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《河北农业大学》 2003年
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小麦EST-SSR标记作图及抗白粉病基因Pm2和Pm21的SSR标记研究

李勇  
【摘要】: 本研究利用Opata85×W7984亲本组合的F_8代重组近交系群体及基于中国春的缺-四体材料,进行小麦及其近源种属的基因表达序列标签的序列分析、EST-SSR引物的设计及相关作图。同时,以Mardler×百农3217亲本组合、Mardler×北京837亲本组合及Pm21×百农3217亲本组合的3个近等基因系材料以及北京837×Mardler的F_2分离群体进行了小麦抗白粉病基因Pm2和Pm21的分子标记研究,试验结果如下: 1.分析dbEST数据库中的EST序列,通过Primer3、DNAStar、Oligo等软件设计SSR引物597对,并通过PCR扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳对引物的退火温度、扩增片断长度、扩增强弱、背景深浅等特性进行了统计、记录。 2.以Opata85和W7984亲本材料从597个SSR引物中筛选出多态性引物109个;利用Opata85×W7984的F_8代重组近交系进行群体测验,并通过MAPMAKER和GENEMAP软件将其中65个标记位点定位在小麦遗传图上进行了精确定位。 3.利用84个SSR引物(Xgwm系列)对36份缺-四体材料进行验证,证明其中的16份为真实缺-四体材料,其余20份缺-四体材料的名称有误。利用验证后的缺-四体材料将53对SSR引物定位在不同的小麦染色体上。 4.以Mardler×百农3217亲本组合及Mardler×北京837亲本组合的近等基因系为材料,利用5DS端部的SSR标记进行抗白粉病基因Pm2的SSR标记筛选,没有在抗、感材料间找到多态性。将与Pm2基因紧密连锁的RFLP标记BCD1871及5DS端部的EST序列(BE404135)分别转换为3对STS标记和3对SSR标记,均未在抗、感材料间找到多态性。 5.以Pm21×百农3217亲本组合的近等基因系为材料,利用6AS上的SSR标记进行抗白粉病基因Pm21的SSR标记筛选,结果只在感病材料有扩增产物,抗病材料无扩增带。
【学位授予单位】:河北农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:S435.121

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