔晋峰;;反相高效液相色谱法测定张家口赤城大麦中赭曲霉毒素A的含量[J];中华预防医学杂志;2006年05期
4 邱云青;王伟;李凤琴;;化学发光酶免疫分析法检测食品中赭曲霉毒素[J];食品科学;2010年24期
5 吴剑威;谭丽杰;赵润怀;陈波;;免疫亲合柱-高效液相色谱检测中药中赭曲霉毒素[J];中草药;2011年08期
6 魏润蕴;;赭曲霉毒素A的研究进展(综述)[J];中国食品卫生杂志;1993年04期
7 韩惠雯;黄菲菲;;免疫亲和柱——高效液相色谱法测定肾脏中的赭曲霉毒素A[J];中国食品卫生杂志;2009年03期
8 柳其芳;刘桂华;刘红河;;ELISA法测定混合饲料多种霉菌毒素污染的研究[J];中国热带医学;2009年06期
9 肖颖;~(14)C-赭曲霉毒素A在妊娠小鼠体内的分布[J];国外医学.卫生学分册;1984年06期
10 魏润蕴;李文艳;;猪组织中赭曲霉毒素A的薄层色谱测定方法[J];中国食品卫生杂志;1990年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
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2 陈道付;李绍钰;徐彬;魏凤仙;焦玉萍;王琳燚;孙全友;;三种吸附剂对肉鸡日粮中赭曲霉毒素A吸附效果的研究[A];第六次全国饲料营养学术研讨会论文集[C];2010年
3 陈平;陈代文;田刚;毛倩;陈洪;余冰;;硒对赭曲霉毒素A毒害IPEC-J2细胞的保护作用研究[A];第六次全国饲料营养学术研讨会论文集[C];2010年
4 崔晋峰;张祥宏;吴莎;;赭曲霉毒素A诱导人胃黏膜上皮细胞(GES-1)G2期阻滞的可能分子机制[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年
5 张雨;郑娟娟;许文涛;黄昆仑;罗云波;;赭曲霉毒素对体外HepG-2氧化应激反应机理的研究[A];中国食品科学技术学会第七届年会论文摘要集[C];2010年
6 胡骁飞;孙亚宁;滕蔓;柴书军;王磊;职爱民;刘庆堂;邓瑞广;张改平;;抗赭曲霉毒素A单克隆抗体的制备及鉴定[A];第六次全国饲料营养学术研讨会论文集[C];2010年
7 马永杰;苏晓鸥;;VE对OTA引起小鼠肾毒性的缓解作用研究[A];食品、饲料安全与风险评估学术会议论文集[C];2010年
8 黄飚;张珏;马智鸿;张艺;朱岚;赵晓联;金坚;;同时检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的双标记时间分辨荧光免疫分析[A];2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集[C];2008年
9 李娟娟;苏晓鸥;;霉菌毒素吸附剂对饲料中黄曲霉毒素B_1吸附效果及特性研究[A];食品、饲料安全与风险评估学术会议论文集[C];2010年
10 肖祖金;;霉菌与霉菌毒素的病原流行及诊断[A];第七届重庆市饲料工业发展战略研讨会暨第八届饲料工业协会会员大会论文集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
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2 江苏省农业科学院畜牧研究所 王冉;霉菌及霉菌毒素[N];中国畜牧报;2002年
3 本报记者 关景奎;我国清理整合食品中真菌毒素限量[N];中国食品报;2010年
4 刘丰;饲料脱霉剂的科学利用[N];中国畜牧兽医报;2009年
5 见习记者 柯志雄;宠物“肾衰竭”事件引发玛氏危机[N];21世纪经济报道;2004年
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7 董新昕;欧盟拟增设赭曲霉毒素A最大限量[N];中国国门时报;2004年
8 四川农业大学 李梦云 陈代文;黄曲霉毒素的毒害及残留[N];中国畜牧报;2004年
9 ;霉菌毒素对蛋鸡的影响[N];中国畜牧兽医报;2009年
10 上海诺华动物保健有限公司 匡宝晓;重视霉菌毒素的作用[N];中国畜牧水产报;2001年
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 韩铮;中药材中常见真菌毒素分析方法学及代谢动力学研究[D];浙江大学;2011年
2 崔晋峰;赭曲霉毒素A诱导人胃黏膜上皮细胞(GES-1)G2期阻滞及可能机制的研究[D];河北医科大学;2010年
3 曾红燕;环境雌激素的色谱测定方法研究[D];四川大学;2004年
4 张辉珍;食品中丙烯酰胺等有毒有害物质检测方法建立及其应用研究[D];青岛大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 谢鹏;郴州地区规模化猪场饲料中赭曲霉毒素污染调查研究[D];湖南农业大学;2011年
2 李姣;赭曲霉毒素A的电化学免疫传感器研究[D];湖南大学;2011年
3 丁俭;牛奶中黄曲霉毒素M_1和食用植物油中赭曲霉毒素A检测技术研究[D];中国农业科学院;2013年
4 孙亚宁;赭曲霉毒素A免疫学快速检测方法研究[D];河南科技大学;2011年
5 李沐洁;玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A免疫快速检测技术的建立与应用[D];中国计量学院;2012年
6 裴亚峰;赭曲霉毒素A无毒免疫学快速检测方法的研究[D];河南科技大学;2012年
7 杨蕾;中药中赭曲霉毒素A的检测方法研究[D];中国协和医科大学;2010年
8 梁晓翠;不动杆菌BD189对赭曲霉毒素A的脱毒研究[D];上海交通大学;2010年
9 李之佳;细菌对赭曲霉毒素A的脱毒研究[D];上海交通大学;2011年
10 连宏光;赭曲霉毒素A对GES-1细胞Rad51表达的影响及可能机制的研究[D];河北医科大学;2013年
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