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《河北医科大学》 2008年
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大鼠急性心肌梗死后血清脑钠肽、内皮素-1和一氧化氮的变化及卡托普利对其影响的研究

杜文涛  
【摘要】: 目的:目前,冠心病尤其是急性心肌梗死(AMI),已成为危害人类健康的主要疾病之一。急性心肌梗死发生后,心脏的收缩和舒张功能受损,进而出现心力衰竭的症状和体征,发展为心力衰竭。近年来研究发现心肌梗死后神经内分泌系统的激活,在其向心衰发展过程中起到了决定性的作用:一方面该系统的适度激活可以代偿因梗死区局部心肌坏死、舒缩功能丧失而出现的不利的血流动力学变化,可使血压稳定,重要生命器官得到足够的血液供应;同时过度的激活,则可启动心肌细胞凋亡和心室重塑的过程,并可与后二者形成一个恶性循环,逐渐使心肌梗死后的心脏发展为心力衰竭。所以,探讨急性心肌梗死后神经内分泌系统激活和演变规律,对于心肌梗死的积极诊治具有重要的意义。作为神经内分泌系统中重要的成员,脑钠肽和内皮功能在心血管系统中具有重要而又独特的作用。本研究旨在通过动物实验发现急性心肌梗死后大鼠脑钠肽(BNP)、内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)的变化规律,以及血管紧张素转换酶抑制剂(卡托普利)在干预这些体液因子方面的作用,为心肌梗死的诊治提供新的理论依据。 方法: Wistar大鼠30只,13-16周龄,体重250克左右,均为雄性。术前大鼠被随机分为①对照组(sham group,n=10);②单纯心肌梗死组(AMI group,n=10)③心肌梗死+卡托普利组(AMI+capt group,n=10)。手术过程:大鼠经10%水合氯醛麻醉(35mg/kg腹腔内注射)后,固定于手术台上。行气管插管并连接呼吸机,见大鼠胸廓随呼吸机频率起伏后证明插管成功。设定呼吸参数。75%酒精消毒切口部分,于胸骨左侧做与胸骨平行的纵形切口,约1~1.5cm。分离打开各层肌肉,暴露心脏,挤破心包,迅速弹出心脏,暴露心脏的左室游离壁。在左心耳与肺动脉圆椎之间找到左冠状动脉,在动脉起始点下方2~3mm处,用6-0号丝线结扎左冠状动脉前降支,结扎深度0.3~0.5mm。将心脏送回胸腔,用注射器抽出胸腔内气体,以恢复负压,关闭胸腔,此步骤30s内完成。术中经肉眼观察,梗死区变苍白为结扎成功的标志。缝合各层肌肉,缝皮,撤呼吸机。对照组只开胸不结扎。术后大鼠保温,单笼放置,待清醒后再次称重、编号,按组分笼饲养。以上手术均在无菌条件下进行,术后肌内注射青霉素钠2×105 U/d,连续5天抗感染。严格按照以上规程执行操作,以保证结扎部位、结扎操作时间和其他条件的一致性。 心肌梗死+卡托普利组大鼠于术后将卡托普利(25mg/片,天津力生制药公司生产)按10mg/kg溶于水,立即肌肉注射。以后每日上午按卡托普利50mg/kg溶于水2ml灌胃。对照组和心肌梗死组均肌注和喂给等容量生理盐水。 术后开始计时,于6时、12时、18时、24时、3天、5天、7天和14天(第3天到第14天抽血时间为每天上午8:00)分别抽大鼠静脉血1ml,放于试管中,以3000r/min离心10分钟,并立即用塑料吸管将上层血清转移至离心管中,标上组别、鼠号和时间,置于-80℃冰箱保存,于14天时集中测定BNP、ET-1和NO指标。大鼠血清BNP和ET-1浓度测定采用双抗夹心酶联免疫法,试剂购自于美国Rapidbio(RB)公司,酶标仪为河北医科大学第一医院检验科的型号为TECAN的仪器。大鼠血清NO浓度测定采用硝酸还原酶比色法,试剂购自于南京建成生物工程研究所,仪器为河北医科大学第一医院检验科的721分光光度计。 所有数据用SPSS13.0 for windows软件包进行统计。大鼠血清BNP、ET-1和NO水平及动态变化用重复测量设计的方差分析,当总的组间变异F值有意义时,数据用SNK(Student-Newman-Keuls)检验以比较各组之间均数差异。为比较各具体时间点的组间差异,采用单因素方差分析,若F值有意义时,再用SNK检验。所有数据采用均数±标准误(mean±SEM)表示,检验水准а=0.05。 结果: 1大鼠血清BNP、ET-1和NO水平的组间比较: 1.1 AMI组、AMI+capt组和对照组三组相比,各组间血清BNP和ET-1水平在每个时间点均有明显差异(各P值均0.05),其有AMI组AMI+capt组对照组的大小关系。 1.2 AMI组与对照组相比和AMI组与AMI+capt组相比,血清NO水平在每个时间点均有明显差异(各P值均0.05),其有AMI组对照组和AMI组AMI+capt组的大小关系;AMI+capt组与对照组相比,血清NO水平在7天前的每个时间点均有明显差异(各P值均0.05),有AMI+capt组对照组的大小关系,第7天和第14天时两组水平无差异(P7d=0.164, P14d=0.678)。 2各组大鼠血清BNP、ET-1和NO水平的动态变化: 2.1大鼠血清BNP水平的动态变化AMI组大鼠血清BNP呈双峰分泌,第一峰峰值高于AMI+capt组,出现时间也早,而AMI+capt组血清BNP浓度只有一个峰值,对照组血清BNP浓度变化较平坦。(见Fig.1) 2.2大鼠血清ET-1水平的动态变化AMI组和AMI+capt组大鼠血清ET-1动态变化均有一个峰值,但AMI组峰值高且出现早,对照组血清ET-1浓度变化较平坦。(见Fig.2) 2.3大鼠血清NO水平的动态变化AMI组和AMI+capt组大鼠血清NO动态变化均有一个谷值(最低值),但AMI组谷值低且出现早,对照组血清NO浓度变化较平坦。(见Fig.3) 结论: 1 AMI组大鼠血清BNP和ET-1水平高于对照组,血清NO水平低于对照组,说明血清BNP、ET-1升高和NO降低参与了AMI后病情演变过程。 2 AMI+capt组大鼠血清BNP和ET-1水平低于AMI组,血清NO水平高于AMI组,说明卡托普利能改善AMI后血清BNP、ET-1升高和NO降低程度,对AMI后病情变化有益。 3大鼠AMI后血清BNP的浓度呈双峰分泌,在12.6±0.60小时达到第一峰值(412.00±3.95pg/ml) ,第二峰值(336. 58±1.54 pg/ml)出现在第153.60±7.33小时,此后继续下降,但在第14天时仍高于对照组。大鼠AMI后血清ET-1迅速升高,于7.8±0.92小时达一高峰(272.12±1.27pg/ml)后逐渐降低,在第14天时仍高于对照组。而血清NO迅速降低,于11.4±0.60小时达一低谷(16.98±0.35μmol/L)后逐渐升高,在第14天时仍低于对照组。 4根据AMI+capt组大鼠的血清BNP、ET-1和NO峰值大小和出现时间,进一步说明卡托普利能抑制AMI后神经内分泌激活,使血清BNP、ET-1升高和NO降低程度改善,对AMI后病情大有裨益。
【学位授予单位】:河北医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R542.22

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【参考文献】
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