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《河北医科大学》 2010年
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季节变化对呼吸系统免疫调节机制影响的研究

卢志刚  
【摘要】: 季节气候是人类赖以生存的基本条件,其变化也容易导致疾病的发生,尤其对呼吸系统疾病的发生影响比较显著。季节气候的变化刺激机体后,免疫系统必将起到相应的免疫防御和免疫自稳作用,季节变化影响到呼吸系统时会引起局部免疫平衡的波动,如果超过人体生理范围将导致呼吸系统疾病的发生。呼吸系统免疫调节是一个精细的受严格调控的过程。存在于呼吸系统的固有和适应性免疫机制共同抵御不利因素的侵袭,保证了呼吸系统正常生理功能的进行。研究发现,呼吸系统疾病的季节易感性与人类抵抗感染性疾病的基础—-免疫功能的季节性调节紊乱关系密切,如果免疫系统这种的季节性变化规律及其机制能被发现,将会在呼吸系统疾病的防治方面产生重大的影响。因此,了解呼吸道免疫自稳状态及其调控机制的季节性变化规律对提高呼吸系统疾病的诊断、治疗及预后判断具有重要意义。 在呼吸系统免疫防御功能中,行使固有免疫防御功能的免疫相关物质,如自然杀伤淋巴细胞、干扰素、细胞因子和行使适应性免疫防御功能的免疫相关物质,如T淋巴细胞以及与呼吸系统防御相关的免疫分子,如肺表面活性物质都成为人们的研究热点。 “天人相应”理论是中医学理论体系的重要组成部分,该理论认为人和自然环境是一个有机整体,两者的运动变化可直接或间接地相互影响,机体也相应地随自然变化出现生理或病理上的反映。随着现代医学神经神经-内分泌-免疫网络的发现,人们认识中医肺脏整体功能的与西医学呼吸系统之间存在者很多相似之处,中医对卫气的认识也与现代医学的免疫功能类似等。中医学认为肺卫功能正常是机体防御病邪的重要基础。这为从中西医结合角度研究它们之间的关系提供了很好的桥梁和纽带。 目前从临床实践中可证实“天人相应”理论的科学性,尤其是肺与季节气候发病的关联性,但是季节如何影响人体呼吸系统免疫功能的,其免疫物质基础尚不十分清楚。近年来,许多学者对“天人相应”理论的科学内涵从各个角度进行了探讨,尤其是随着现代免疫学的发展,人们从免疫学的角度发现中医的这些理论与现代医学的一些研究结果不谋而合,季节变化对呼吸系统免疫功能影响以及调节作用机制方面的研究虽然取得一些进展,但具体机制仍不明确。本课题以“天人相应”理论和肺卫理论为基础,就季节变化对呼吸系统免疫物质的影响提出假设,以期验证其与免疫物质的活动变化相关性,为临床上常见的呼吸系统疾病季节性发病提供一定的实验依据,同时在预防和保健领域亦具有重要的参考价值。 本实验内容主要包括以下三部分: 第一部分:季节变化对健康大鼠肺组织IL-1?、IL-2、IL-6、IL-10和SP-A表达的影响 目的:通过观察季节变化过程中大鼠肺组织IL-1?、IL-2、IL-6、IL-10和SP-A的表达,探讨季节变化对大鼠肺脏免疫调节的作用机制,为呼吸系统季节性发病的病理生理机制的认识提供实验依据。 方法:清洁级健康3月龄雄性SD大鼠64只,体质量180-220克,分别按购买时间分为立春、春分、立夏、夏至、立秋、秋分、立冬、冬至8个组(n=8)。分别于节气前14天购入实验大鼠。自由摄取水及普通鼠全价颗粒饲料,室温饲养,接受自然光照。饲养到相应节气,于当日下午6时将动物断头处死,取出大鼠全肺组织进行IL-1?、2、6、10和SP-A mRNA检测。 结果: 2季节变化对健康大鼠肺组织IL-1?表达的影响 在正常生理状态下,全年健康大鼠肺组织中IL-1? mRNA表达呈现出夏季较高,春秋冬季较低(立夏春分夏至立春立冬冬至立秋秋分)的变化趋势。半定量PCR结果显示春分、立夏、夏至相对表达水平,较其他组均有显著性升高(P0.05或P0.01)。秋冬季节各组间相互比较无显著性差异(P0.05)。 3季节变化对健康大鼠肺组织IL-2表达的影响 在正常生理状态下,全年健康大鼠肺组织中IL-2 mRNA表达呈现出春夏季较高,秋冬季较低(春分夏至立夏立春冬至立秋秋分立冬)的变化趋势。半定量PCR结果显示与春分、立夏组和夏至组相对表达水平比较,其他组明显降低(P0.01)。秋冬季节各组间相互比较无显著性差异(P 0.05)。 4季节变化对健康大鼠肺组织IL-6表达的影响 在正常生理状态下,全年健康大鼠肺组织中IL-6 mRNA表达呈现出夏季较高,冬季较低,春秋次之(夏至立夏立秋立春春分秋分立冬冬至)的变化趋势。半定量PCR结果显示与立冬和冬至组比较,立春、春分、立夏、夏至和立秋组显著性升高(P0.05或P0.01);与夏至组比较,春分、秋分、立冬和冬至组显著性降低(P0.05或P0.01);与立秋组比较,秋分、立冬和冬至组显著性升高(P0.05)。 5季节变化对健康大鼠肺组织IL-10表达的影响 在正常生理状态下,全年健康大鼠肺组织中IL-10 mRNA表达呈现出夏秋季较高,冬春较低(夏至秋分立秋立冬立夏春分立春冬至)的变化趋势。半定量PCR结果显示与夏至组比较,立春组和冬至组显著性降低(P0.05)。 6季节变化对健康大鼠肺组织SP-A表达的影响 在正常生理状态下,健康大鼠肺组织中SP-A mRNA在春夏季节明显增加,秋冬季节中SP-A mRNA表达较少(夏至春分立夏立春立秋秋分冬至立冬)的变化趋势。半定量PCR结果显示与春分和夏至组比较,立秋、秋分、立冬和冬至组显著性降低(P0.05或P0.01);与立冬组比较,其他各组均显著性升高(P0.05或P0.01)。 结论:季节通过调节大鼠肺组织中IL-1?、2、6、10和SP-A的含量的变化来影响肺的免疫防御功能,其中IL-1?、2、6、10和SP-A可能是机体免疫功能季节性变化的中介物质基础。肺部免疫防御功能大致存在春夏较高,秋冬季低的季节节律,这可能是秋冬季节呼吸系统多发病的病理生理学基础之一。第二部分:季节变化对健康大鼠血清Th1和Th2型细胞因子的调节作用及肺组织形态学的影响 目的:本部分研究通过建立自然环境下大鼠动物模型,旨在通过观察不同季节气候条件下大鼠血清中Th1和Th2型细胞因子(IL-10和INF-γ)含量的变化以及肺组织形态学的改变,以期阐释季节变化影响呼吸系统中Th1和Th2免疫平衡的调节作用及其机制,为指导临床实践提供一定的理论依据。 方法:动物分组及标本取得同第一部分。组织学观察:动物断头后,迅速开胸取右肺中叶,用4%多聚甲醛固定,脱水、包埋、切片,苏木精-伊红HE染色,镜下观察形态学改变。IL-10和IFN-γ水平的检测:大鼠血清离心后,取上清,采用双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清中的IFN-γ水平,放射免疫分析法检测IL-10水平。 结果: 1季节变化对健康大鼠肺组织形态学的影响 春夏秋季组:大鼠肺组织支气管内及周围结构连续,无明显炎性细胞浸润,组织黏膜未见充血水肿渗出及肺泡间隔狭窄,肺泡腔清亮宽敞无扩大。立冬组和冬至组:可见肺泡腔变窄,肺泡间隔变大,无明显炎性细胞浸润以及黏膜充血水肿。 2季节变化对正常大鼠血清Th1型细胞因子IFN-γ含量的影响 在正常生理状态下,全年健康SD大鼠血清中IFN-γ呈现出冬季较低,其他季节较高(立夏春分立春立秋秋分夏至冬至立冬)的变化趋势。与立冬组和冬至组比较,其他各组均显著性升高(P0.05或P0.01);立夏组较夏至组、立秋组、秋分组、立冬组和冬至组均显著性升高(P0.05或P0.01);春分组较夏至组、秋分组、立冬组和冬至组均显著性升高(P0.05或P0.01)。 3季节变化对正常大鼠血清Th2型细胞因子IL-10含量的影响 在正常生理状态下,全年健康SD大鼠血清中IL-10呈现出夏季较高,其他季节较低(立夏夏至立冬立春冬至立秋春分秋分)的变化趋势。与秋分组比较,其他各组显著性升高(P0.05或P0.01)。春夏冬季节间比较无显著性差异(P0.05)。 结论:季节变化过程中大鼠血清中IFN-γ和IL-10的含量发生了季节性变化,季节通过调节它们的含量来影响机体Th1/Th2免疫平衡。冬季机体可能通过降低IFN-γ含量,升高IL-10含量,降低呼吸系统免疫功能,导致多种呼吸系统疾病疾病的发生。 第三部分:季节变化对健康人外周血CD3+、CD4+、CD8+和CD56+淋巴细胞比率的影响 目的:通过在季节不同时点对健康人外周血CD3+、CD4+、CD8+和CD56+淋巴细胞的检测,探讨季节变化对人体免疫功能的影响,为“天人相应”理论应用于临床呼吸系统疾病的防治提供确切的客观指标。方法:选取我校2007级新入学的学生志愿者20名,男女各10例,均经我校附属医院体检合格,无各种感染、无急慢性口腔鼻咽疾病、肿瘤、免疫系统疾病或肝肾功能不全等病史,且在实验期间内未使用抗生素、非甾体类消炎药及影响免疫系统功能的药物。分别于8个节气不同实验日前7天充分休息且处于室内外自然环境状态下,于实验日下午在安静空腹状态下抽取2mL外周血。应用流式细胞术对外周血中CD3+、CD4+、CD8+、CD56+淋巴细胞进行分析。 结果: 1季节变化对健康人外周血CD3+淋巴细胞数量的影响 全年健康人外周血中CD3+T淋巴细胞比率呈现出夏季较高,冬季较低,春秋季节次之(夏至立夏立秋立春春分秋分立冬冬至)的变化趋势。与立夏组和夏至组比较,立冬组和冬至组CD3+T淋巴细胞比率均显著性下降(P0.01)。 2季节变化对健康人外周血CD56+淋巴细胞数量的影响 全年健康人外周血中CD56+自然杀伤淋巴细胞比率呈现出夏季较高,春秋冬季节较低(立夏夏至春分立冬立秋立春秋分冬至)的变化趋势。各季节组未见显著性差异(P0.05)。 3季节变化对健康人外周血CD4+T淋巴细胞比率的影响 全年健康人外周血中CD4+T淋巴细胞比率呈现出夏季较高,冬季较低,春秋季节次之(夏至立夏春分立春立秋秋分冬至立冬)的变化趋势。与立夏组和夏至组比较,立冬组和冬至组CD4+T细胞均显著性下降(P 0.05)。 4季节变化对健康人外周血CD8+T淋巴细胞比率的影响 全年健康人外周血中CD8+T淋巴细胞比率呈现出冬季较高,夏季较低,春秋季节次之(冬至立秋立春立冬秋分春分立夏夏至)的变化趋势。与夏至组比较,冬至组CB8+T细胞比率均显著性上升(P0.05)。 5季节变化对健康人外周血CD4+/ CD8+ T细胞比值的影响 全年健康人外周血中CD4+/ CD8+T细胞比值呈现出夏季较高,冬季较低,春秋季节次之(夏至立夏春分立春立秋秋分立冬冬至)的变化趋势。与立夏组比较,冬至组CD4+/ CD8+比值显著性下降(P0.05);与夏至组比较,立秋组、秋分组、立冬组和冬至组CD4+/ CD8+比值显著性下降(P0.05或P0.01)。 结论:季节变化对机体细胞免疫功能具有一定的调节作用,免疫功能存在春夏季强秋冬季弱的变化趋势,与中医天人相应和肺卫防御理论的认识是一致的。春夏季可能通过调节人体外周血中CD3+、CD4+、CD8+T细胞数量,使CD4+T细胞升高,而CD8+T细胞降低,上调CD4+/CD8+比例,起到免疫增强作用。
【学位授予单位】:河北医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R56

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5 记者 蓝建中;日本研究:骨髓移植使大鼠血管“返老还童”[N];新华每日电讯;2010年
6 记者 姜澎;聪明大鼠 解密大脑记忆功能[N];文汇报;2009年
7 万姗姗 记者 王春;转基因“聪明大鼠”学得快记得牢[N];科技日报;2009年
8 记者 曹继军 颜维琦 通讯员 孙国根;大鼠基因功能图谱被成功绘制[N];光明日报;2014年
9 记者 白毅 通讯员 孙国根;大鼠基因功能图谱绘制成功[N];中国医药报;2014年
10 记者 孙国根;将大鼠基因的功能“对号入座”[N];健康报;2014年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 付德明;氯沙坦对慢性心力衰竭大鼠β_1肾上腺素能受体信号转导通路与心功能的调节及其机制研究[D];山西医科大学;2009年
2 杨少兵;N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基镇痛疫苗应用于大鼠的安全性评价[D];华中科技大学;2009年
3 盖建芳;低出生体重对大鼠肾脏和血压的影响及机制研究[D];中南大学;2009年
4 史敏;慢性间歇性低压低氧抗大鼠胶原诱导性关节炎作用及其免疫学机制[D];河北医科大学;2011年
5 安平;柴夏煎对甲亢大鼠的影响及作用机理研究[D];黑龙江中医药大学;2005年
6 周宜;从大鼠性周期的分子变化探讨柴胡止血液的作用[D];成都中医药大学;2005年
7 张庆红;白细胞介素2和雌激素受体在大鼠垂体前叶的相互关系研究[D];第四军医大学;2000年
8 张海峰;骨髓间充质干细胞移植对大鼠急性肝功能衰竭治疗作用的实验研究[D];山东大学;2007年
9 常薪霞;盐酸小檗碱对高脂饮食诱导的SD大鼠非酒精性脂肪肝的疗效及机制研究[D];复旦大学;2010年
10 顼红雨;早期应激对海马学习、记忆功能的作用和机制研究[D];第三军医大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李宁;铅、镉、铬、汞对大鼠听力的损伤及铜、锰、锌、硒的保护作用研究[D];山东大学;2008年
2 王莹;慢性肾衰竭大鼠全段甲状旁腺激素与心肌肌钙蛋白的相关性分析[D];山西医科大学;2008年
3 邓旭辉;养精种子汤对缺氧雄性大鼠生殖机能的影响[D];第三军医大学;2008年
4 夏长青;活血降脂灵对早期动脉粥样硬化大鼠的抗氧化应激作用研究[D];河北医科大学;2009年
5 王海燕;运动对SD大鼠与GK大鼠骨骼肌中COUP-TF Ⅰ与COUP-TFⅡ基因表达的影响[D];华东师范大学;2010年
6 吉星;知母提取物的成分分析及对T2DM大鼠干预代谢组学初探[D];广东药学院;2010年
7 曾志;促红细胞生成素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤神经保护作用的研究[D];暨南大学;2011年
8 汪春彦;金荞麦对克雷伯杆菌肺炎大鼠的保护作用及其机制[D];安徽医科大学;2011年
9 王媛媛;胡芦巴总皂苷对大鼠脂肪肝的预防作用[D];新疆医科大学;2005年
10 徐莉;康复训练对脑梗死大鼠大脑可塑性机制的研究[D];第四军医大学;2002年
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