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高压电烧伤大鼠血清selectin(P,E,L)动态变化及已酮可可碱的干预作用

魏伟  
【摘要】: 目的:前期实验研究工作,观察到实验高压电烧伤后动物的大体标本肠系膜、肠黏膜、肾皮质、肝脏、胃黏膜、深筋膜、软脑膜等的微循环变化,发现高压电不仅引起外周组织微循环紊乱,而且还引起远隔器官的微循环紊乱,从而导致全身性微循环障碍,引起机体损伤,微观的表现可以观察到白细胞沿壁翻滚及黏附、白色微小血栓流动及红细胞聚集现象等。已有实验证明黏附分子选择素家族在白细胞沿壁翻滚及早期黏附中起着重要作用。我们设计本实验旨在通过观察高压电烧伤selectin (P, E,L)的连续变化,进一步探讨高压电烧伤微循环紊乱的机制,及己酮可可碱对血清选择素表达的干预,为高压电烧伤后微循环障碍防治提供理论依据,尽最大可能的降低病人的死亡率,提高生存率。 方法: 1.实验动物分组:成年健康雄性SD大鼠(河北医科大学动物实验中心提供,合格证编号902059)180只,随机分成三组,分别为高压电烧伤实验组(简称实验组)、高压电烧伤己酮可可碱(PTX)治疗组(简称治疗组)与假高压电烧伤组(简称对照组),每组各60只。对照组、高压电烧伤实验组和PTX治疗组又分别分为电击前(To)、电击即刻(15min内)(T1)、伤后1h(T2)、2h(T3)、4h(T4)、8h(T5)6个不同的时相,每组10只。各组分别编号后分笼饲养。 2.实验前准备:大鼠称重,按大鼠编号记录在册。将实验药品按实验需要配成所需浓度。 3.高压电烧伤模型复制:将变压器及调压器正确连接待用,用1%戊巴比妥钠按40mg/kg给药麻醉大鼠,待麻醉成功后,给予大鼠左上肢、右下肢及胸部备皮,然后将大鼠仰卧于动物绝缘台上,四肢伸展固定于高压输出电路之间,并分别固定1 cm2圆形铜制电极片于大鼠的左上肢、右下肢脱毛区,左上肢为入口,右下肢为出口。接通电源调整变压器输出电压2千伏,给予实验组与治疗组实验动物分别电击三秒钟,对照组给予假电,其他条件各组均相同。治疗组在电击后即刻腹腔注射1%PTX(按50mg/kg即5ml/kg给药),对照组及电击组电击即刻腹腔给予注射5ml/kg生理盐水。 4.标本采集与保存:将复制成功高压电烧伤大鼠模型麻醉后开胸,直视下心脏取血,收集4ml全血置于普通塑料试管中静置,约30分钟后待血清析出后上离心机以3000转/分离心,取上清液,置于Eppendorf管中-70℃保存待用。 5.指标检测:采用ELISA双夹心抗体法分别检测电烧伤早期不同时相血清中selectin (P, E, L)动态变化情况,及己酮可可碱对三项指标的干预效果。 6.实验数据处理:所有计量资料用SPSS 16.0统计软件进行统计学分析处理,实验数据均以均数±标准差(x±s)表示,采用两因素析因设计的方差分析对实验得到数据进行分析,P0.05有显著性差异。 结果:血清selectin (P, E, L)的变化 (1)对照组组内比较无显著性差异(P0.05)。 (2)高压电烧伤后早期实验组不同时相血清selectin (P, E, L)水平高于对照组及电前selectin (P, E, L)的水平(P0.05);其中E-selectin表达水平是从电击后1h开始增高;P-selectin伤后4h表达量达到高峰,并持续到8 h; E-selectin伤后4h表达量达高峰,以后随时间下降;L-selectin伤后2h表达量即达高峰,随时间逐渐下降,但到伤后8h仍高于对照组。 (3)高压电烧伤后早期PTX治疗组不同时相血清selectin(P,E,L)高于对照组及电前血清selectin (P, E, L)的水平(P0.05),但同一时相较电击组血清selectin (P, E, L)的水平有不同程度下降(P0.05);其中E-selectin的水平从伤后1h起开始高表达;大鼠血清selectin (P, E, L)的水平在8h时相电击组与治疗组组间比较有所降低,但无显著性差异(P0.05)。 结论: 1.实验高压电烧伤早期大鼠血液中的可溶selectin (P, E, L)表达均有不同程度升高,通过增加白细胞贴壁滚动及黏附,在造成微循环障碍方面有重要作用。 2.高压电烧伤早期PTX治疗组selectin (P, E, L)与实验组比较明显降低,但仍高与对照组,PTX治疗可以不同程度降低selectin (P, E, L)的水平,减轻白细胞黏附,从而缓解微循环紊乱。


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