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《河北农业大学》 2003年
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苹果砧木耐盐变异细胞系筛选和鉴定指标的研究

李增裕  
【摘要】: 本试验以苹果砧木愈伤组织和悬浮细胞系为材料,对苹果砧木耐盐变异细胞系的筛选技术和适宜鉴定指标的选择进行了研究。主要结果如下: 1 不同苹果砧木种类对EMS的敏感性不同,愈伤组织的相对生长量随处理浓度提高和时间的延长而降低。EMS溶液处理愈伤组织适宜的处理剂量为:0.2%+1.5h;EMS加入培养液处理悬浮细胞系的适宜处理剂量为0.02%+2d。 2 苹果砧木愈伤组织和悬浮细胞系经筛选系统选择,初步确立了9个变异细胞系,其中Hyp变异细胞系7个,NaCl变异细胞系2个。所用的3种筛选方法中,经一步正筛选获得4个变异细胞系;经连续多步筛选获得3个变异细胞系;经间隙多步筛选获得2个变异细胞系。对变异细胞系进行生理生化指标的鉴定发现,Hyp变异细胞系耐盐性高于NaCl变异细胞系;经~(60)Co-γ辐射和EMS双因素诱变处理的变异细胞系耐盐性高于经EMS单因素处理的变异细胞系。Hyp变异细胞系中,经由多步筛选获得的变异细胞系耐盐性高于经由一步筛选获得的变异细胞系。 3 在所鉴定的7个生理生化指标中,变异细胞系的相对生长量、SOD活性、POD活性、Pro含量均高于对照,细胞膜透性、氯离子含量、MDA含量均低于对照,表现出较高的耐盐性。本试验认为细胞相对生长量、细胞膜透性、MDA含量和氯离子含量可以作为耐盐性鉴定的指标,游离脯氨酸含量和POD活性可以作为参考指标,SOD活性不宜作为耐盐性的鉴定指标。 4 变异细胞系经无盐继代培养后仍具有较高的游离脯氨酸积累能力,表明变异细胞系具有稳定的耐盐性。试验确立了78-48适宜的分化培养基组分为MS+蔗糖3.5%+琼脂0.6%+TDZ 0.5 mg·L~(-1)+BA 0.5 mg·L~(-1)+CA 0.02mmol·L~(-1)+KT 0.15 mg·L~(-1)。Hyp变异细胞系仍具有较高的分化率,是NaCl变异细胞系分化能力的4倍。78-48变异细胞系分化植株在NaCl 0.8%水平上生长状况好于对照。
【学位授予单位】:河北农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:S661.1

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【引证文献】
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