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《河北农业大学》 2008年
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仁用杏与扁桃属间杂交种的获得及SSR分析

蔡胜文  
【摘要】: 本文以仁用杏及扁桃为试验材料,通过TTC染色法对授粉前父本花粉的活力进行了测定,运用DPSv3.01专业版数据处理系统软件对授粉后坐果率的调查数据进行了分析;利用荧光显微技术对花粉在柱头的萌发情况及花粉管的生长状况进行了动态观察;采用正交设计对仁用杏杂交苗SSR-PCR反应的5因素4水平进行试验;在新体系的基础上对50个杂交苗进行了分析。结论如下: 1.通过TTC染色对花粉的观察,可知父本花粉的活力都很高,能够满足杂交授粉的要求,但是也存在一定的局限性,不能很准确的反映出花粉萌发力的大小;坐果率的调查数据经DPSv3.01专业版数据处理系统软件分析后,可知三个杂交组合之间的差异均显著(α=0.05)。 2.对仁用杏×扁桃属间杂交授粉后花粉管的行为进行观察。结果表明,扁桃的花粉能在仁用杏的花柱头上萌发,进入花柱,到达花柱基部,进入子房。杂交后,花粉管到达花柱1/2处时花粉管数量明显变少,极少数的花粉管到花柱基部进入子房,个别花粉管出现局部膨大或变细、末端变细、中间断开或折叠等现象,但没有出现胼胝质的大量沉积。 3.采用正交设计对仁用杏杂交苗SSR-PCR反应的5因素4水平进行试验,通过极差分析法对结果进行分析,建立了仁用杏杂交苗SSR-PCR反应的最佳体系:即在20μL反应体系中,1×buffer、2.0 mM/L Mg~(2+)、0.25 mM/L dNTPs、0.25μM/L Primer、60ng/20μL模板DNA和0.05 U/μL Taq酶。 4.在新SSR-PCR体系中对32对引物进行了筛选,最终得到了13对信号强、多态性高的引物。利用这13对引物对父母本及杂种苗等55个样品进行了分析,结果为:13对引物平均鉴定率达到了69.69%,其中有9对的鉴定率高于70%,占总数的69.23%,引物13号和30号的鉴定率最高为100%,24号引物最低只有10%。这表明,所选用的SSR引物的多态性高、信号强,其产生的多态性差异能够有效用于50个杂交后代鉴定。 5.运用统计分析软件NTSYSpc2.02a对扩增产物的谱带进行UPGMA分析,由遗传相似系数可知55份试验材料的GSC值在0.65~1.00之间,平均值达到了0.83,其中有52份材料的GSC值在0.74~1.00之间,占供试材料总数的94.5%。另由树状图得知在L_1处可将55份供试材料分成5大类,除父本4号与母本龙王帽各自成一类外,其余3个父本与杂交苗有规律的聚类在一起,但只有父本1号与P6-N-4、P6-N-7、P6-N-8等14个杂交苗聚类到了一起,表现出偏父型。
【学位授予单位】:河北农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:S662

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