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《河北农业大学》 2011年
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转基因培养料与平菇间基因水平转移现象的研究

闫燕  
【摘要】:基因漂移现象是指生物的目标基因向附近野生近缘种的自发转移的现象。根据农作物种植面积推理,中国多于一半的棉籽壳是转Bt基因抗虫棉棉籽壳,其中绝大部分都用于平菇的栽培。如果棉籽壳中转基因外源基因向外界生物自然转移就会产生基因漂移。因此,研究Bt基因的去向就显得十分重要。 1、本研究利用转基因棉籽壳栽培平菇,了解转基因棉籽成分对平菇生长的影响。结果表明,两种培养料栽培的平菇在产菇外观形态等特性上没有太大差异,说明转基因棉籽壳可以作为栽培平菇的配料。 2、本实验成功比较了CTAB法、SDS-CTAB法以及磁珠提取法三种提取平菇基因组DNA的方法,并通过紫外分光光度计,限制性酶切及PCR检测来衡量基因组质量。结果表明,SDS-CTAB法以及磁珠提取法提取的平菇DNA能够满足分子水平操作的要求,两者相比,前者成本较低,后者产率较高。考虑到成本原因在后续实验中选用SDS-CTAB法进行外源基因检测。 3、考虑到成本原因在后续实验中选用SDS-CTAB法提取平菇基因组进行外源基因检测,利用PCR方法成功从几代平菇组织中检测到CaMV35S启动子片段、NOS终止子片段、Sad棉籽内标基因片段,Bt基因片段(CrylAbc),说明平菇栽培过程中细胞可能接受外源DNA片段。 4、利用Trizol法提取平菇子实体RNA以及RT-PCR,检测在转录水平上是否发生基因漂移现象。结果表明,在转录水平上平菇没有接受外源片段。
【学位授予单位】:河北农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S646.14

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【参考文献】
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