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《河北农业大学》 2012年
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耐低磷转录因子GmPTF1表达载体构建及转化大豆研究

郑醒  
【摘要】:磷对于大豆新陈代谢和生长发育具有重要作用,缺磷将使大豆营养器官生长受到严重抑制。本研究在已克隆转录因子GmPTF1基础上,构建基因的真核表达载体,转化拟南芥,研究基因的生物学功能;同时,利用农杆菌介导与花粉管通道转化技术,将GmPTF1转入不同大豆品种,创制转基因新材料,为培育耐低磷新品种提供重要资源。主要研究结果如下: 1.构建了转录因子GmPTF1真核表达载体:采用植物超表达载体pGN与无标记(Marker-free)表达载体pX6,构建完成转录因子基因GmPTF1的超表达载体pGN-GmPTF1和无标记表达载体pX6-GmPTF1。 2.研究了转录因子GmPTF1在拟南芥中的生物学功能:利用农杆菌介导技术将pGN-GmPTF1和pX6-GmPTF1转入拟南芥,获得了转有pGN-GmPTF1的T2代植株;经分析T2代拟南芥与野生型发现,超表达转基因拟南芥在低磷胁迫处理下的生长状况优于野生型,表明GmPTF1具有提高拟南芥耐低磷的作用。 3.完成了耐低磷转录因子GmPTF1转化不同大豆品种:利用农杆菌介导与花粉管通道转化技术,将表达载体pGN-GmPTF1和pX6-GmPTF1分别转化冀豆12、冀豆16、五星1号和鲁冠豆1号,经PCR检测获得了65棵T0,13棵T1(9个株系),38棵T2(6个株系)和3棵T3代(2个株系)阳性植株。 4.获得了6个转GmPTF1基因大豆新材料:经PCR、RT-PCR与基因测序分析,证实耐低磷转录因子GmPTF1已整合至大豆基因组,且能够正常转录;目前已获得6个转GmPTF1基因大豆新材料(JPF-1、JPF-2、JPF-3、JPF-4、JPF-5、WPF-1)。
【学位授予单位】:河北农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:S565.1

【参考文献】
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