收藏本站
《河北医科大学》 2007年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

三羟异黄酮对人肝癌SMMC-7721细胞PI3K/Akt信号转导通路的影响

谭莉莉  
【摘要】: 原发性肝癌(Primary carcinoma of liver)是我国常见的恶性肿瘤之一,其恶性程度高,病情进展快,治疗效果差,病死率高居世界癌症病例中第三位。此病常合并肝硬化,并早期即在肝内扩散,由于缺乏特异性症状,难以早期发现。除部分早期患者可以进行手术治疗外,中晚期患者的治疗手段没有新的突破。目前肝癌患者的平均生存期仅为3~6个月,3年生存率低于13%。近年来原发性肝癌发病率呈进一步上升趋势,因此进一步探讨肝癌治疗的有效药物和方法具有极为重要的临床意义。 信号转导通路异常与肿瘤的发生、发展关系密切。在许多肿瘤如乳腺癌、结肠癌和卵巢癌中发现磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)/Akt信号转导通路的激活,它的活化导致肿瘤细胞增殖过度、凋亡受抑。 PI3K是一种与细胞内信号传导有关的第二信使,是由两部分组成的异源性二聚体,其中p85是调节亚单位,p110是催化亚单位。p85亚单位包含两个SH2功能域和一个SH3功能域。当细胞被生长因子刺激后,p85亚单位的SH2功能域与酪氨酸磷酸化受体结合,进而将p85·p110复合体结合于细胞膜内侧以转导信息。 AKt又称蛋白激酶B(protein kinase B, PKB),是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,是细胞生存通路PI3K/Akt的关键分子,在细胞内信号转导系统中位于PI3K的下游,主要通过PI3K激活。AKt的活化依靠两个位点的磷酸化:一个是激酶活性区,另一个是羧基端疏水区。激活后的AKt能使底物种的丝氨酸、苏氨酸残基磷酸化而发挥广泛的生物学效应,包括抗凋亡、促进细胞增殖的作用。 研究发现肝癌细胞中存在PI3K及其下游信号分子AKt表达水平和活性异常改变,因此阻断或抑制PI3K/AKt信号转导有可能抑制肝癌细胞增殖、诱导细胞凋亡。 三羟异黄酮(4,5,7-三羟异黄酮),是大豆中主要的异黄酮成份,是一种多效的天然活性物质,对多种肿瘤具有抑制作用,其抗癌机制可能与周期阻滞、诱导凋亡以及调节信号转导通路等多种途径有关。 业已研究表明,三羟异黄酮可以影响ERK1/2MAPK信号转导通路,抑制乳腺癌细胞增殖。目前,关于三羟异黄酮对肝癌细胞PI3K/Akt信号转导通路的影响研究甚少。因此,本研究旨在通过体外肝癌细胞培养,研究三羟异黄酮对人肝癌SMMC-7721细胞PI3K/Akt信号转导途径的影响,及该通路在三羟异黄酮诱导细胞凋亡中的作用,进一步探讨三羟异黄酮抗肿瘤作用的机理,为肝癌的治疗提供新的思路。 目的:探讨三羟异黄酮对人肝癌SMMC-7721细胞PI3K/Akt信号转导通路的影响,及该通路在三羟异黄酮诱导细胞凋亡中的作用。 方法:应用体外细胞培养技术,采用Western blot方法检测三羟异黄酮对人肝癌SMMC-7721细胞Akt、磷酸化Akt(p-Akt)和PI3K蛋白表达的影响;采用流式细胞仪测定细胞凋亡率。 结果:①三羟异黄酮对SMMC-7721细胞Akt蛋白表达的影响:Western blot显示:5、25、50μmol·L-1三羟异黄酮干预SMMC-7721细胞后,与对照组比较,细胞内Akt蛋白表达水平无明显变化(P0.05)。50μmol·L-1三羟异黄酮作用SMMC-7721细胞24h~72h,细胞Akt蛋白表达与0h相比,无显著差异(P0.05)。这说明三羟异黄酮并不抑制Akt蛋白的表达量。②三羟异黄酮抑制SMMC-7721细胞磷酸化Akt蛋白表达。Western blot方法分析示:5μmol·L-1三羟异黄酮组p-Akt表达与对照组比较无明显差异(P0.05);25、50μmol·L-1三羟异黄酮组p-Akt表达明显下降(P0.01)。三羟异黄酮干预浓度越高,p-Akt蛋白表达下降趋势越明显,呈剂量依赖性。50μmol·L-1三羟异黄酮干预SMMC-7721细胞24h、48h、72h,与0h相比,三羟异黄酮干预时间越长,p-Akt蛋白表达下降趋势越明显,呈时间依赖性。③三羟异黄酮对SMMC-7721细胞PI3K-p85蛋白表达的影响:Western blot显示,50μmol·L-1三羟异黄酮作用SMMC-7721细胞24h~72h,细胞PI3K-p85蛋白表达与0h相比,无显著差异(P0.05)。5、25、50μmol·L-1三羟异黄酮干预SMMC-7721细胞后,与对照组比较,细胞内PI3K-p85蛋白表达水平无明显变化(P0.05)。三羟异黄酮对PI3K-p85蛋白的表达量无影响。④三羟异黄酮对SMMC-7721细胞的凋亡诱导作用:流式细胞仪检测5~50μmol·L-1三羟异黄酮作用48h后,细胞凋亡率逐渐增加,出现了明显的亚二倍体凋亡峰。25、50μmol·L-1三羟异黄酮作用组与对照组比较,细胞凋亡率分别为5.52%±0.53% vs 2.48%±0.35%、9.44%±0.51% vs 2.48%±0.35%,均有差异均有统计学意义(P0.01),且两浓度组间的差异有显著性(P0.01),而5μmol·L-1三羟异黄酮作用组与对照组比较无明显差异,说明随三羟异黄酮浓度的增加,细胞凋亡率细胞凋亡率逐渐增加,呈剂量依赖性。⑤三羟异黄酮作用后AKt的磷酸化与人肝癌细胞SMMC-7721凋亡率的相关分析:两者之间呈负相关,相关系数为(r=-0.919, P0.01)。 结论:三羟异黄酮能够抑制人肝癌细胞SMMC-7721细胞PI3K/Akt信号转导通路Akt蛋白的磷酸化水平,并呈时间和剂量依赖性;三羟异黄酮可以诱导人肝癌细胞SMMC-7721细胞凋亡可能部分是通过抑制PI3K/Akt信号转导通路实现的。
【学位授予单位】:河北医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R735.7

免费申请
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 程黎明,王思元,林菊生;PTEN和p53蛋白在肝癌组织中的表达及意义[J];癌症;2003年01期
2 杨章民;磷酯酰肌醇-3激酶家族研究进展[J];国外医学(分子生物学分册);2003年05期
3 刘恩宇;易继林;宋炜;周旭;李兴睿;陈晚平;;肝细胞癌组织中抑癌基因PTEN与pAkt的表达及其相关性研究[J];中华肿瘤防治杂志;2006年01期
4 张利能,俞强,贺建宇;人肝细胞癌中抑癌基因PTEN/MMAC1/TEP1的突变分析[J];实验生物学报;2000年03期
5 杨志芳,易继林,李兴睿,龙维;Correlation between Loss of PTEN Expression and PKB/AKT Phosphorylation in Hepatocellular Carcinoma[J];华中科技大学学报(医学英德文版);2005年01期
6 李晶;李忠;莫宝庆;;ERK5MAPK在genistein对MDA-MB-231细胞增殖抑制中的作用[J];卫生研究;2006年02期
7 郭双平;王丽;王文亮;李擒龙;王文勇;张静;;抑癌基因PTEN在肝癌组织中的突变及其对肝癌细胞增殖和凋亡的调控作用[J];中华病理学杂志;2006年08期
8 戴胜兰,白文元,姚希贤,房红梅,姚金锋,魏思忱;三羟异黄酮诱导人肝癌细胞周期阻滞及凋亡的研究[J];中华消化杂志;2004年10期
9 郭双平,王文亮,王文勇,李擒龙;抑癌基因PTEN对肝癌细胞增殖的抑制及作用机制[J];中华肿瘤杂志;2005年10期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨震;孙国平;;抑癌基因PTEN与原发性肝癌的研究进展[J];安徽医药;2006年02期
2 薛开先;肝癌发生的分子遗传学和表遗传学研究[J];癌症;2005年06期
3 张建华;杨为民;周四维;陈忠;;PTEN基因转染对人膀胱癌细胞系BIU87增殖及侵袭活性的影响[J];癌症;2006年05期
4 赵先兰;程淑霞;孔祥东;;P16~(INK4A)和PTEN在高危型HPV相关宫颈癌组织中的表达及意义[J];癌症;2007年05期
5 黄秀兰;崔国辉;周克元;;PI3K-Akt信号通路与肿瘤细胞凋亡关系的研究进展[J];癌症;2008年03期
6 谷化平;;Survivin和PTEN在鼻咽癌组织表达及其临床意义[J];青岛大学医学院学报;2008年04期
7 崔石昌;张世杰;宋晨朝;钱智玲;;肝癌组织中nm23-H1、PTEN的表达及其临床病理的意义[J];北京医学;2010年12期
8 贾军;任军;张红梅;张利旺;郭晓彤;;造血干细胞来源的树突状细胞负载p53基因诱导对HMCC97肝癌细胞特异性杀伤[J];北京大学学报(医学版);2008年05期
9 韩彬;程道梅;余小平;彭晓莉;贾皓;;染料木黄酮抑制血管内皮生长因子诱导的血管内皮细胞活化及蛋白激酶K活性[J];成都医学院学报;2011年03期
10 杨茂区;陈伟;冯磊;;大豆异黄酮的生理功能研究进展[J];大豆科学;2006年03期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 覃小敏;李琳;成莉;毛小刚;刘永红;庄苏陵;邢辉;;PI3K/Akt2对P38MAPK信号通路的抑制与卵巢癌耐药[A];中国抗癌协会妇科肿瘤专业委员会第十一届全国学术会议论文汇编[C];2011年
2 陈琦;;植物雌激素——红车轴草异黄酮生物学活性的研究进展[A];第二届全国老年医药学学术会议论文集[C];2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王育蓉;人系膜细胞中TNFα促进IP_3R1的表达及相关信号传导通路的研究[D];中国医科大学;2010年
2 王飞;基于铜的新型蛋白酶体抑制剂N,N-二硫代氨基甲酸盐类化合物库的合成、抗癌活性筛选及机理研究[D];山东大学;2010年
3 张继红;Ang/Tie-2在结直肠癌中的表达及其分子机制的研究[D];吉林大学;2011年
4 李晓薇;大豆两个MYB转录因子基因的克隆及其功能分析[D];吉林大学;2011年
5 王大广;胃癌信号传导蛋白表达谱筛选和分析及XIAP、CDK6抑制剂对胃癌细胞的影响[D];吉林大学;2011年
6 刘元;20(S)-原人参二醇对不同类型细胞与脂筏相关的Akt信号通路的调节机制[D];北京中医药大学;2011年
7 李汛;甲胎蛋白影响乙肝相关性肝癌发生的分子作用机制[D];兰州大学;2010年
8 周为军;细胞间黏附分子5在缺血缺氧环境中对PAJU细胞的保护作用及其机制的研究[D];中南大学;2011年
9 柳永蕾;PI3K-Akt信号通路对钙蛋白酶6表达及生物学功能的调控及其分子机制[D];复旦大学;2011年
10 高姗;上海市区原发性肝癌的流行病学研究[D];复旦大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈进步;血浆DNA定量检测在鉴别诊断各种肝病中的临床应用价值[D];南京医科大学;2009年
2 曹戌;HIV-1 Nef蛋白抑制前列腺癌细胞生长及其分子机制初探[D];南京医科大学;2009年
3 杨郁;PI3K/Akt-PAK1信号通路在表皮生长因子诱导乳腺癌细胞迁移中作用机制的研究[D];南京医科大学;2010年
4 张晋;视蛋白基因3(opsin3)参与调节肝癌细胞5-Fu耐药性的机制研究[D];南京医科大学;2010年
5 黄骁昊;雷藤甲素对离体子内膜癌细胞株增殖及凋亡信号通路PI3K/PKB的影响[D];南京医科大学;2010年
6 吴伟;PTTG和P53在肝细胞癌中的表达及意义[D];郑州大学;2010年
7 宋宁宁;ILK,PI3K及PTEN蛋白在病理性瘢痕中的表达及意义[D];郑州大学;2010年
8 杨丽敏;Paxillin、PTEN在胃腺癌组织中的表达及其临床意义[D];郑州大学;2010年
9 王琼叶;PTEN基因在食管鳞癌中表达和突变的研究[D];郑州大学;2010年
10 姚丹;大鼠缺氧缺血性脑损伤后海马PI3K/Akt信号通路及PTEN的表达与认知功能障碍相关性的研究[D];浙江大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 王东,史景泉,柳凤轩;人肝细胞癌p53蛋白免疫组化研究[J];第三军医大学学报;1997年02期
2 王知力,王文亮,郭双平,曾建新;PTEN蛋白在肝细胞肝癌中的表达及意义[J];第四军医大学学报;2001年20期
3 王廷,窦科峰,孙强;逆转录病毒介导PTEN基因抑制人肝癌细胞系的生长[J];第四军医大学学报;2002年09期
4 王丽,王文亮,郭双平,张勇,成胜权;肝癌组织中PTEN基因蛋白的表达及其与微血管密度的相关性[J];第四军医大学学报;2004年05期
5 徐澍,张维元;Ⅲ期鼻咽癌p53蛋白表达与生物学行为及预后的关系及其与p53基因突变、潜伏膜蛋白-1表达的相关研究[J];中华病理学杂志;2001年06期
6 张利能,余强,贺建宇,王丽影,查锡良;人肝细胞癌抑癌基因PTEN的缺失和突变分析[J];中华肿瘤杂志;2000年02期
7 万小云,石一复,李娟清;PTEN基因对子宫内膜癌细胞生长的抑制作用[J];中华肿瘤杂志;2004年05期
8 郭双平,王文亮,王文勇,李擒龙;抑癌基因PTEN对肝癌细胞增殖的抑制及作用机制[J];中华肿瘤杂志;2005年10期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 洪迅;刘培庆;梁杰贤;付云;;三羟异黄酮上调p53信号通路诱导肝癌细胞凋亡的实验研究[J];热带医学杂志;2008年09期
2 王李伟,仲伟鉴,应贤平,周永贵,周祥凤;三羟异黄酮对BALB/c-3T3细胞的转化作用[J];癌变.畸变.突变;2005年01期
3 吉恩生,李爱英,张浩;三羟异黄酮对在体大鼠股动脉血管床的影响及其机制[J];河南医学研究;2004年01期
4 杨颖慧;大豆异黄酮的应用研究进展[J];张家口医学院学报;2002年03期
5 杨镇洲,刘林,陈幸华,刘红,李忠俊,王吉刚;EphB4在三羟异黄酮抑制红系祖细胞分化中的作用研究[J];重庆医学;2003年10期
6 张国富,李忠,莫宝庆,魏炜;三羟异黄酮对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞增殖和细胞周期的影响[J];南京医科大学学报(自然科学版);2005年05期
7 梁江,肖荣,赵海峰;三羟异黄酮对环磷酰胺致神经细胞早期凋亡的干预作用研究[J];山西医药杂志;2004年10期
8 张继红;梁力建;黄洁夫;王家泽;;三羟异黄酮上调肝癌HepG2细胞PTEN基因的表达及其诱导凋亡作用[J];中山大学学报(医学科学版);2006年03期
9 魏思忱;白文元;;三羟异黄酮诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制研究进展[J];医学研究杂志;2009年03期
10 毕道济;大豆的防癌作用[J];国外医学.卫生学分册;1995年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李祺福;洪水根;;中国鲎血低分子活性物质对癌细胞增殖分化的调控[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(上册)[C];2001年
2 张锦堃;张娟;李军;;树突状细胞与肝癌细胞融合瘤苗的制备和特性[A];第五届全国生物医学体视学学术会议、第八届全军军事病理学学术会议、第四届全军定量病理学学术会议论文汇编[C];2002年
3 张之勇;韩丽辉;孙汶生;;神经营养因子受体TRKB与肝癌细胞BEL7402抵抗失巢凋亡的研究[A];中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要[C];2006年
4 金吴东;陈龙华;;mIκBα基因转染肝癌细胞HepG2的放射增敏作用[A];2007第六届全国放射肿瘤学学术年会论文集[C];2007年
5 田德安;;Smac和AIF基因在肝癌细胞中的表达及与细胞凋亡关系的试验研究[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编(下册)[C];2007年
6 傅遍红;吴泽志;秦建;;整合素亚单位对肝癌细胞与层粘连蛋白趋化迁移运动的影响[A];渗流力学与工程的创新与实践——第十一届全国渗流力学学术大会论文集[C];2011年
7 王芳;杨富;张玲;徐丹;霍希松;毕海珊;孙树汉;;微小RNA17-5p通过靶基因E2F1激活热休克蛋白27促进肝癌细胞转移(英文)[A];中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];2011年
8 施冬云;冯颖;谢飞舟;刘珊林;;缺氧应激对正常肝细胞和肝癌细胞能量代谢通路的不同影响[A];中国活性氧生物学效应学术会议论文集(第一册)[C];2011年
9 毛华;袁爱力;赖卓胜;张振书;张亚力;周殿元;;VEGF诱导肝癌细胞恶性表型及p38MAPK信号通路的调控作用[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年
10 赵航宇;梁健;姜晓峰;杜志安;王学范;魏云涛;姜洪磊;;斑蝥酸钠维生素B6诱导肝癌细胞HepG2凋亡的实验研究[A];第十二届全国肝癌学术会议论文汇编[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 李大庆;我科学家发现肝癌细胞演化和迁移新路径[N];科技日报;2011年
2 贾玉容;Survivin蛋白促进肝癌细胞快速增生[N];中国医药报;2004年
3 江山;小心肝癌细胞“吃”血糖[N];大众卫生报;2005年
4 胡德荣;纳米磁微粒烧死肝癌细胞[N];健康报;2005年
5 史凤芝 陈英云;砒霜可诱导肝癌细胞“自杀”[N];大众卫生报;2000年
6 记者 张建松;肝癌细胞为何转移[N];新华每日电讯;2000年
7 朱恒顺;山大一项免疫学成果通过鉴定[N];科技日报;2002年
8 张建松;肝癌细胞转移相关染色体被发现[N];中国医药报;2000年
9 李 戎 闫智勇 李文军 张天娥;中医药防治原发性肝癌机理研究进展[N];中国中医药报;2003年
10 李洁;几种中药抗癌又保肝[N];医药经济报;2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 宋关斌;肝癌细胞力学特性及其与细胞周期的关系研究[D];重庆大学;2002年
2 吴建兵;RNA干扰抑制BMP-2基因表达对肝癌SMMC7721细胞增殖和侵袭的影响及机制[D];南昌大学;2010年
3 崔恒武;电化学对体外肝癌细胞生物学行为的作用及对肝癌患者免疫功能的影响[D];第二军医大学;2002年
4 刘妍;双特异性抗肿瘤重组腺病毒对肝癌细胞及其模型动物的治疗作用研究[D];吉林大学;2011年
5 黄海燕;表达Apoptin基因重组腺病毒对肝癌细胞BEL-7402及转移模型的抑制作用[D];吉林大学;2011年
6 李劲东;MCT1、CD147在人肝癌中的表达及其反义RNA表达载体对肝癌细胞的影响[D];中南大学;2010年
7 张弘超;树突状细胞联合多烯紫杉醇对肝癌生物学行为的影响[D];中国医科大学;2008年
8 谭晓虹;P21~(WAF1/CIP1)对肝癌细胞SMMC-7721生物学行为的影响及其与POLD1基因关系初探[D];广西医科大学;2010年
9 曹献英;纳米羟基磷灰石诱导肝癌细胞死亡的作用靶点及机理研究[D];武汉理工大学;2005年
10 张之勇;肝癌细胞通过Synoikis-like方式抵抗失巢凋亡的研究[D];山东大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 谭莉莉;三羟异黄酮对人肝癌SMMC-7721细胞PI3K/Akt信号转导通路的影响[D];河北医科大学;2007年
2 杨辉;抑制促血管生成素-2基因表达对肝癌血管生成的影响[D];遵义医学院;2010年
3 张勇;B7-1基因转染肝癌细胞的实验研究[D];苏州大学;2002年
4 来文;肝癌细胞膜单克隆抗体Hepama-1的质量控制及其放射性标记物的临床前毒理学研究[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2004年
5 赵航宇;斑蝥酸钠维生素B6联合X射线诱导肝癌细胞HepG2凋亡的研究[D];中国医科大学;2010年
6 沈徐宁;NSC 74859通过抑制STAT3的表达可以增加Cetuximab对肝癌细胞的生长抑制作用[D];浙江大学;2010年
7 张璐;小鼠H22肝癌细胞肺高转移株的建立及其生物学特性的测定和RhoC基因的表达[D];中国医科大学;2010年
8 张晋;视蛋白基因3(opsin3)参与调节肝癌细胞5-Fu耐药性的机制研究[D];南京医科大学;2010年
9 李权林;苦参碱对肝癌细胞NF-κB、p53、DcR3 mRNA表达的影响[D];川北医学院;2011年
10 刘雪梅;rAdinbitor的抗肿瘤作用及其机制研究[D];大连医科大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026