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《河北医科大学》 2009年
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血管内皮生长因子基因多态性与子宫内膜异位症和子宫腺肌病遗传易感性研究

刘青  
【摘要】: 目的:子宫内膜异位症(endometriosis,EMs,简称内异症)和子宫腺肌病(adenomyosis,简称腺肌病)是妇科常见病和多发病,是遗传因素和环境因素相互作用而引起的多基因遗传疾病。内异症和腺肌病是引起育龄期妇女盆腔疼痛和不孕的重要原因,尽管有多种治疗方法,但效果并不令人满意。究其原因,是此类疾病的病因学和发病机理尚不明确。现在被普遍接受的观点为内异症是由于经血逆流所致,而腺肌病是由于子宫肌壁的防御屏障遭到破坏使子宫内膜得以侵入所致,但无论子宫内膜细胞异位到子宫体以外还是子宫肌层,这种异位的内膜细胞想要存活并发展为内异症或腺肌病,一个必要条件是血管生成。在已知的血管生成因子中,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是生理性及病理性血管生成的最重要调节物,它可直接而特异地作用于血管内皮细胞,导致新生血管形成。人类的VEGF基因启动子区存在一些多态性位点,这些多态性位点可能通过改变基因的转录活性而影响蛋白的表达,导致了人类对疾病易感性的个体差异。研究表明VEGF基因启动子区-1154G/A、-460C/T单核苷酸多态( single nucleotide polymorphisms,SNPs)与多种疾病的发病风险相关。本研究旨在探讨VEGF基因启动子区-1154G/A、-460C/T SNPs与子宫内膜异位症和子宫腺肌病发病风险的关系,进一步阐明子宫内膜异位症和子宫腺肌病的分子生物学机制。 方法:本研究采用病例-对照研究方法,收集344例内异症患者和360例健康对照个体、174例腺肌病患者和199例健康对照个体的静脉抗凝血各5ml,同时记录其病史和个人及家族相关资料。采用蛋白酶K消化-饱和氯化钠盐析法提取外周血白细胞DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性( polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)分析方法检测VEGF基因启动子区-1154G/A、-460C/T基因多态位点的基因型频率分布。数据统计分析采用SPSS11.5版软件包(SPSS Company,Chicago,Illinois,USA)进行。病例组与对照组的年龄差异行t检验。比较各位点基因型频率的观察值与预期值并进行卡方检验行Hardy-Weinberg平衡分析。两组间的基因型分布比较采用行×列表χ2检验。以非条件Logistic回归法计算表示相对风险度的比值比(odds ratio,OR)及95%可信区间(confidence interval,CI)。采用EH软件和2LD软件分别分析VEGF基因启动子区-460C/T,-1154 G/A 2个多态性位点的单倍型频率和等位基因连锁不平衡状态。P0.05作为差异有显著性的标准。 结果:1内异症和腺肌病组患者的年龄、初潮年龄、孕次和产次与其对照组相比,差异无统计学意义(P﹥0.05)。健康对照组中VEGF基因启动子区-1154G/A、-460C/T两个多态位点基因型频率分布均符合Hardy-weinberg平衡(P﹥0.05)。2 VEGF基因启动子区-460C/T多态C、T等位基因频率在内异症和对照组分别为22.7%、77.3%和20.6%、79.4%,两组相比差异无统计学意义(P﹥0.05);C/C、C/T、T/T基因型频率在内异症和对照组分别为3.8%、37.8%、58.4%和4.7%、31.7%、63.6%,两组相比差异无统计学意义(P﹥0.05);与C/T+T/T基因型相比,T/T基因型与内异症的发病风险无关,OR值为0.80(95%CI=0.59~1.09)。3在腺肌病组和对照组中,VEGF基因启动子区-460C/T多态的C、T等位基因频率分别为20.7%、79.3%和22.1%、77.9%,两组相比差异无统计学意义(P﹥0.05);C/C、C/T、T/T基因型频率分别为4.0%、33.3%、62.6%和6.0%、32.2%、61.8%,两组相比差异无统计学意义(P﹥0.05);与C/T+T/T基因型相比,T/T基因型与内异症的发病风险无关,OR值为1.04(95%CI=0.68~1.58)。4在内异症组和对照组中,VEGF基因启动子区-1154G/A多态的三种基因型频率(A/A、G/A、G/G)分别是1.7%、28.8%、69.5%和5.8%、32.8%、61.4%,两组比较差异有统计学意义(P=0.006);等位基因频率分布(G、A)分别是83.9%、16.1%和77.8%、22.2%,两组比较差异有统计学意义(P=0.004);与G/A+ A/A基因型相比,携带G/G基因型可能明显增加内异症的发病风险(OR=1.43,95%CI=1.05~1.96)。5在腺肌病组和对照组中,VEGF基因启动子区-1154G/A多态的三种基因型频率(A/A、G/A、G/G)分别是2.9%、23.6%、73.6%和7.0%、34.2%、58.8%,两组比较差异有统计学意义(P=0.007);等位基因频率分布(G、A)分别是14.7%、85.3%和24.1%、75.9%,两组比较差异有统计学意义(P=0.001);与G/A+A/A基因型相比,携带G/G基因型可能明显增加腺肌病的发病风险(OR=1.95,95%CI=1.26~3.03)。6 VEGF基因启动子区-1154G/A和-460C/T SNPs位点间不存在连锁不平衡(D’=0.34)。 结论:1 VEGF基因启动子区-1154G/A多态可能与子宫内膜异位症和子宫腺肌病的发病风险明显相关,即携带G/G基因型显著增加子宫内膜异位症和子宫腺肌病的发病风险。2 VEGF基因启动子区-460C/T单核苷酸多态可能与子宫内膜异位症和子宫腺肌病的发病风险无关。3 VEGF基因启动子区-1154G/A和-460C/T SNPs位点间不存在连锁不平衡。
【学位授予单位】:河北医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R711.71

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