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《河北农业大学》 2001年
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Studies on Production and regulation of the Inulinase by Aspergillus niger Ur-2

马爱进  
【摘要】: 本文对黑曲霉Uγ-2菊粉酶的产生过程进行了研究。结果表明:发酵初期 产酶速率较快,pH下降速度快。在发酵进行到96~120h期间,出现产酶的 迟缓期,此时发酵液的pH为4.38~4.22;以后菊粉酶活力明显上升。在192h 菊粉酶活力达到最高值,发酵液pH降到最低点(3.54)。在发酵进程中,发酵 液可溶性蛋白出现2个高峰,与菊粉酶活力变化曲线比较,表明在72h出现 的第一高峰主要是杂蛋白;在192h出现的第二高峰主要表现菊粉酶的产生。 与生物量的变化曲线比较,尽管在发酵初期产酶速率较快,但菊粉酶在发酵液 中大量积累出现在120h后(对数增长期的后期)。 本研究通过采用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析方法,研究了细胞外菊粉酶、 细胞内菊粉酶和细胞壁菊粉酶酶组分的构成和动态变化。结果表明:三部分菊 粉酶在酶组分构成上存在着显著的差异,并且细胞内无细胞外菊粉酶组分,因 此可推测出细胞外菊粉酶的分泌方式为同转译分泌;细胞外菊粉酶各组分合成 之后同时分泌出来。在不同发酵时期测定细胞外、细胞内和细胞壁菊粉酶活力 研究酶活力变化趋势,结果表明,细胞外菊粉酶活力在发酵192h后达到最高 值,细胞外菊粉酶的合成与细胞生长同步进行,属于延续合成型的酶。在发酵 24~48h之间,细胞内菊粉酶活力下降较快,48~120h胞内酶活力降低缓 慢,120h后细胞内菊粉酶活力变化不大。而细胞壁菊粉酶24h酶活力最高, 24~48h酶活力急剧下降,48h以后酶活力基本保持不变。 研究了环境因素对菊粉酶合成和分泌的影响。结果表明,菊粉对细胞外 菊粉酶的合成有一定的诱导性,菊粉降解产物果糖和葡萄糖对细胞外菊粉酶的 合成无抑制作用,通过流加葡萄糖的方法可以提高酶活力20.91U。添加吐温 80未提高细胞外菊粉酶的产量;在培养基中加入玻璃珠破坏菌丝球的形成降 低了菊粉酶活力;加入脱壁酶促进酶产生,酶活力提高了30.72U。
【学位授予单位】:河北农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:Q936

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【参考文献】
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