收藏本站
《河北医科大学》 2007年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

Syk在人B淋巴瘤细胞中的表达及作用机理研究

彭华  
【摘要】: Syk(Spleen Tyrosine Kinase)是一种非受体蛋白酪氨酸激酶,广泛表达于造血细胞、淋巴细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞等细胞,在细胞信号转导中发挥着重要作用。Syk基因被认为是候选抑癌基因,对肿瘤的生长和转移有抑制作用。本研究中,我们对Syk基因在B淋巴瘤细胞中的表达及Syk基因启动子区5’CpG岛的甲基化情况进行了研究,初步探讨了Syk在B淋巴瘤细胞中的作用机理。 方法: 1应用免疫组化S-P法和Western-blot方法检测了人B淋巴瘤细胞株(Raji、Namalwa和Ramos)中Syk蛋白表达水平。 2用RT-PCR方法检测Raji、Namalwa和Ramos细胞中Syk基因的表达。 3 5-aza-CDR对B淋巴瘤细胞株的增殖、周期和凋亡情况的检测:用含5-aza-CdR处理Raji和Ramos细胞后,经MTT实验、流式细胞技术、DNA凝胶电泳和电子显微镜观察,分析了5-aza-CDR对B淋巴瘤细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。 4 B淋巴瘤细胞中Syk基因甲基化状态检测:提取Raji和Ramos细胞DNA,经亚硫酸盐修饰纯化后,行甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR, MSP)检测Syk启动子区的甲基化情况。 结果: 1经抗Syk抗体免疫组化染色,Syk蛋白阳性反应为棕黄色颗粒,定位于细胞浆;胞浆不着色,视为阴性。Namalwa和Raji细胞中syk表达阳性,Ramos细胞syk表达阴性。Western-blot检测结果显示,Namalwa和Raji细胞表达syk,Ramos细胞中syk表达缺失。 2用RT-PCR方法检测结果显示,Ramos细胞中未检测到syk mRNA表达;Namalwa和Raji细胞中syk mRNA表达阳性。 3 Raji和Ramos细胞在去甲基化试剂5-aza-CdR作用下细胞增殖明显受到抑制。不同浓度5-aza-CdR(终浓度为0.1、0.5、1.0、2.0、5.0μM)作用96小时,均可明显抑制细胞的增殖(P0.05),并具有剂量依赖性;用不同浓度的5-aza-CDR(0μm/L,0.1μm/L,0.5μm/L,1μm/L,2μm/L和5μm/L)处理后,Raji和Ramos细胞出现明显的细胞凋亡现象(P0.05),随着剂量的增加凋亡率明显增加(P0.05);但细胞周期未见明显改变。 4 MSP结果示,Raji和Ramos细胞Syk基因启动子区未见甲基化现象。 结论: 1 Syk在B淋巴瘤细胞株Raji和Namalwa细胞中表达阳性,在Ramos细胞中表达阴性。 2、5-aza-CDR能抑制Raji和Ramos细胞的增殖,并可诱导细胞凋亡,但细胞周期未见明显改变。 3、Raji和Ramos细胞中,Syk基因的沉默与甲基化无关。
【学位授予单位】:河北医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R733.1

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 薛津若;启动子过甲基化——一种新的肿瘤分子标志物[J];湖北预防医学杂志;2003年05期
2 周玉球;DNA甲基化分析技术的研究进展[J];国外医学.遗传学分册;2001年06期
3 单保恩,董青,李宏芬,陈晶,董金琢,马洪;非受体型酪氨酸激酶-Syk蛋白的提取与纯化[J];细胞与分子免疫学杂志;2004年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 汪安兰,何执鼎,罗以,肖立新,刘晰宇,朱跃红;自体造血干细胞移植治疗中、高度恶性淋巴瘤[J];癌症;2003年12期
2 杨艳丽;王晶;赵灵芝;高子芬;景红梅;克晓燕;;40例原发性胃肠道弥漫大B细胞淋巴瘤临床特征、细胞来源与预后分析[J];癌症;2008年06期
3 黄柱华;周争光;陈娟;赵论;;COMxEP方案治疗非霍奇金淋巴瘤疗效观察[J];蚌埠医学院学报;2006年05期
4 张家颖,洪敏,牛爽;心钠素基因甲基化状态与表达调控[J];吉林大学学报(医学版);2003年05期
5 蔡锐刚,周立强,王奇璐;原发乳腺非霍奇金淋巴瘤9例分析[J];白血病;1999年04期
6 陈勤奋,谢彦晖,李佩,谢毅;+4℃保存自体外周血干细胞移植治疗恶性淋巴瘤[J];白血病;2000年03期
7 崔雯,陈辉树,钱林生,许议丹,薛光玉,王蕊,郝玉书;恶性淋巴瘤骨髓累及的细胞化学特点[J];白血病;2000年06期
8 廖小梅,向兵,牛挺,黄杰,刘卫平,李甘地,邓承祺;酷似恶性组织细胞病的淋巴瘤(附6例临床及病理分析)[J];白血病.淋巴瘤;2002年03期
9 庞华,邱丽君,司玉玲;急性淋巴细胞白血病与淋巴瘤细胞白血病的鉴别分析[J];白血病.淋巴瘤;2002年03期
10 谢景荣,李敬兰,李玉明,曹金霓;骨髓巨大淋巴瘤细胞临床探讨[J];白血病.淋巴瘤;2002年04期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 余金德;张伟京;苏航;;原发下颌骨的非霍奇金淋巴瘤1例报告[A];中国科协海峡两岸学术研讨会——2008血液肿瘤论坛会议会编[C];2008年
2 刘清池;冯新旺;马传宝;庞宇慧;王荣孝;武大勇;;鳖甲生血丸为主治疗原发性骨髓纤维化118例疗效观察[A];全国中西医结合血液学学术会议论文汇编[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张永清;BCL-6与非霍奇金淋巴瘤的发生及白血病细胞K562分化和凋亡的关系[D];第四军医大学;2002年
2 刘革修;小鼠胎肝Sca-1~+细胞及人胎肝CD34~+细胞向神经组织细胞分化研究[D];暨南大学;2003年
3 古涛;CD40配基化的肿瘤特异性树突状细胞的免疫治疗作用及其相关机制研究[D];苏州大学;2003年
4 李明;IGSF4基因在白血病细胞甲基化失活的初步研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2004年
5 李红玲;Survivin在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其反义寡核苷酸对淋巴瘤细胞增殖与凋亡的影响[D];第四军医大学;2004年
6 黄燕萍;EB病毒与T细胞淋巴瘤关系的研究[D];中国协和医科大学;2001年
7 王大庆;NES1基因在眼睑基底细胞癌中的表达及其外显子3甲基化状况的实验研究[D];四川大学;2006年
8 史健;人腺上皮肿瘤患者术期化疗后肿瘤组织中Syk表达变化及其临床意义研究[D];河北医科大学;2007年
9 杨立新;ppENK、S100A4及其甲基化在胰腺癌发病机制的研究[D];中国协和医科大学;2006年
10 刘林;Polo样激酶1在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其意义[D];华中科技大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李艳春;骨穿一步法抽吸—活检双标本临床应用价值探讨[D];兰州大学;2010年
2 李占琦;15例毛细胞白血病脾脏的临床病理学研究[D];北京协和医学院;2009年
3 段红丽;叶酸与5-Aza-CdR对CIN阶段细胞P14ARF基因启动子区甲基化的影响[D];山西医科大学;2011年
4 张泽川;异硫氰酸苯已酯对骨髓瘤细胞株U266增殖抑制作用及机制研究[D];福建医科大学;2011年
5 姚玉前;骨髓穿刺涂片和骨髓活检切片对诊断儿童血液系统疾病的临床意义探讨[D];重庆医科大学;2011年
6 孙嘉峰;骨髓增生异常综合征患者骨髓涂片、骨髓活检、免疫表型特点及在诊断中的意义[D];山西医科大学;2012年
7 张蕊;秦巴山区智力低下儿童病因分析及脆性X智力低下(FMR1)基因的甲基化和CGG位点多态性研究[D];西北大学;2003年
8 侯震波;念珠菌多糖升白细胞作用的药效学研究[D];昆明医学院;2003年
9 胡巍;洋葱春化及其生理化特性的研究[D];南京农业大学;2003年
10 王文宏;EB病毒LMP-1、Wnt信号通路的β-cat及其靶基因c-myc在非霍奇金淋巴瘤中的表达和相互关系[D];青岛大学;2003年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 单保恩,董青,王晓玲,陈兴,董金琢,马洪;兔抗Syk抗体制备和在乳腺癌诊断中的应用[J];细胞与分子免疫学杂志;2003年05期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈明霞,丁永斌,戴存才,蒋奎荣,范萍,苗毅;MSP法检测胰腺癌Syk基因甲基化改变的研究[J];河北医学;2003年07期
2 丘相寰;薛绍白;;藤黄酸对Hela细胞及小鼠腹水型肝癌细胞周期的影响[J];江西医药;1984年05期
3 李基业,檀华,蒋彦永,魏文,张双喜;三苯氧胺对MCF-7人乳腺癌细胞系周期动力学影响[J];北京医学;1992年06期
4 李锦云,田开功,李鲲;小儿急性淋巴细胞白血病细胞周期的流式细胞术分析[J];北京医科大学学报;1995年01期
5 何志巍,陈南岳,蔡康荣;蛋白激酶C抑制剂对CNE-2Z细胞周期的影响[J];广东医学院学报;1997年03期
6 严乐勤;Rb基因蛋白与细胞周期调控[J];浙江大学学报(医学版);1997年04期
7 张冬成,陈秉燮,卢诗杰,梅品超;食管癌细胞DNA含量和细胞周期的分析[J];汕头大学医学院学报;1998年04期
8 郑作昱,史成章,牛正先;细胞周期与肿瘤[J];世界华人消化杂志;1998年12期
9 朱建平,朱忠勇,毕东军,施玲辉;诊断剂量彩色多普勒对仔鼠细胞周期DNA含量的影响[J];东南国防医药;1998年02期
10 袁勇,许顶立,刘伊丽,贾满盈;血管平滑肌细胞增殖与Cdk抑制蛋白p27的表达[J];生理学报;1999年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 祝淑钗;刘志坤;杨洁;苏景伟;王玉祥;沈文斌;李娟;;53BP1基因沉默对食管癌细胞照射后细胞周期及相关蛋白表达的影响[A];第五届全国中医药免疫学术研讨会——暨环境·免疫与肿瘤防治综合交叉会议论文汇编[C];2009年
2 张倜;王绍山;王希路;洪立;齐清会;;三氧化二砷诱导大鼠肝癌细胞凋亡及其与细胞周期的关系[A];第七届全国中西医结合普通外科临床及基础研究学术会议论文汇编[C];2001年
3 张静;单保恩;;香加皮杠柳苷对肿瘤细胞周期及p21~(WAF1/CIP1)表达的影响[A];中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要[C];2006年
4 韩锋;李庆文;;Ki-67在膀胱移行细胞癌的表达及其意义[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年
5 徐戎;张悦;王倩;曾繁典;;岩藻黄质(Fucoxanthin)抗肺癌作用及其机制研究[A];中国药理学会第十次全国学术会议专刊[C];2009年
6 司红丽;王建娜;胡延春;王建华;;狗舌草总黄酮对L_(1210)细胞的体外作用研究[A];纪念中国畜牧兽医学会中兽医学分会成立30周年中国畜牧兽医学会中兽医学分会2009年学术年会、华东区第十九次中兽医科研协作与学术研讨会论文集[C];2009年
7 刘志坤;祝淑钗;王玉祥;苏景伟;杨洁;沈文斌;李娟;;MDC1基因沉默对照射后食管癌细胞周期及CHK1 and CHK2蛋白表达的影响[A];中国第九届全国食管癌学术会议论文集[C];2009年
8 刘志坤;祝淑钗;王玉祥;苏景伟;杨洁;沈文斌;李娟;;MDC1基因沉默对照射后食管癌细胞周期及CHK1 and CHK2蛋白表达的影响[A];第五届全国中医药免疫学术研讨会——暨环境·免疫与肿瘤防治综合交叉会议论文汇编[C];2009年
9 苏旭;薛丽香;金光辉;刘建香;付士波;;电离辐射对不同肿瘤细胞细胞周期、细胞凋亡和细胞坏死的影响[A];中华医学会放射医学与防护学分会第二次中青年专题研讨会论文汇编[C];1999年
10 宋关斌;刘保安;秦建;龙勉;蔡绍皙;;肝癌细胞的粘附力学特性及其与细胞周期的关系[A];第七届全国生物力学学术会议论文集[C];2003年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 陈友梅;IDC+管理=MSP[N];中国计算机报;2001年
2 陈代寿;全面把握MSP服务[N];中国计算机报;2001年
3 本报记者 黄果;MSP:企业的网络顾问与保健医生[N];计算机世界;2001年
4 大可;细胞周期钟如何运行(上)[N];大众科技报;2001年
5 大可;细胞周期钟如何运行(下)[N];大众科技报;2001年
6 $$点评人:陆佳韵(现为中国医学科学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点试验室博士生) $$吴旻(中国医学科学院肿瘤研究所细胞生物室主任,我国医学遗传学的奠基人之一);诺贝尔医学奖与细胞周期[N];光明日报;2001年
7 本报记者 彭丹;细胞周期 引爆生命科学新革命?[N];中国医药报;2002年
8 北京大学临床肿瘤学院 柯杨;细胞周期:开辟癌治疗新途径[N];科技日报;2001年
9 ;JN-2518寻求合作[N];医药经济报;2004年
10 本报记者 刘焱焱;EC仍是主角[N];网络世界;2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张振涛;神经元细胞周期调控异常在帕金森病发病机制中作用的研究[D];华中科技大学;2010年
2 张永红;人类在体细胞周期核心机制多样性[D];华中科技大学;2010年
3 任燕;雷公藤氯内酯醇对哺乳动物细胞周期和凋亡的影响[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2004年
4 李明;槟榔碱对上皮细胞周期、凋亡、恶性转化影响的初步研究[D];中南大学;2010年
5 沈曦;组织金属蛋白酶抑制因子-1在肝癌中的功能研究[D];南京师范大学;2002年
6 李静远;人骨髓间充质干细胞端粒调控机制的研究[D];浙江大学;2006年
7 李园园;人增殖细胞核抗原基因的转录调控研究[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2003年
8 秦军;抑制COX-2表达对逆转膀胱癌恶性生物学行为的影响[D];第四军医大学;2005年
9 张凌;口腔上皮细胞与白色念珠菌相互作用的体外实验研究[D];中国医科大学;2005年
10 王纯雁;非甾体类抗炎药物(non-steroidal anti-in-flammatory drugs, NSAIDs)对人卵巢癌细胞系CAOV3抑制机制的研究[D];中国医科大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 彭华;Syk在人B淋巴瘤细胞中的表达及作用机理研究[D];河北医科大学;2007年
2 卢慧敏;人参炔醇对血清刺激大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响[D];江西医学院;2004年
3 刘晶;Rapamycin与As_2O_3联合诱导NB4细胞凋亡及其信号转导机制的研究[D];大连医科大学;2005年
4 单小松;蜈蚣提取物对胶质瘤细胞的体外抑制作用实验研究[D];河北医科大学;2005年
5 张蓓;热化疗对体外肝癌细胞及其对中晚期肝癌抑制作用的研究[D];武汉大学;2005年
6 梁颖;内皮细胞原代培养和伊曲替酸调控的研究[D];天津医科大学;2006年
7 杜凤英;腹腔热化疗对大鼠卵巢癌细胞凋亡的影响[D];大连医科大学;2006年
8 张洋;普伐他汀对人结肠癌细胞增殖及环氧合酶-2蛋白质表达的影响[D];郑州大学;2006年
9 赵德强;姜黄素对人舌鳞癌Tca8113细胞抑制作用的实验研究[D];郑州大学;2007年
10 邢福有;西黄丸含药血清抗人乳腺癌和人卵巢癌作用的研究[D];延边大学;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026