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《河北农业大学》 2005年
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李种质资源RAPD、SSR、ISSR亲缘关系鉴定及遗传多样性研究

冯晨静  
【摘要】:李是蔷薇科(Rosaceae)李属(Prunus)植物。我国李种质资源极其丰富,品种类型多样。但在长期育种过程中,存在着主栽品种的遗传基础狭窄,遗传基础单一等缺陷,加之有些地方品种本身并无科学名,导致品种资源不仅类型多而且名称乱,同名异物或同物异名现象严重,给种质资源的保存、育种和生产带来极大不便。本研究采用RAPD、SSR及ISSR三种DNA分子标记技术,分别对60份李种质进行了种间亲缘关系鉴定及遗传多样性检研究,以期从DNA水平上评价我国李资源的多样性,明确李品种、种的亲缘关系和分类地位、并区分同物异名、同名异物现象,建立主要品种的DNA指纹图谱,为李核心种质的构建和资源的科学保存提供依据。试验结果表明: (1) 李属植物RAPD最优化反应体系为:总反应体积20μl,10×buffer(20 mMMgSO_4,100 mMKC1,80 mM(NH_4)SO_4,100 mMTris~HCl,0.5%NP-40,pH9.0)2μl,DNA模板80ng,引物浓度0.1μM,dNTP 0.15~0.2 mM,TaqDNA聚合酶为0.5~1.0U,Mg~(2+)2.5~3.0 mM。PCR反应反应热循环程序:预变性94℃,5min;变性94℃,1min;退火39.2~39.8℃,1mim延伸72℃,2min;循环45次;后延伸72℃。 (2) 李属植物ISSR最优化反应体系:总反应体积20μl,10×buffer(20 mMMgSO_4,100 mMKCl,80 mM(NH_4)SO_4,100 mMTris-HCl,0.5%NP-40,pH9.0)2μl,DNA模板20~80ng,引物浓度0.15~0.2μM,dNTP 0.1~0.15 mM,TaqDNA聚合酶为0.5~1U,Mg~(2+)2.5-3.0 mM。反应热循环程序为:预变性94℃,5min;变性94℃,45 s;最佳退火温度50~50.8℃,1min;延伸72℃,1.5mira循环40次。 (3) 根据对60种李属植物材料的RAPD、SSR、ISSR标记研究,聚类结果表明,可将所用李属植物的试材划分为三大类:第一类为杏、杏李杂交种;第二类为中国李系统品种;第三类欧洲李品种;另外,还有其他特殊类型。 (4) 样品间的两两相似系数,用RAPD检测为0.11~0.98,ISSR为0.19~1.00,SSR为0.042~0.98。三种分子标记的多态性均较高,对李种质资源的鉴定效率次序为SSRRAPDISSR。 (5) 获得了RAPD标记中不同材料的24条特异性扩增带,SSR标记中48个特异等位基因,ISSR标记中6份试材的18个特异性扩增带。区分了3份试验材料名称均为香蕉李(8,11,49号材料分属于杏李(P. simonii),乌苏里李(P. ussuriensis)和中国李(P. salicina))的同名异物材料。
【学位授予单位】:河北农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S662.3

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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中国博士学位论文全文数据库 前2条
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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【共引文献】
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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5 房经贵;乔玉山;高志红;王三红;;DNA保存在果树种质资源保存中的利用策略[A];中国园艺学会第四届青年学术讨论会论文集[C];2000年
6 陈学森;高东升;李宪利;张艳敏;张连忠;束怀瑞;;中国杏种质资源、遗传育种及生物技术研究进展[A];中国园艺学会第五届青年学术讨论会论文集[C];2002年
7 杨红花;冯宝春;陈学森;;DNA分子标记在核果类果树上的研究进展[A];中国园艺学会第五届青年学术讨论会论文集[C];2002年
8 易干军;于晓英;霍合强;谭卫萍;陈大成;黄自然;黄秉智;;应用AFLP进行香牙蕉品种(系)的鉴别与分类[A];中国园艺学会第五届青年学术讨论会论文集[C];2002年
9 黄代青;吕柳新;;几种果树基因组NBS-LRR类R基因同源序列的克隆与分析[A];中国园艺学会第五届青年学术讨论会论文集[C];2002年
10 刘成明;梅曼彤;;无患子科果树植物DNA的高效提取及RAPD分析体系的优化[A];中国园艺学会第五届青年学术讨论会论文集[C];2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 秦伟;新疆野苹果繁育特性及种质资源亲缘关系研究[D];新疆农业大学;2010年
2 唐丽;湖南南天竹遗传多样性及园林利用评价体系研究[D];中南林业科技大学;2007年
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4 闫小玲;基于cpDNA单倍型和SSR分析的银杏群体遗传结构和谱系地理学研究[D];浙江大学;2010年
5 王玉山;侧柏种源遗传多样性与地理变异规律研究[D];山东农业大学;2011年
6 王延玲;新疆红肉苹果红色发育机理的初步研究[D];山东农业大学;2011年
7 姜英淑;欧李抗逆性研究和不同资源农艺性状与分子标记遗传变异[D];东北林业大学;2009年
8 吴则焰;孑遗植物水松保护生物学及其恢复技术研究[D];福建农林大学;2011年
9 张玮;北沙柳种质资源的多样性分析与优良无性系筛选[D];内蒙古农业大学;2011年
10 刘锦川;加拿大披碱草与老芒麦亲缘关系及抗性生理研究[D];内蒙古农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 钟慧臻;荔枝果肉多酚及脂肪酸指纹图谱初步研究[D];华中农业大学;2010年
2 郭一鸣;全球白菜型油菜遗传多样性分析[D];华中农业大学;2010年
3 郑瑜;银杏核心种质构建初探[D];华中农业大学;2010年
4 吴茜;中国香菇自然种质遗传多样性SRAP和IGS2分析[D];华中农业大学;2010年
5 高伟;四倍体棉种的遗传多样性分析[D];华中农业大学;2010年
6 韩芳;甘蓝型油菜A3染色体遗传连锁图谱的构建[D];华中农业大学;2010年
7 陈静;利用杀配子染色体诱导小麦—二倍体长穗偃麦草3E染色体易位研究[D];哈尔滨师范大学;2010年
8 李伟波;核桃(Juglans regia)SRAP遗传连锁图谱的构建和QTL定位[D];山东农业大学;2010年
9 王京梅;叶籽银杏叶生雌性生殖器官发育相关基因的克隆与序列分析[D];山东农业大学;2010年
10 郭梁;甜樱桃实生后代品质性状的遗传变异及远缘杂种根癌病抗性鉴定[D];山东农业大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前1条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 林辰壹;新疆葱属植物资源研究[D];新疆农业大学;2010年
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7 蔡宇良;野生樱桃种质资源的遗传分析及其栽培品种的DNA指纹鉴定[D];西北大学;2006年
8 何天明;中国普通杏(Prunus Armeniaca)种质资源遗传多样性及紫杏(P.dasycarpa)起源研究[D];山东农业大学;2006年
9 孟海军;柑橘胚胎发生过程中DNA甲基化/去甲基化研究及SSR标记开发[D];华中农业大学;2006年
10 黎海利;萱草属部分种和栽培品种资源调查及亲缘关系研究[D];北京林业大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李伟波;核桃(Juglans regia)SRAP遗传连锁图谱的构建和QTL定位[D];山东农业大学;2010年
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6 彭云滔;野生罗汉果遗传多样性的ISSR和RAPD分析[D];广西师范大学;2005年
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8 李闯;欧洲李生物学特性及栽培技术研究[D];山东农业大学;2005年
9 刘存宏;鲜食葡萄品种对比试验及生物学特性研究[D];山东农业大学;2006年
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【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孙雯雯;孙俊;周军永;孙其宝;;枣ISSR反应体系的建立及其指纹图谱构建[J];安徽农业大学学报;2011年06期
2 支婷;刘春琴;崔建州;杜克久;;鸭梨Hc ISSR-PCR反应体系的优化[J];北方园艺;2011年12期
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中国重要会议论文全文数据库 前1条
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中国博士学位论文全文数据库 前3条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【相似文献】
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3 邓传良;石蒜属植物系统学及长筒石蒜遗传多样性研究[D];南京林业大学;2005年
4 李周岐;鹅掌楸属种间杂种优势的研究[D];南京林业大学;2000年
5 晁岳恩;东南景天锌超积累过程中基因表达差异的cDNA-AFLP分析[D];浙江大学;2008年
6 罗素兰;中国野葡萄资源的RAPD标记及其应用的研究[D];西北农业大学;1999年
7 吴孝兵;扬子鳄保护遗传学及线粒体基因组全序列研究[D];南京师范大学;2001年
8 逯晓萍;高丹草遗传图谱构建及重要农艺性状的基因定位研究[D];内蒙古农业大学;2005年
9 王丽;珍稀濒危植物华山新麦草的胚胎学及其遗传多样性研究[D];西北大学;2005年
10 李振侠;苹果砧木耐盐突变体的筛选及其鉴定[D];河北农业大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 冯晨静;李种质资源RAPD、SSR、ISSR亲缘关系鉴定及遗传多样性研究[D];河北农业大学;2005年
2 张晓蕾;利用RAPD,ISSR,SRAP标记方法对白桦遗传多样性的研究[D];东北林业大学;2011年
3 李岩;天然红松遗传多样性在时间尺度上变化的RAPD和ISSR分析[D];辽宁师范大学;2005年
4 王涛;烟草遗传多样性与亲缘关系的RAPD和ISSR分析[D];福建农林大学;2005年
5 房新英;RAPD和ISSR技术在牙鲆遗传多样性研究中的应用[D];中国海洋大学;2005年
6 曲丽娜;兴安、长白及华北落叶松RAPD和ISSR分子标记的物种特异性鉴定[D];东北林业大学;2006年
7 王小芬;盐地碱蓬遗传多样性的RAPD和ISSR分析[D];山东师范大学;2007年
8 许梦云;道地药材茅苍术的遗传多样性分析[D];江苏大学;2009年
9 张玲玲;南方红豆杉DNA指纹图谱技术研究[D];福建农林大学;2009年
10 肖祖梅;观赏南瓜种质资源遗传多样性的RAPD和ISSR分析[D];西南大学;2008年
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