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高压电烧伤大鼠Ang-Ⅱ和sVCAM-1变化及已酮可可碱干预作用

梁利民  
【摘要】: 目前电烧伤研究中,已观察到高压电烧伤后动物的深筋膜、软脑膜、胃黏膜、肠黏膜、肠系膜、肝脏、肾皮质等多部位发生微循环障碍。微血管的功能变化在微循环障碍的发生中起到至关重要的作用。血管紧张素Ⅱ(angiotensin-Ⅱ, Ang-Ⅱ)可作用于血管平滑肌使血管强烈收缩,同时影响血管内皮细胞分泌NO等血管舒张因子,调节血管功能变化;血管细胞黏附分子-1(soluble Vascular Cell Adhesion Molecule-1 ,sVCAM-1)形成与内皮细胞激活有关,可反映血管内皮细胞的损伤程度。为此设计本次实验,观察两者变化探讨高压电烧伤后微循环障碍发生机制。 目的: 通过检测高压电烧伤前、后及己酮可可碱干预治疗后大鼠血清中Ang-Ⅱ及sVCAM-1的浓度变化,探讨高压电烧伤早期微循环障碍的发生机制。 方法: 采用随机单位组析因设计。成年健康SD大鼠180只,雌雄不拘,雌鼠未孕,体重320g~380g。随机分为假高压电烧伤组(对照组),高压电烧伤组(电击组)和高压电烧伤后己酮可可碱干预组(治疗组),分别于高压电烧伤前1 h、高压电烧伤或给药即刻(15 min)、高压电烧伤后1 h、2 h、4 h、8 h(分别记录为T0、T1、T2、T3、T4、T5)6个时相采血检测血清中Ang-Ⅱ和VCAM-1的含量,每时相10只SD大鼠。1%戊巴比妥钠溶液(45mg/kg剂量)腹腔注射麻醉,麻醉成功后将大鼠左前肢、右后肢及胸、腹部备皮、脱毛,随后将脱毛完毕的大鼠仰卧位固定于绝缘台上,并正确连接线路,左前肢为“电流入口”,右后肢为“电流出口”。调额定电压至2KV,通电3s,电流强度为1.83±0.15A。电击即刻,可见大鼠全身痉挛、僵直,断电后,立即对大鼠进行适当胸外按压,以保证大鼠心肺功能。电击后可见“入口”、“出口”深达肌肉、骨骼,其边缘苍白、焦黄、炭化,部分动物远端肢体离断,高压电烧伤实验动物模型复制成功〔1-4,9〕。治疗组大鼠,断电后即刻(1 min),腹腔注射1%己酮可可碱氯化钠注射液(50mg/Kg剂量)〔10-14〕;对照组和电击组注射等量生理盐水。对照组采用假电方法制作假电烧伤模型。假电方法:实验前断开380V电源,确保电路中无电流通过,其余同电击组电烧伤模型复制方法。采血方法:打开胸腔,暴露心脏,直视下自心尖部穿刺采血8ml~10ml,分置于PE管中。室温静置30min,待血液凝固,以1000×g 15min离心,收集血清,置于超低温冰箱-70℃冷冻保存待用。用Ang-ⅡELSIA试剂盒和sVCAM-1 ELSIA试剂盒,按说明书要求进行检测,酶标仪测定吸光度值。所得数据为计量资料,数据用x±s表示,应用SPSS13.0统计软件包,采用随机单位组析因设计方差分析进行不同时间、处理的主效应和交互效应分析(交互效应配合交互轮廓图)。采用单因素方差分析方法进行各时间、处理单独效应的分析,多重比较采用SNK法。以P0.05有显著性检验水准。 结果: 1 Ang-Ⅱ检测结果 1.1 Ang-Ⅱ交互效应检测结果 1.1.1不同时相检测结果之间有显著性差异(P0.05),T0 T1时相检测结果之间无显著性差异(P0.05),T2 T3 T4时相检测结果之间无显著性差异(P0.05),T3 T4 T5时相检测结果之间无显著性差异(P0.05),其余任两时相间均有显著性差异(P0.05)。 1.1.2.不同组检测结果之间有显著性差异(P0.05),电击组、治疗组组间检测结果之间无显著性差异(P0.05),其余任两组间均有显著性差异(P0.05)。 1.1.3电击和时间对于Ang-Ⅱ检测结果存在交互作用,交互作用后的检测结果之间有显著性差异(P0.05)。 1.2 Ang-Ⅱ单独效应检测结果 1.2.1 Ang-Ⅱ组内各时相间检测结果两两比较: 1.2.1.1对照组:组内各时相间浓度值总体比较无显著性差异(P0.05) 1.2.1.2电击组:除T0 T1时相间浓度值比较无显著性差异(P0.05),T3、T2、T5、T4时相间浓度值比较无显著性差异(P0.05),其余任两组间比较均有显著性差异(P0.05) 1.2.1.3治疗组:除T0 T2 T1时相间浓度值比较无显著性差异(P0.05),T2 T1 T4时相间浓度值比较无显著性差异(P0.05),T4T3时相间浓度值比较无显著性差异(P0.05),T3 T5时相间浓度值比较无显著性差异(P0.05),其余任两组间比较均有显著性差异(P0.05) 1.2.2 Ang-Ⅱ检测结果的同时相组间比较 1.2.2.1 T0时相:对照组、电击组、治疗组三组组间浓度值比较无显著性差异(P0.05) 1.2.2.2 T1时相:对照组、电击组组间浓度值比较无显著性差异(P0.05);其余任两组间比较均有显著性差异(P0.05) 1.2.2.3 T4任两组间比较均有显著性差异(P0.05) 1.2.2.4 T3 T5时相电击组、治疗组组间浓度值比较无显著性差异(P0.05);其余任两组间比较均有显著性差异(P0.05) 2 sVCAM-1检测结果 2.1 sVCAM-1交互效应检测结果 2.1.1不同时相检测结果之间有显著性差异(P0.05),T4 T5时相检测结果之间无显著性差异(P0.05),T5 T1 T3时相检测结果之间无显著性差异(P0.05),其余任两时相间均有显著性差异(P0.05)。 2.1.2不同组检测结果之间有显著性差异(P0.05),任两组间均有显著性差异(P0.05)。 2.1.3电击和时间对于Ang-Ⅱ检测结果存在交互作用,交互作用后的检测结果之间有显著性差异(P0.05)。 2.2 sVCAM-1单独效应检测结果 2.2.1sVCAM-1组内各时相间检测结果两两比较 2.2.1.1对照组:组内各时相浓度值比较均无显著性差异(P0.05) 2.2.1.2电击组:除T5 T1时相间浓度值比较无显著性差异(P0.05),T1 T4 T3时相间浓度值比较无显著性差异(P0.05),其余任两组间比较均有显著性差异(P0.05) 2.2.1.3治疗组:除T0 T4时相间浓度值比较无显著性差异(P0.05),T5、T3、T2、T1时相间浓度值比较无显著性差异(P0.05),其余任两组间比较均有显著性差异(P0.05) 2.2.2 sVCAM-1检测结果的同时相组间比较 2.2.2.1 T0时相:对照组、电击组、治疗组三组组间浓度值比较无显著性差异(P0.05) 2.2.2.2 T1、T2、T3、T5时相:任两组间比较均有显著性差异(P0.05) 结论: 1高压电烧伤早期实验大鼠血清中Ang-Ⅱ和sVCAM-1的含量均有显著增加,可作为机体发生微循环障碍的参考指标。 2己酮可可碱治疗可减少高压电烧伤后大鼠血清中Ang-Ⅱ含量,同时Ang-Ⅱ含量亦随时间延长而减少。 3高压电烧伤后大鼠血清中sVCAM-1含量变化可一定程度反映己酮可可碱改善微循环障碍的疗效。


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