收藏本站
《河北农业大学》 2007年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

枣体细胞胚胎发生及倍性种质创新

王娜  
【摘要】: 本文以冬枣组培苗叶片为外植体,利用固体培养技术,对影响枣叶片体细胞胚胎发生的多种培养因子进行了研究,并从组织细胞学方面对枣体细胞胚胎形态建成的机理进行了初步研究;进而利用所建立的叶片体细胞胚胎发生培养体系进行了多倍体诱导,并利用花药培养和多细胞起源的不定芽再生体系等多种方法进行了枣的倍性种质创新研究。主要研究结果如下: 1.以冬枣离体叶片为外植体首次建立了冬枣叶片体细胞胚胎发生培养体系。冬枣离体叶片在MS+麦芽糖20g/L+琼脂3g/L+TDZ10.0mg/L的固体培养基上,可获得初始愈伤组织,但愈伤组织在调整渗透压、激素种类、光照条件及添加防褐化剂的情况下仍不能进行继代培养。但将叶片接种在MS+麦芽糖20g/L+琼脂3g/L+TDZ10.0mg/L+AgNO_32.0mg/L的培养基上暗培养,不经过转换培养基即可一步实现愈伤组织诱导和胚状体分化,分化率达84.9%。获得的胚状体在MS+蔗糖40g/L+琼脂4g/L+CH500mg/L的无激素培养基上发育成熟;在1/2MS+蔗糖20g/L+琼脂4g/L+IBA2.0mg/L的培养基上诱导生根获得完整再生植株。 2.对冬枣离体叶片体细胞胚胎发生过程进行组织细胞学观察发现:(1)枣叶片体细胞胚以间接方式发生,即先由叶片脱分化产生愈伤组织,再从愈伤组织上再分化形成胚状体。(2)枣叶片体细胞胚以单细胞外起源发生,即叶片体细胞胚胎均起源于胚性愈伤组织中的单个胚性母细胞,且大多数胚性母细胞位于愈伤组织近表层的几层细胞。(3)枣体胚发生过程中存在生理隔离现象。(4)枣叶片体细胞胚发生存在不同步化现象。(5)枣叶片体细胞胚发生过程中存在三次淀粉粒积累高峰:胚性愈伤组织时期、球形胚期、鱼雷胚期。 3.开展枣花药培养取得成功。枣花药在MS+麦芽糖20g/L+2,4-D1.0mg/L的培养基上,可诱导出乳白色、块状初始愈伤组织,该类愈伤组织在2,4-D和TDZ作用下均不能进行增殖和分化培养;枣花药在MS+麦芽糖20g/L+TDZ1.0mg/L的培养基上可诱导出淡黄色、颗粒状初始愈伤组织,该类愈伤组织在MS+麦芽糖20g/L+TDZ1.0mg/L培养基上继续增殖,保持淡黄色颗粒状,在MS+麦芽糖20g/L+TDZ1.0mg/L+AgNO_30.5mg/L固体培养基上可诱导胚状体发生。枣花药胚状体易发生玻璃化现象,在MS+蔗糖40g/L+琼脂4.0g/L的培养基上,从三倍体赞皇大枣花药胚状体中获得一株正常植株。经叶片DNA含量和茎尖染色体数目鉴定,本试验首次获得了赞皇大枣的2n花粉植株。经组织细胞学观察,枣花药体细胞胚也以间接方式单细胞外起源方式发生,胚状体发生过程中同样存在生理隔离和不同步化现象,且花药胚状体存在畸形胚。 4.利用叶片体细胞胚胎发生体系一步获得了冬枣纯合四倍体。秋水仙素浸泡法对叶片伤害大,叶片无胚状体发生;利用秋水仙素培养基混培法时,枣叶片有胚状体发生,当培养基秋水仙素浓度为15mg/L时,再生体胚发生变异,经流式细胞仪叶片DNA含量和茎尖染色体数目检测,变异植株为纯合四倍体,染色体数为2n=2x=48。 5.利用叶片直接再生不定芽体系获得了冬枣二、四倍体嵌合体。枣叶片在MS+琼脂3g/L+麦芽糖20g/L+BA1.0mg/L或TDZ1.0mg/L+AgNO_31.0mg/L的培养基上可直接再生不定芽,不定芽再生率分别为97.3%和90.1%。再生不定芽分别在MS+蔗糖40g/L+琼脂4g/L+BA1.0mg/L+ IBA0.5mg/L和1/2MS+蔗糖20g/L+琼脂4g/L+IBA1.0mg/L培养基上增殖和生根。利用秋水仙素培养基混培法在叶片不定芽诱导时进行诱变,当培养基中秋水仙素浓度为15mg/L时,再生不定芽发生变异,经流式细胞仪DNA含量检测,变异植株为嵌合体。 6.开展了利用田间枝干愈伤组织不定芽再生体系诱导多倍体研究,在TDZ4.0mg/L+AgNO_32.0mg/L作用下,枝干截面形成层处可产生大量乳白色愈伤组织,愈伤组织诱导率高达100%,不定芽诱导率为74.2%。但经流式细胞仪DNA含量检测,秋水仙素处理的田间愈伤组织不定芽未发生变异,未能获得多倍体。
【学位授予单位】:河北农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S665.1

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王丹丹;郭文坛;蒋健;李志新;;蓝莓叶片原生质体的制备[J];辽东学院学报(自然科学版);2011年02期
2 李翠英;;盆花叶片发黄成因及对策[J];绿化与生活;2011年06期
3 肖蓉;王国平;李晓梅;李春燕;张拥兵;聂爱英;田建宝;;体细胞无性系变异在枣育种中的应用展望[J];北方园艺;2011年14期
4 马生健;杨艳梅;;不同激素对蝴蝶兰幼叶诱导原球茎的影响[J];广东农业科学;2011年10期
5 郭庆梅;周凤琴;吴群;赵卫丽;张永清;;忍冬不同农家品种叶形态特征比较[J];中国中药杂志;2011年14期
6 张存智;;枣幼胚愈伤组织诱导和胚状体发生[J];北方园艺;2011年13期
7 施林芳;李士海;;盆栽菊花如何保护叶片[J];农民致富之友;2010年01期
8 王意成;;逗人喜爱的金毛狗[J];花木盆景(花卉园艺);2011年07期
9 李雁津;邱服斌;陈美娟;张海杰;;骏枣内生生防细菌的分离、筛选与鉴定[J];微生物学通报;2011年07期
10 蒙先举;陶文丞;韦景枫;覃凤好;张声涛;;虎耳草组培快繁技术试验研究[J];中国园艺文摘;2010年12期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 潘娟娟;骆勇;马占鸿;;小麦受条锈病菌侵染叶片的早期Real-Time PCR检测方法研究[A];粮食安全与植保科技创新[C];2009年
2 许红云;陈丽娟;;云南稻种资源的香型分类及叶片和精米香味的相关分析[A];云南省作物学会2000—2003年优秀论文选集[C];2004年
3 黄太平;;涡轮叶片细微冷却通道周边区域应力分析[A];福建省科协第三届学术年会装备制造业专题学术年会论文集[C];2003年
4 程坤;崔磊;杨丽梅;方智远;刘玉梅;庄木;张扬勇;;甘蓝几个材料的光合生理生化指标及其叶片超微结构的比较[A];庆祝中国园艺学会创建80周年暨第11次全国会员代表大会论文摘要集[C];2009年
5 陈发兴;刘星辉;陈立松;陈秀萍;;枇杷叶片有机酸组分分析[A];中国园艺学会第十届会员代表大会暨学术讨论会论文集[C];2005年
6 张惠玲;刘新忠;郭记迎;贾中伏;崔惠英;张惠娟;;绿宝石梨枝、叶、果生长动态研究[A];全国第四届梨科研、生产与产业化学术研讨会论文集[C];2005年
7 杨德琴;刘建国;陈筑;张燕;马欣荣;吴家媛;张剑;关薇薇;;转基因生菜叶片转化体系的优化[A];2007年第七次全国牙体牙髓病学学术会议论文集[C];2007年
8 彭黎明;;烤烟烟梗中某些香味成分的分析研究[A];中国烟草学会2006年学术年会论文集[C];2007年
9 韩天龙;阮中健;陈赤囡;亓宝生;;烟气轮机叶片断裂原因分析[A];2007年中国机械工程学会年会论文集[C];2007年
10 兰彦平;周连第;姚砚武;王尚德;胡伟娟;曹庆昌;;板栗叶片及坚果形态特征的表型变异研究[A];第五届全国干果生产、科研进展学术研讨会论文集[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 李瞧 收集整理;中材科技签下15亿元叶片合同[N];中国工业报;2009年
2 姜华;盐城汉德风电首支2兆瓦叶片试产成功[N];中国建材报;2009年
3 青文;风电叶片市场或生变局[N];中国建材报;2010年
4 范凯;中国科学院获准建立国家级风电叶片检测中心[N];中国建材报;2010年
5 周林伟 记者 宋莉;750kW风力发电机叶片研发成功[N];科技日报;2005年
6 天相投资 肖世俊;天奇股份签订竹制风电叶片供货合同[N];中国证券报;2009年
7 本报记者 李松战 通讯员 贾宏虎;国内最大风电叶片将在洛诞生[N];洛阳日报;2009年
8 记者 吴正懿 编辑 全泽源;中材科技投建3兆瓦风电叶片项目[N];上海证券报;2010年
9 林双华 潘文鹏;南日风电“巨无霸”叶片启吊[N];福建日报;2005年
10 本报记者 徐锐;中材科技3亿元投建风电叶片项目[N];上海证券报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王娜;枣体细胞胚胎发生及倍性种质创新[D];河北农业大学;2007年
2 马志勇;大型风电叶片结构设计方法研究[D];华北电力大学(北京);2011年
3 肖深根;温室番茄干物质优化分配与苗期生长模拟研究[D];湖南农业大学;2004年
4 崔永兰;石蒜属植物cDNA文库构建与表达序列标签(EST)分析[D];南京林业大学;2004年
5 姬书得;水轮机转轮焊接残余应力调控措施的虚拟优化[D];哈尔滨工业大学;2006年
6 张志宏;苹果叶片离体再生不定芽及遗传转化的研究[D];沈阳农业大学;1996年
7 李培武;甘蓝型油菜叶片与种子硫苷相关性研究[D];华中农业大学;2007年
8 齐靖;鸭梨ACC氧化酶基因克隆及反义转化与枣遗传连锁图谱加密的研究[D];河北农业大学;2009年
9 许林;枫香基因转化体系的研究以及枫香AGAMOUS基因的初步功能分析[D];华中农业大学;2008年
10 张力宁;点云数据抗噪处理方法及其在叶片重建中的应用研究[D];西北工业大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 胡海滨;叶片四轴清根加工算法及工艺优化方案研究[D];西北工业大学;2005年
2 刘轶茜;小麦叶片凋亡的形态及生理证据[D];河北师范大学;2002年
3 徐爱春;红富士苹果叶片主要矿质元素与果实产质量关系的研究[D];河北农业大学;2004年
4 高京草;中国枣资源研究与利用[D];西北农林科技大学;2005年
5 周瑞金;枣(Ziziphus jujuba Mill.)离体叶片高效再生体系的建立[D];河北农业大学;2004年
6 杨海峰;酸樱桃(Prunus cerasus)叶片离体再生方法的研究[D];内蒙古农业大学;2001年
7 张晓峰;航空发动机机匣包容性的试验研究与仿真计算[D];浙江大学;2005年
8 姚利兵;基于特征的整体叶盘CAD造型系统研究[D];西北工业大学;2006年
9 于桂欣;叶片多轴加工中的刀具轨迹动力学分析与补偿方法研究[D];西北工业大学;2006年
10 于建民;叶片温辊轧成形工艺及装备研究[D];中北大学;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026