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《河北农业大学》 2010年
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利用AFLP技术对谷子抗锈基因进行分子标记

潘文嘉  
【摘要】: 谷子锈病是对谷子产量有严重影响的主要病害之一,培育和利用谷子抗锈品种是当前控制其危害的一种最为经济有效的措施。寻找与谷子抗锈基因连锁的分子标记,构建遗传连锁图,对于抗谷子抗锈病基因的分离和利用具有重要意义。 本研究对谷子高抗锈病品种十里香和高感锈病品种豫谷1号及其杂交后代F2代分离群体进行AFLP分子标记分析。取得以下主要结果: 1.采用改良的CTAB法获得高质量的谷子基因组DNA,并用限制性内切酶MseⅠ和EcoRⅠ双酶切谷子基因组DNA。应用AFLP分子标记技术对谷子F2代分离群体进行分析。随机选择270对AFLP引物组合对抗锈亲本,感锈亲本以及F2代分离群体的抗锈基因池和感锈基因池进行分析,发现有92对引物组合能揭示出多态性。 2.对筛选出的92对引物组合多次重复性验证F2代单株,检测结果显示引物组合E-AAC/M-ATA,E-AAC/M-CGT和E-AC/M-CC能够在两亲本和F2代分离群体间扩增出稳定的多态性条带。此3对引物组合均能在父本十里香和抗锈基因池中扩增出目的条带,条带长度分别为188bp,212bp和176bp,而母本和感锈基因池中没有相应条带。经MapMaker 3.0软件分析,AFLP分子标记E-AAC/M-ATA,E-AAC/M-CGT和E-AC/M-CC与抗锈病基因Rusi1连锁,遗传距离分别为9.2 cM,9.8 cM和12.4 cM。应用Mapdraw软件构建了这3个AFLP分子标记和谷子抗锈病基因Rusi1的遗传连锁图谱。 3.优化了AFLP分子标记技术在谷子抗锈病基因研究中的反应体系。根据相关文献报道的AFLP分子标记技术在其它作物中的应用情况,结合谷子基因组DNA的的特点,对影响最终检测结果的相关因素进行了详尽研究,对AFLP分子标记技术进行了相关改良,使其能够最有效地应用于谷子抗锈病基因的研究中,构建了一套适合于谷子抗锈病基因研究的AFLP分子标记技术体系。
【学位授予单位】:河北农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S515

【参考文献】
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