收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

杨树多基因遗传转化及外源基因表达研究

韩会景  
【摘要】: 以转抗虫基因741杨为受体,进一步转化了发根农杆菌Ri质粒T—DNA,获得了转多基因741杨株系,通过转多基因植株生根特性、形态变异、叶片Bt毒蛋白含量、激素含量及抗虫性分析,初步筛选出了抗虫易扦插转基因741杨株系;探讨了外源基因(BtCrylAc基因和Ri质粒T—DNA)在转多基因植株中表达的相互影响及环境胁迫对外源基因表达的影响。在此基础上,将由Ri质粒上克隆出的rolB、rolC基因分别转入了普通741杨,用于研究rolC和rolB基因的功能及在转基因植物中的表现,筛选易生根转基因株系。主要研究结果如下: 1.以具高抗虫性的转抗虫基因741杨株系pb29及多基因转化的741杨(抗虫基因和Ri质粒T—DNA)株系田间苗为材料,研究了转多基因741杨田间的生长特性,观察741杨叶片形状大小、叶片重、叶柄长短。结果表明,转多基因741杨和未转发根农杆菌的植株叶片相比,叶片形状变的短而宽,但单位重量变化不大,4种内源激素含量均增加2倍以上。 2.采用ELISA技术,对转多基因741杨田间植株叶片上的Bt毒蛋白进行测定,并在室温下做了饲虫试验。结果表明,转多基因741杨叶片上Bt毒蛋白含量均小于未转发根农杆菌的双抗虫741杨(Pb29);死亡率和pb29相比,多基因741杨对杨扇舟蛾的致死率降低,但对幼虫的生长发育仍有明显的滞育作用,影响了杨扇舟蛾生命周期正常的完成,对美国白蛾的致死率仍是100%,这说明外源基因发根农杆菌Ri质粒T-DNA的转入,抑制了Bt基因的表达。 3.以转抗虫基因741杨株系pb29及多基因转化的741杨株系组培苗为材料,在NaCl胁迫环境下,研究了不同转基因株系对NaCl胁迫的反应。结果表明,转入Ri质粒T-DNA上的rol基因后,导致苗木根系数量增加,根系长度减小,IAA和GA激素含量显著提高,抗虫BtCrylAc基因的毒蛋白表达量降低;随着NaCl胁迫强度的增加,苗高、根系数量、叶绿素含量及IAA、GA含量逐步降低,而根系的长度提高,Bt毒蛋白表达显著提高,这说明随着环境条件的改变,转基因杨外源基因的表达发生了改变。 4.以741杨为受体,利用农杆菌介导法分别转化了rolB、rolC基因,得到转rolB基因的无性系15个,转rolC基因的无性系2个,通过PCR技术,分别检测了rolB、rolC基因和NptⅡ基因,初步证明,rolB、rolC基因已成功整合到741杨基因组中。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 姜伊娜;武天龙;;毛状根的研究进展及应用[J];中国农业科技导报;2009年01期
2 刘伟;郝建平;;发根农杆菌的研究进展及其应用[J];山西农业科学;2007年07期
3 梁机,林善枝,郭海,陈晓阳;发根农杆菌Ri质粒rol基因的研究现状(英文)[J];Forestry Studies in China;2002年01期
4 林丽;范海延;潘野;赵朔;;发根农杆菌Ri质粒及其在植物次生代谢物质生产中的应用[J];北方园艺;2007年11期
5 邓婷婷;吴扬;黄建安;;发根农杆菌转化茶树细胞的应用前景[J];茶叶通讯;2009年02期
6 于瑞莲;巢建国;;发根农杆菌Ri质粒及在药用植物中的应用[J];现代中药研究与实践;2005年06期
7 刘兴菊;梁海永;杨敏生;周怀军;;发根农杆菌rolC基因的克隆及序列分析[J];西北林学院学报;2007年02期
8 梁机,陈晓阳,林善枝,谢响明;发根农杆菌Ri质粒rol基因研究进展及在林木改良上的应用[J];植物学通报;2002年06期
9 于艳丽;王忆;韩振海;李天忠;孔瑾;许雪峰;;发根农杆菌介导转化小金海棠的影响因素[J];核农学报;2008年05期
10 陶爱群;谢深喜;胡春华;;发根农杆菌Ri质粒rol基因矮化性状表达研究进展[J];湖南环境生物职业技术学院学报;2006年04期
11 张美萍,王毅,安启欣,贾慧鸣,丛云峰;发根农杆菌转化桔梗再生植株的研究[J];吉林农业大学学报;1993年S1期
12 郑茂波;发根农杆菌Ri对北五味子的遗传转化研究[J];黑龙江畜牧兽医;2005年07期
13 陶均,李玲;发根农杆菌菌株的综合鉴定及活力比较[J];亚热带植物科学;2005年02期
14 王毅,张美萍,贾慧鸣,安启欣;桔梗发状根培养物的建立[J];吉林农业大学学报;1993年04期
15 陈敏,王和勇,廖志华,孙敏;发根农杆菌介导的药用植物遗传转化研究进展[J];天然产物研究与开发;2000年03期
16 杨春贤;阳义健;彭梅芳;陈敏;兰小中;廖志华;;颠茄发根培养系统的建立(英文)[J];西南师范大学学报(自然科学版);2006年02期
17 姚庆收;倪艳波;潘效红;徐大财;李宪玉;;发根农杆菌诱导苦参毛状根的研究[J];安徽农业科学;2007年34期
18 孟凡娟;王秋玉;谢立波;杨传平;;利用发根农杆菌诱导毛状根的研究进展[J];北方园艺;2008年12期
19 毕博;徐大卫;闻玉丽;刘亚磊;杨世海;林悦;;不同培养条件对牛膝发根诱导的研究[J];中国现代中药;2010年07期
20 刘兴菊;刘英亘;梁海永;杨敏生;周怀军;;发根农杆菌转化三倍体毛白杨[J];西北林学院学报;2006年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 冯怀蓉;王炜;常玮;茆军;余荭;;Ri质粒研究进展[A];新世纪(首届)全国绿色环保农药技术论坛暨产品展示会论文集[C];2002年
2 陈敏;王和勇;廖志华;孙敏;易茂祥;;Ri质粒对药用植物遗传转化研究进展[A];重庆市遗传学会第一届学术年会暨纪念孟德尔规律再发现100周年学术讨论会论文集[C];2000年
3 张明生;杨小蕊;曹然;;三分三植株再生体系建立及发根农杆菌介导的遗传转化[A];第十届全国药用植物及植物药学术研讨会论文摘要集[C];2011年
4 盛长忠;元英进;姜燕;;发根农杆菌R_(1000)对优美红景天(Rhodiola coccinea) 愈伤组织的遗传转化[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年
5 徐淑红;李新玲;王全伟;张延明;徐香玲;;四种发根农杆菌对龙胆的遗传转化的研究[A];2006年全国生化与生物技术药物学术年会论文集[C];2006年
6 曹燕燕;杨业华;;发根农杆菌Ri质粒及rol转基因植物研究[A];中国棉花学会2007年年会论文汇编[C];2007年
7 徐洪伟;周晓馥;;用发根农杆菌建立高山红景天毛状根培养系统及次生代谢物的研究[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年
8 马立晖;胡秀臣;;转基因技术在大豆抗病虫害育种上的应用[A];内蒙古农学会2004学术年会论文集[C];2004年
9 李新玲;邢德峰;徐香玲;;Ri质粒介导的几丁质酶基因转化小麦的初步研究[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
10 赵寿经;钱延春;骆晓沛;张昕;梁彦龙;蒋磊;;Ri质粒T-DNA对人参发根皂苷含量影响机制的研究[A];科技、工程与经济社会协调发展——中国科协第五届青年学术年会论文集[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 毛清黎;Ri质粒对茶树和苦瓜的遗传转化及相关功能成分研究[D];湖南农业大学;2006年
2 王保民;Bt毒蛋白免疫检测试剂盒的制备及应用[D];中国农业科学院;2000年
3 徐洪伟;发根农杆菌诱导玉米毛状根再生植株及抗旱性研究[D];东北师范大学;2007年
4 黄萱;小麦NBS-LRR抗性基因克隆以及基因枪介导的遗传转化和由发根农杆菌介导的苦荞遗传转化[D];西北大学;2006年
5 阮龙;基于发根体系的甘薯茎线虫病研究及甘薯遗传转化体系建立[D];安徽农业大学;2007年
6 张廷婷;转正、反义磷脂酶Dα基因和Bt毒蛋白基因毛白杨的获得及其抗性分析[D];山东农业大学;2008年
7 韩兰芝;转cry1Ac/CpTI基因水稻对鳞翅目害虫种群的影响及靶标害虫的抗性风险评价[D];中国农业科学院;2007年
8 张桂芬;转基因Bt棉对棉田害虫和天敌作用机理的研究[D];中国农业科学院;2003年
9 吴颖;茶树主要品质性状关键基因的反义基因遗传转化及表达研究[D];浙江大学;2005年
10 张广辉;茶树遗传转化及UV-B对香气相关基因表达影响的研究[D];浙江大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 韩会景;杨树多基因遗传转化及外源基因表达研究[D];河北农业大学;2007年
2 张淑娟;多基因转化741杨及其基因表达的初步研究[D];河北农业大学;2006年
3 张程程;发根农杆菌介导的棉花遗传转化的研究[D];中国农业科学院;2011年
4 徐强;Bt毒蛋白受体基因Bt-R3在大肠杆菌中的表达及受体蛋白结构和功能的初步研究[D];浙江大学;2003年
5 贾冬梅;Ri质粒诱导西洋参产生发根及其发根培养条件的优化研究[D];吉林大学;2007年
6 宋国琦;Bt抗虫棉不同叶位Bt基因时空表达差异及调控[D];西北农林科技大学;2003年
7 王沛;Ri质粒介导八角莲遗传转化及毛状根鬼臼毒素产生的初步研究[D];浙江大学;2006年
8 宋志红;Ri质粒转化的烟草发状根培养及其烟碱生物合成调控的研究[D];河南农业大学;2003年
9 陈亚琼;Ri质粒介导水母雪莲(S.Medusa Maxim)的遗传转化及毛状根中黄酮合成的调节[D];西南农业大学;2003年
10 齐莹;黄瓜毛状根培养及其毛花洋地黄LAE基因转化的研究[D];华南师范大学;2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 小可;基因污染——新世纪的忧患[N];中国审计报;2001年
2 沈孝宙;基因污染 新世纪的忧患[N];人民政协报;2001年
3 徐 良;基因工程在植物类中药生产中极具潜力[N];中国中医药报;2003年
4 庾晋 子荫;基因技术开辟中药新时代[N];大众卫生报;2003年
5 章义;基因药物一路走好[N];厂长经理日报;2001年
6 本报记者 罗晖 实习生 李智勇;Bt转基因水稻真的有毒吗?[N];科技日报;2005年
7 杨云;生物技术在传统中药材生产中的应用[N];中国中医药报;2000年
8 万惠恩;抗虫棉不宜与豆类间作套种[N];农民日报;2003年
9 记者 陆旭升;非法转基因米没有流入婺城[N];金华日报;2005年
10 梁展红 郭胜民;全球药物创新的六大模式[N];中国医药报;2002年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978