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《河北农业大学》 2010年
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河北地区土壤绿僵菌特性研究

韩小勇  
【摘要】: 绿僵菌Metarhizium是防治害虫很有潜力的病原物,在土壤中蕴藏丰富。本研究利用黄粉虫诱饵法对土壤中绿僵菌进行诱集,并对诱得菌株的亲缘关系、菌落形态及生物学特征进行深入研究,旨在了解菌株类型、培养特性与生长环境之间存在的相关关系,同时采用灰色关联度分析法筛选出抗光肩星天牛的综合性状优良的绿僵菌菌株。研究结果如下: 1、采用黄粉虫诱饵法从河北省8个地区采集的11个土样中分离出绿僵菌,绿僵菌分离率为40.7%。从拣出的57个僵虫中共分离出绿僵菌29株,分离率为50.8%,从田地、果园和菜园等植被类型的土样中得到的绿僵菌较多,其中唐山滦南果园中僵虫拣出率最高,绿僵菌的感染率为45%。通过对菌株形态学鉴定,获得金龟子绿僵菌29株。 2、通过正交设计试验优化了绿僵菌RAPD-PCR反应体系,并对不同地理来源金龟子绿僵菌进行DNA多态性RAPD分析。13条引物共扩增出140个条带,平均每个引物产生10.8个,其中多态性位点113个,占总位点数的80.7%。依据遗传距离进行聚类分析,可将12株金龟子绿僵菌划分为2大类4亚类,菌株间最大和最小遗传距离为0.783、0.098。 3、对菌株菌落特征的观察发现,依据供试菌株孢子分布形态或基质色泽,可将供试菌株划分为2大类型,划分结果与菌株在遗传距离为0.46水平的DNA多态性RAPD分析结果一致;依据菌株孢子颜色或珠状渗出液的有无同样可将菌株划分与在遗传聚类为0.25水平时RAPD分析相类似的划分结果,说明利用菌落特征进行菌株亲缘远近类型划分是可行的。 4、菌株在SDAY和PPDA培养基上的生长速率和产孢量均高于较Czapek培养基。但由于菌株不同,其生长和产孢量在SDAY和PPDA两种培养基上的变化有较大不同。菌株生长和产饱受温度或pH值变化的影响较大,并呈现各自不同的特点,从不同培养条件对供试菌株生长和产孢量的变化曲线来看,菌株生长和产孢量在不同培养基条件下的变化幅度最大,其次是温度,pH值最小。同时发现,无论在哪种培养条件下,菌株产孢量变化曲线较生长曲线变化幅度大。 5、在对光肩星天牛成虫的毒力测定中, wtls、blbh和hsjt致病性较强,LD50分别为3.07、4.01、4.60。毒力是衡量菌株生物防治潜力的重要指标,也是筛选优良菌株的基本依据,但生防菌株对一些不良环境应有较好的适应性,比如它对高低温的适应性和对化学农药的抗耐药性等,也是影响该菌能否最终成功应用于实际生产的关键条件。因此,通过构造相对优化序列进行菌株灰关联度分析,结果发现wtbh、wtkh和wqcd与参考菌株的加权关联度较大,分别为0.7095、0.6906、0.6759,并且均大于采用等权关联度分析得出的最优菌株的关联度(zhys,0.6723)。
【学位授予单位】:河北农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S476.1

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【引证文献】
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【同被引文献】
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